中国农业科学院兰州兽医研究所甘肃省动物寄生虫病重点实验室

作品数:15被引量:71H指数:4
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发文领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
发文主题:毕赤酵母真核表达基因微小牛蜱牦牛更多>>
发文期刊:《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》《甘肃农业大学学报》《生物工程学报》《中国预防兽医学报》更多>>
所获基金:国家高技术研究发展计划国家自然科学基金甘肃省自然科学基金农业部农业结构调整重大技术研究专项项目更多>>
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猪链球菌2型胞外因子短片段的原核表达及其免疫保护力
《中国兽医科学》2009年第5期421-425,共5页王冬梅 王凡 殷宏 曾巧英 
国家自然科学基金项目(30571389);甘肃省农业生物技术研究与应用开发项目(GNSW-2008-09);中国博士后科学基金项目(20080430788);甘肃省自然科学基金项目(3ZS051-A25-060)
以江苏分离株HA9801基因组DNA为模板,扩增猪链球菌2型(SS2)胞外因子ef基因的1423~2203bp片段,并将其亚克隆至表达载体pGEX-4T-1上,构建了重组质粒pGEX-4T-1-ef。将鉴定阳性的质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),0.5mmol/LIPTG诱导8h,表达的融...
关键词:猪链球菌2型 胞外因子 原核表达 免疫保护力 
猪CD8β基因的克隆、表达及其结构与功能分析被引量:5
《中国预防兽医学报》2008年第9期737-742,共6页王生富 景志忠 陈国华 房永祥 莫斯科 段凤云 何延华 
“863”项目(2006AA10A203);国家支撑计划项目(2006BAD31B03)
本研究应用RT-PCR技术,从猪胸腺细胞总RNA中扩增、克隆了猪CD8β基因,序列分析表明CD8β含621bp的开放阅读框,编码207个氨基酸,与NCBI/GeneBank已发表的参考基因的核苷酸及推导氨基酸序列的同源性分别为97.8%和96.8%,与人、小鼠和鸡CD8...
关键词:猪CD8 Β基因 克隆 表达 结构预测 
牦牛α-干扰素基因的克隆及其原核表达的研究被引量:2
《中国预防兽医学报》2008年第3期194-199,共6页景志忠 李玉萍 窦永喜 陈国华 房永祥 才学鹏 
甘肃省自然基金项目(3ZS061-A25-081);国家“863”计划(2006AA10A203)
植物血凝素(PHA)诱导培养牦牛外周血淋巴细胞,提取总RNA,采用RT-PCR技术扩增牦牛IFN-α-A和IFN-α-Ⅱ基因,分别经PCR、酶切鉴定及测序分析后,再分别构建原核表达重组质粒,用SDS-PAGE和Western blot分析IPTG诱导表达的重组蛋白。序列分...
关键词:牦牛IFN-α-A基因 牦牛IFN-α-Ⅱ基因 分子克隆 遗传演化关系 表达分析 
猪TOLL样受体2基因在CHO-K1细胞中的表达被引量:3
《甘肃农业大学学报》2008年第1期14-17,共4页房永祥 景志忠 陈国华 段凤云 蒙学莲 窦永喜 
国家高技术研究发展计划“863”计划--“新型高效农业生物药物载体和新制剂创制”(2006AA10A203).
将含猪TLR2(猪Toll样受体2,pTLR2)基因的真核表达载体PcDNA3.1/CT-GFP-pTLR2,采用脂质体法转染到CHO-K1细胞,用G418持续筛选获得了阳性细胞克隆.阳性细胞克隆系经PCR和RT-PCR检测表明:pTLR2基因得到稳定整合并能成功地转录.荧光显微镜观...
关键词:猪Toll样受体2 CHO-K1细胞 转染 
猪IL-18在毕赤酵母中分泌表达条件的优化被引量:1
《甘肃农业大学学报》2008年第1期38-42,共5页宋世斌 陈国华 王颖 王笑笑 宗瑞谦 景志忠 
兰州市科技攻关项目(05-1-47和06-2-23)资助.
