甲基对硫磷水解酶

作品数：20被引量：62H指数：5
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K^+对促进甲基对硫磷水解酶催化活性的影响
《食品与发酵工业》2020年第6期8-12,共5页石诚 刘松 堵国成 
国家自然基金面上项目(31771913)。
甲基对硫磷水解酶(methyl parathion hydrolase,MPH)能催化甲基对硫磷等有机磷化合物中P-O、P-F、P-CN及P-S键的水解。该研究考查了K^+对MPH催化活性的影响,并分析了K+调控酶蛋白活性的作用位点。酶活分析显示,Pseudomonas sp.WBC-3 MP...
关键词：甲基对硫磷水解酶 K^+ 分子动力学 离子分布概率 调控位点 
gfp融合的甲基对硫磷水解酶基因mph在E. coli中的表达被引量：1
《湖北大学学报（自然科学版）》2019年第1期22-25,共4页黄灿 程杨 马立新 严红 
国家自然科学基金(31300074)资助
依照大肠杆菌密码子的偏爱性将来源于Pseudomonas sp. M6的有机磷水解酶基因mph设计合成了新的有机磷水解酶基因,然后将其与GFP融合进行表达,构建一株具有全细胞催化活性的大肠杆菌工程菌.设计优化后所合成的mph-r基因全长927 bp,然后...
关键词：甲基对硫磷水解酶 GFP mph-r基因 融合蛋白 
甲基对硫磷水解酶的酿酒酵母表面展示及在甲基对硫磷降解中的应用
《生物技术通报》2015年第3期178-184,共7页王星星 池哲 
甘肃省科技计划资助项目(145RJZA042)
PCR扩增假单胞菌WBC-3的甲基对硫磷水解酶基因,插入表面展示质粒pYD1的多克隆位点,构建pYD1-MPH重组质粒。重组质粒转化酿酒酵母EBY100,2%半乳糖诱导甲基对硫磷水解酶表达,并利用免疫荧光检测甲基对硫磷水解酶在酿酒酵母细胞表面的表达...
关键词：甲基对硫磷水解酶 表面展示 酿酒酵母 甲基对硫磷降解 
热稳定性对甲基对硫磷水解酶在毕赤酵母中分泌的影响被引量：1
《中国农业科技导报》2015年第3期42-48,共7页龚攀 范家佑 田健 伍宁丰 初晓宇 
国家863计划项目(2013AA102804);国家自然科学基金项目(31100049)资助
甲基对硫磷水解酶可生物降解有机磷农药,由于其特殊的应用价值,越来越受到人们的关注。来源于苍白杆菌的甲基对硫磷水解酶MPH-Och在毕赤酵母系统中不能有效地分泌表达。将热稳定性提高的突变体MPH-S274Q在毕赤酵母中表达,发现其毕赤酵...
关键词：甲基对硫磷水解酶 分泌 热稳定性 毕赤酵母 
组合突变提高甲基对硫磷水解酶MPH热稳定性的研究
《中国农业科技导报》2015年第1期167-172,共6页罗晓亮 顾杏露 田健 初晓宇 伍宁丰 
国家自然科学基金项目(31100049)资助
来源于苍白杆菌Ochrobactrum sp.M231的甲基对硫磷水解酶MPH-Och具有优良的催化水解甲基对硫磷农药的能力,针对其热稳定性较差的缺点,通过组合3种提高蛋白热稳定性的突变策略,最终获得热稳定性改良的突变酶MPHM7,其T50达到65℃,在之前...
关键词：甲基对硫磷水解酶 热稳定性 组合突变 
甲基对硫磷水解酶的随机突变和分子对接模拟
《华中农业大学学报》2012年第3期325-331,共7页李亚楠 张彦博 胡美英 陈少华 胡振 易欣 林惠花 
国家自然科学基金项目(30871660);广东省博士启动基金项目(9451064201003679)
甲基对硫磷水解酶(MPH)能高效降解甲基对硫磷,并能够降解杀螟松、乙基对硫磷和毒死蜱,但降解效率依次降低。为提高MPH对毒死蜱的降解活性,采用易错PCR的方法对MPH进行随机突变,筛选到2株突变体A291V和K173R,并对其进行原核表达,结果表明...
关键词：甲基对硫磷水解酶 毒死蜱 随机突变 易错PCR 同源建模 分子对接 
甲基对硫磷水解酶纯化与保存
《广州化工》2012年第8期1-3,9,共4页张俊卓 谢卫红 
国家自然科学基金资助项目(20875024/B0509);湖北省教育厅重大研究项目(Z20081402)
对带有重组表达质粒E.coli菌种进行了扩大培养,在IPTG的诱导下大量表达,获得了C-末端含有6个寡聚组氨酸的甲基对硫磷水解酶。经Ni-NTA亲和层析获得了具有较高生物活性的甲基对硫磷水解酶。本文对该酶纯化的梯度洗脱条件和酶动力学进行...
关键词：甲基对硫磷水解酶 Ni-NTA亲和层析 蛋白质表达纯化 
甲基对硫磷水解酶分离条件的量热学优化
《广州化工》2012年第8期7-9,共3页高琴 张俊卓 谢斌 谢卫红 
国家自然科学基金资助项目(20875024/B0509);湖北省教育厅重大研究项目(Z20081402)
运用酶热分析方法,以甲基对硫磷水解酶(MPH)作为目标蛋白,牛血红蛋白(BHb)、肌红蛋白(Mb)和牛血清白蛋白(BSA)作为杂蛋白,通过溶液pH以及流动相中NaCl浓度的考察,确定了甲基对硫磷水解酶的最佳分离条件。实验结果表明,在pH为8.0,NaCl浓...
关键词：热分析 甲基对硫磷水解酶 条件优化 
带锚链的甲基对硫磷水解酶的基因构建及表达纯化被引量：2
《化学与生物工程》2011年第7期26-28,66,共4页刘立坚 冷艳 李雨亭 谢卫红 
国家自然科学基金资助项目(20875024/B0509);湖北省教育厅重大研究项目(Z20081402)
用PCR方法获得甲基对硫磷水解酶（MPH）编码基因,构建了重组表达质粒pET28a-mph-lc,将其转化至大肠杆菌BL21（DE3）中进行表达。当OD600达到0.5~0.6时,用终浓度0.4 mmol·L-1的IPTG在30℃下诱导表达5 h,破碎离心后,利用Ni-NTA亲和层析...
关键词：甲基对硫磷水解酶 基因修饰 蛋白表达纯化 
Pseudomonas sp.1-7中甲基对硫磷水解酶基因的克隆及酶学性质研究
《农药学学报》2011年第2期162-168,共7页许丽 初晓宇 田健 伍宁丰 
国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2007AA100605)资助
为了研究和分离有机磷降解酶及其编码基因,从农药厂污水处理池的活性污泥中分离出一株可以高效降解甲基对硫磷的细菌1-7,经16S rDNA鉴定为假单胞菌Pseudomonas sp.。通过构建基因组文库的方法克隆了1-7的甲基对硫磷水解酶基因ophc3,该...
关键词：甲基对硫磷水解酶 文库构建 基因克隆 酶学性质 
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