同源重组法

作品数：26被引量：93H指数：6
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同源重组法衣原体RNA聚合酶表达载体的构建和应用
《医学研究与战创伤救治》2025年第2期113-119,共7页石禹 包小峰 
国家自然科学基金(31370209);南通市卫生健康委员会面上指令课题(MS2022064)。
目的利用同源重组法构建衣原体RNA聚合酶(cRNAP)各亚基质粒,转化入大肠埃希菌中表达蛋白并探讨其在衣原体转录调控中的应用。方法根据Gen Bank中的基因序列设计特异性引物,聚合酶链式反应(PCR)扩增cRNAP各亚基的目的基因片段,对PCR产物...
关键词：同源重组法 衣原体 cRNAP 亚基 质粒载体 融合蛋白 
双交换同源重组法构建Thermus thermophilus基因无痕敲除突变体被引量：2
《湖南农业大学学报（自然科学版）》2019年第2期143-148,共6页李海娟 
国家自然科学基釐项目(31700059);陕西省自然科学基础研究计划项目(2018JQ3037);陕西省高校科协青年人才托举计划项目(20180210)
为在噬热栖热菌(Thermusthermophilus)中开収无需筛选标记的基于双交换同源重组的基因无痕敲除手段,以大质粒及染色体上的TTP0042与TTC0340_0341为靶基因,构建含有其两侧同源臂的基因敲除载体幵转化T.thermophilusHB27细胞,将转化混合...
关键词：噬热栖热菌 双交换性同源重组 基因无痕敲除 
优化噬热栖热菌的遗传转化体系
《生物技术》2019年第1期63-68,共6页李海娟 徐玲玲 
国家自然科学基金项目(31700059);陕西省自然科学基金项目(2018JQ3037);陕西省高校科协青年人才托举计划项目(20180210)
[目的]优化噬热栖热菌Thermus thermophilus的转化体系。[方法]将质粒DNA的形态、浓度及转化时间作为变量设计噬热栖热菌T.thermophilus的转化体系,以通过直接双交换同源重组法获取Δpyr E突变体的概率为依据判定转化效率。[结果]在转...
关键词：噬热栖热菌 遗传转化系统 双交换性同源重组法 基因无痕敲除突变体 
Red两步同源重组法在大肠杆菌基因敲除中的应用被引量：12
《中国畜牧兽医》2017年第7期1934-1940,共7页李鑫 李亚芯 戴建君 
中央高校基本科研业务费专项(KYZ201326);江苏省高校优势学科建设项目
基因敲除是研究基因功能最直接的方法。对于大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)而言,传统的基因敲除方法是利用其原有的RecA系统,此方法依赖于特定的限制性内切酶酶切位点,且所需同源臂长,操作复杂。Red同源重组法的出现使得基因组的改...
关键词：大肠杆菌 RED同源重组 基因敲除 两步法 
同源重组法构建副干酪乳杆菌组氨酸蛋白激酶基因缺失突变株被引量：3
《食品科学》2017年第12期15-20,共6页岳元春 王洋 由田 高冬妮 平文祥 葛菁萍 
国家自然科学基金面上项目(31470537;31570492);黑龙江省高等学校科技创新团队(农业微生物发酵技术)项目(2012td009)
构建副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)组氨酸蛋白激酶prcK基因缺失突变株,为prcK基因功能研究提供实验工具。采用同源重组技术构建质粒p KLKRT(含prcK::Tet^r基因),将其电转化进入L.paracaseiHD1.7中,使prcK::Tet^r基因同源重组到...
关键词：副干酪乳杆菌 细菌素 组氨酸蛋白激酶基因 同源重组 
同源重组法构建枯草芽孢杆菌dhbC基因缺失突变株和回复株被引量：1
《热带作物学报》2009年第10期1517-1521,共5页余贤美 林超 杨芩 李锐 贺春萍 郑服丛 
中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资助项目(No.2008hzs1J013;2008hzs1J014);国家科技支撑计划(No.2007BAD48B04);公益性行业(农业)科研专项(No.nyhyzx07-033-2-3)资助
为了验证dhbC基因的功能,以质粒pEGFP-N1为模板,通过PCR扩增获得新霉素抗性基因(neor)DNA片段,构建重组质粒pMD18-neo,电击转化法将pMD18-neo导入枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis CAS15感受态细胞中,使neor基因片段与dhbC基因片段发生置...
关键词：枯草芽孢杆菌 同源重组 缺失突变 基因回复 
同源重组法制备口蹄疫病毒多基因重组腺病毒
《畜牧市场》2009年第9期14-16,共3页卢曾军 曹轶梅 包惠芳 刘在新 赵启祖 陈应理 常惠芸 谢庆阁 
通过细菌内同源重组的方法成功构建了含有O型口蹄疫病毒P1-2A和3C蛋白酶基因和3D基因的重组腺病毒表达载体。首先将P12A、3C和3D基因亚克隆连接到穿梭质粒pShuttle-CMV上,再将重组穿梭质粒用Pmel线性化后电转化携带有腺病毒骨架载体pAde...
关键词：口蹄疫病毒 重组腺病毒 同源重组 
同源重组法构建枯草芽孢杆菌核黄素操纵子突变株被引量：1
《武汉大学学报（理学版）》2009年第3期354-358,共5页张西锋 郭蔼光 
国家重点新产品计划项目(2003ED760039)
为了解除核黄素合成的反馈调节和提高核黄素的产量,以受体菌的核黄素操纵子为同源重组的指导序列,构建了整合表达载体pB1和pB2,通过双交叉同源重组的方法将线性化的pB1和pB2分别整合到受体菌的染色体上.构建了核黄素操纵子的rfn框和启动...
关键词：同源重组 枯草芽孢杆菌 核黄素 操纵子 
用同源重组法将Δ5 Des整合在集胞藻6803中的表达被引量：1
《安徽农业科学》2009年第7期2891-2893,2949,共4页张柯 张浩玉 姚强 
从枯草芽孢杆菌染色体中扩增出受冷诱导的Δ5Des去饱和酶,构建出可以与集胞藻PCC6803染色体发生同源双交换的质粒,将Km抗性基因::PpsbA1::Δ5脂肪酸去饱和酶基因和对照基因分别整合入PCC6803的染色体上,获得转化子后,对不饱和脂肪酸进...
关键词：Δ5 DES 双交换 EPA 集胞藻PCC6803 
RED同源重组法敲除发光光状杆菌晶体蛋白基因cipA和cipB被引量：1
《基因组学与应用生物学》2009年第3期417-421,共5页唐志如 张友明 孙志洪 黄瑞林 印遇龙 
国家自然基金项目(30700581);国家863项目(2008AA10Z316);中国科学院亚热带农业生态研究所青年人才领域前沿项目(ISACX-LYQY-QN-0701);中国科学院优秀博士学位论文和院长奖获得者科研启动专项资金(0723022110)资助
RED同源重组法敲除发光光状杆菌晶体蛋白基因cipA和cipB,为发光光状杆菌基因敲除提供方法。采用TOPO克隆方法将基因cipA和cipB克隆到质粒pTA上,获得质粒pTA-cipA和pTA-cipB;采用Red/ET方法分别将Gentar基因和Aprar基因分别插入pTA-cipA...
关键词：发光光状杆菌 RED同源重组 敲除 晶体蛋白 
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