采用PCR方法从pGEM-IL-18重组质粒中亚克隆出IL-18基因并完成了真核融合表达载体pPIC9K-IL-18的构建和IL-18在毕赤酵母中的表达,在此基础上从发酵时间、不同诱导型、pH值、诱导剂量和接种量等方面对重组基因工程菌的摇瓶发酵条件进行了...
关键词:猪IL-18 毕赤酵母 摇瓶发酵 表达条件 
新疆部分地区兔球虫种类调查研究被引量:23
《动物医学进展》2007年第8期44-47,共4页孟庆玲 田广孚 闫鸿斌 张冬峰 
对新疆部分地区家兔球虫的种类进行调查,发现兔的艾美耳球虫检出率为100%,并检出10种兔艾美耳球虫,即斯氏艾美耳球虫(Eimera stiedai)、大型艾美耳球虫(E.magna)、无残艾美耳球虫(E.irrestidua)、梨型艾美耳球虫(E.piriformis)、小型艾...
关键词:球虫 种类 调查 
鸡传染性支气管炎弱毒苗的毒力返强检测被引量:1
《甘肃农业大学学报》2007年第4期35-37,共3页王凡 殷宏 罗建勋 曾巧英 
甘肃省自然科学基金(3ZS051-A25-060).
将鸡传染性支气管炎疫苗毒接种10日龄鸡胚,并传至12代,观察鸡胚病变,于72 h收集尿囊液进行负染电镜观察和血凝试验.透射电镜观察到典型的冠状病毒颗粒,致鸡胚的典型病变作用和血凝活性随培养代次的增加显著增强.结果表明,该弱毒苗病毒...
关键词:鸡传染性支气管炎病毒 弱毒疫苗 毒力返强 
猪IL-18在毕赤酵母中的表达及活性分析被引量:2
《生物工程学报》2007年第5期818-823,共6页宋世斌 景志忠 陈国华 王笑笑 宗瑞谦 
国家高技术研究与发展项目(No.2006AA10A203);兰州市科技攻关项目(Nos.05-1-47和06-2-23)资助~~
采用PCR方法从pGEM-IL-18重组质粒中扩增出IL-18基因并构建真核融合表达载体pPIC9K-IL-18,电激法转化入毕赤酵母GS115,采用G418抗性梯度法筛选得到多拷贝重组菌株,甲醇诱导表达,应用SDS-PAGE分析重组蛋白的表达情况,并将表达蛋白用凝胶...
关键词:pIL-18 毕赤酵母 基因表达 纯化 生物活性 
CpG DNA重组质粒对猪囊尾蚴抗原的免疫佐剂效应研究被引量:3
《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》2006年第2期150-152,共3页景志忠 蒙学莲 王佩雅 窦永喜 李辉 骆学农 郑亚东 才学鹏 
国家高科技研究"863"项目(2003AA241111);甘肃省农业生物技术研究与应用开发项目(GNSW2003-2)
用CpG基序寡核苷酸的重组质粒(CpGDNA)与猪囊尾蚴抗原制备疫苗免疫小鼠,检测小鼠抗囊尾蚴总抗体和IgG2a抗体亚类以及体外诱导免疫脾细胞分泌白介素-4(IL-4)和干扰素-γ(IFN-γ)的含量,观察其免疫佐剂效应。发现CpGDNA重组质粒中无论插入...
关键词:CPG DNA 佐剂效应 TH1型 协同作用 
猪IL-2基因真核表达载体的构建及在酵母中的表达被引量:9
《中国兽医科学》2006年第4期315-319,共5页张巧颖 景志忠 栗震亚 陈国华 
农业结构调整重大技术研究专项(04-10-03B);兰州市科技攻关计划项目(05-1-47)
用真核表达引物从pGEM-IL-2重组质粒中扩增出猪IL-2基因,将目的基因和真核表达载体pPIC9K连接转入E.coli的JM109中,得到了猪pPIC9K-IL-2重组表达质粒。通过电激法将经SalⅠ酶切线性化的pPIC9K-IL-2质粒转化到巴斯德毕赤酵母GS115感受态...
关键词:白细胞介素-2 基因 毕赤酵母 表达 
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