同尾酶

作品数：15被引量：53H指数：4
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新型酵母蛋白表位标记和基因敲除质粒系统的构建及可行性验证被引量：2
《微生物学报》2019年第5期939-949,共11页唐仕伟 李辉 崔时媛 张正坦 谢志平 
上海市教育委员会科研创新计划(2017-01-07-00-02-E00035)~~
【目的】构建一套用于酿酒酵母基因功能研究的质粒。该套质粒结合pUG系列和pFA6a系列的优点,同时采用同尾酶实现蛋白表位标签的串联插入。【方法】利用PCR技术分别克隆pUG系列质粒的lox P位点、pFA6a质粒多酶切位点和ADH1终止子模块;通...
关键词：酵母细胞 基因敲除 蛋白标签 同尾酶 表达量 
打破思维定势,还需“刨根问底”
《理科考试研究（高中版）》2018年第7期63-65,共3页舒端阳 
生物教学中对于一些核心概念和抽象问题的处理是课堂活动的关键环节,笔者与同事在实践中发现,老师对一些问题先故作不知,然后再设下＂套＂,再通过层层盘问的手段顺藤摸瓜,可以强化学生对知识点的理解,从而使这些核心概念能够在他们的脑...
关键词：自由组合 限制酶 同尾酶 单倍体 问题驱动 
简易型同源重组载体pAmpR-NeoR的构建和效果检测
《华北农学报》2017年第6期25-30,共6页王英泽 王巧兰 曹晴晴 付育 刘畅 王晨晨 杜朝 
国家自然科学基金面上项目(81171455);国家自然科学基金青年项目(31100715;81402305);河北省自然科学基金青年项目(C2013208005);河北省高等学校科学技术研究项目(QN2014043);河北科技大学五大平台开放基金课题;中国科学院纳米生物效应与安全性重点实验室开放课题资助项目(NSKF201605)
为了构建能够灵活用于CRISPR/Cas9系统进行基因编辑的供体质粒,利用pcDNA3.1(+)-HA-His为模板,分别扩增了其AmpR-ori片段和NeoR片段,然后连接,构建了一个简易型同源重组载体pAmpR-NeoR。载体的正选择标记NeoR基因两侧分别引入了BamHⅠ和...
关键词：基因编辑 同源重组载体 同尾酶 
多靶点CRISPR表达载体系统的设计和构建被引量：3
《基因组学与应用生物学》2017年第4期1518-1525,共8页王令 郭苗苗 杜伟立 杨理凯 胡重洋 张涛 路宏朝 
国家自然基金项目(31402071);陕西理工大学人才启动项目(SLGQD14-02)共同资助
CRISPR/Cas9核酸酶系统能实现多基因的高效靶向编辑,但是多靶点CRISPR表达载体的构建比较复杂。本研究以细菌的DNA旋转酶和二氢叶酸还原酶为靶基因,选择多个打靶位点,合成携带靶序列和多克隆位点的寡聚核苷酸引物,直接退火延伸合成靶序...
关键词：CRISPR系统 多靶点 表达载体 同尾酶 
抗菌肽MagaininⅡ多拷贝串联体的设计与构建被引量：1
《生物技术》2014年第4期75-79,共5页成娟丽 李锋 王红 林金水 
国家青年科学基金项目("微生物来源的细菌烯脂酰ACP还原酶抑制剂的新型细胞筛选模型的建立与应用研究";No.31200040);校级博士科研启动项目("靶向细菌烯脂酰ACP还原酶的抗菌药物筛选模型的建立与应用";YQ-2011041)资助
目的:分析设计抗菌肽MagaininⅡ多拷贝串联体表达质粒并进行构建验证。方法:根据GeneBank中提供的抗菌肽MagaininⅡ氨基酸序列,结合表达菌株毕赤酵母密码子偏爱性,设计出MagaininⅡ的表达序列,并于其两端插入一对同尾酶SalⅠ和XhoⅠ的...
关键词：抗菌肽 MagaininⅡ 同尾酶 串联体 
疏水性ELP基因设计与基因库构建被引量：4
《微生物学通报》2013年第4期584-592,共9页林衡 李军明 张立超 葛高顺 许崇波 胡学军 
国家自然科学基金项目(No.31070822);辽宁省教育厅高校科研计划项目(No.L2010015)
【目的】设计合成疏水性类弹性蛋白(Elastin-like polypeptide,ELP)基因,建立ELP基因库。【方法】选择疏水性最强的异亮氨酸(Ile,I)(疏水参数:4.5)取代ELP五肽重复序列单元(缬氨酸-脯氨酸-甘氨酸-客座氨基酸-甘氨酸,VPGXG)中客座残基X...
关键词：类弹性蛋白 异亮氨酸 同尾酶 定向克隆 
基于同尾酶技术构建CCL3L1基因串联重组质粒的方法被引量：4
《现代生物医学进展》2012年第2期239-241,234,共4页乔录新 张世杰 石英 陈德喜 
国家自然科学基金面上项目(30870853);国家自然科学基金国际(地区)合作交流项目(30910103915);北京市自然科学基金面上项目(7092045)
目的:利用同尾酶技术将CCL3L1基因重复连续插入pcDNA6.2-GW/miR载体,构建含有CCL3L1基因串联体的重组质粒,实现小片段CCL3L1有效延长。方法:PCR扩增CCL3L1基因并在引物的两端设有同尾酶BamHI和BglII限制性内切酶位点,纯化PCR产物插入pMD...
关键词：同尾酶 CCL3L1 基因串联 
人胰高血糖素样肽-2类似物基因串联体构建及原核细胞表达被引量：2
《药物生物技术》2011年第2期100-105,共6页李泰明 刘涛 张美由 马艳红 周哲 谷春娇 庄舰峰 刘景晶 
利用同尾酶法构建人胰高血糖素样肽-2类似物{PP-h[Gly2]GLP-2(1-35)}基因串联体重组质粒,实现目的基因在大肠杆菌中高效表达。通过PCR扩增获得PP-h[Gly2]GLP-2(1-35)基因片段,利用同尾酶BamHⅠ和BclⅠ产生相同的粘性末端,经连接、转化...
关键词：人胰高血糖素样肽-2类似物 串联体 同尾酶 
多肽基因串联体构建技术被引量：2
《安徽农业科学》2010年第16期8345-8346,共2页刘宝全 王剑锋 范圣第 
国家自然科学基金项目(20872013);国家民委基金项目(09DL08);大连民族学院引进人才启动基金项目(20096102)
[目的]建立一种快速构建多肽基因串联体的方法。[方法]在多肽基因两侧加入同尾酶识别位点,利用同尾酶形成的粘性末端连接后不能被原酶识别与切割的特点,有效构建基因串联体。[结果]利用化学法合成的人表皮生长因子基因,有效构建并获得...
关键词：基因串联体 同尾酶 人表皮生长因子 
ChIFN-γ基因植物表达载体的构建与瞬时表达被引量：8
《云南大学学报（自然科学版）》2008年第6期630-635,共6页吴拥军 赵德刚 宋莉 许文钊 
国家科技支撑计划项目资助(2007BAD59B06);中国国际合作项目资助(2007DFA31260);贵州省优秀青年科技基金项目资助(20030312)
为了使鸡干扰素-γ(ChIFN-γ)基因在油菜中获得高效表达,优化了油菜偏爱的密码子,在ChIFN-γ的5′端添加Kozark序列,3′端增加内质网滞留信号肽SEKDEL.应用同尾酶将人工合成的ChIFN-γ,Napin特异性启动子及信号肽与NOS终止子克隆到质粒...
关键词：ChIFN-γ 同尾酶 构建 瞬时表达 
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