易错PCR

作品数：113被引量：249H指数：8
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一种利用整合酶位点特异性重组构建随机突变库的方法被引量：1
《基因组学与应用生物学》2017年第6期2440-2446,共7页汪先薇 
中国国家基础研究发展973计划(2012CB721102);自然科学基金(31300034)共同资助
易错PCR利用的低保真聚合酶不具有3'到5'的校对功能,能够引入较高几率的随机突变,经常被用来构建突变库。位点特异性串联重组(SSRTA)方法拥有丰富的整合位点配对组合,可以为大片段基因簇重组提供多种模块组合。该串联重组方法特异性高...
关键词：易错PCR 多片段串联重组 整合酶 
优化易错PCR条件以提高毕赤酵母GAP启动子文库突变效率被引量：2
《生物技术通报》2014年第6期211-217,共7页秦秀林 钱江潮 储炬 
广西自然科学基金项目(2013GXNSFBA019096)
高效的随机突变策略对于构建含有丰富突变体的启动子文库至关重要。为了建立一个突变率适中并能获得较多有益突变子的易错PCR(error-prone PCR,EP-PCR)条件,实现毕赤酵母GAP启动子的高效突变,对EP-PCR反应条件进行了优化。考察了模板浓...
关键词：易错PCR 突变效率 随机突变 毕赤酵母 GAP启动子 
随机突变提高单胺氧化酶活性被引量：1
《生物工程学报》2014年第1期109-118,共10页陈雪君 马元慧 邵建华 赖敦岳 王志国 陈振明 
国家自然科学基金(No.31100584)资助~~
前期获得了一个对底物美西律具有一定活性的单胺氧化酶突变体A-1(F210V/L213C)。为进一步提高其酶活性,利用MegaWHOP PCR构建了库容约为104的随机突变库。筛选后获得了一个最优突变酶ep-1,比活力为A-1的189%。选择性测定结果表明,酶的...
关键词：单胺氧化酶 易错PCR 酶活力 分子动力学模拟 
甲基对硫磷水解酶的随机突变和分子对接模拟
《华中农业大学学报》2012年第3期325-331,共7页李亚楠 张彦博 胡美英 陈少华 胡振 易欣 林惠花 
国家自然科学基金项目(30871660);广东省博士启动基金项目(9451064201003679)
甲基对硫磷水解酶(MPH)能高效降解甲基对硫磷,并能够降解杀螟松、乙基对硫磷和毒死蜱,但降解效率依次降低。为提高MPH对毒死蜱的降解活性,采用易错PCR的方法对MPH进行随机突变,筛选到2株突变体A291V和K173R,并对其进行原核表达,结果表明...
关键词：甲基对硫磷水解酶 毒死蜱 随机突变 易错PCR 同源建模 分子对接 
大豆过氧化物酶基因随机突变文库的构建被引量：2
《大豆科学》2011年第5期731-737,共7页曾家豫 郑群 廖世奇 王黎 袁红霞 杨海棠 张丽琼 张宁 
甘肃省教育厅资助项目(0601-28,0501B-16);甘肃省自然科学基金资助项目(096RJZA035);甘肃省高分子材料重点实验室开放课题资助项目(KF-06-01)
为提高大豆过氧化物酶(soybean peroxidase,SBP)的活性及研究该酶一级结构与酶活性间的关系,采用连续易错PCR方法对大豆过氧化物酶基因(sbp)进行了2轮随机突变,将第二轮易错PCR产物与质粒载体pPICZα-A分别进行双酶切,经T4DNA连接酶催...
关键词：大豆过氧化物酶 易错PCR 基因文库 随机突变 酶定向进化 
毛霉△^6-脂肪酸脱氢酶随机突变文库的构建与分析被引量：1
《微生物学通报》2011年第5期694-701,共8页宋芬芬 江贤章 陈清霞 黄建忠 
国家自然科学基金项目(No.30970047;30370028);福建省自然科学基金重大项目(No.2003F005);福建省自然科学基金项目(No.2008F3036);福建省教育厅资助项目(No.JB09035)
毛霉Mucor sp.EIM-10△6-脂肪酸脱氢酶是γ-亚麻酸合成途径的关键酶。为提高脂肪酸脱氢酶的活性以及研究该酶一级结构对酶活性的影响,利用易错PCR对毛霉△6-脂肪酸脱氢酶基因(mcd6)进行随机突变,将PCR产物与大肠杆菌-酿酒酵母穿梭表达载...
关键词：△6-脱氢酶 易错PCR 随机突变 毛霉 Γ-亚麻酸 
短小芽孢杆菌碱性蛋白酶基因的随机突变被引量：2
《应用与环境生物学报》2010年第1期96-99,共4页杨锦 冯红 万民远 焦惠科 张晓露 张义正 
国家高技术研究发展计划(No.2006AA02Z221)资助~~
碱性蛋白酶(DHAP)属于丝氨酸蛋白酶家族(S8A),是由275个氨基酸残基组成的单链多肽,没有二硫键,以Asp32、His64、Ser221作为活性中心.采用易错PCR方法,对短小芽孢杆菌碱性蛋白酶基因(GenBank登录号:AY458140)进行随机突变.在大肠杆菌中...
关键词：碱性蛋白酶 短小芽孢杆菌 定向进化 易错PCR 序列分析 基因表达 
利用易错PCR随机突变技术突变EPSPs基因研究草甘膦抗性机理被引量：1
《高技术通讯》2004年第12期37-42,共6页梁爱敏 刘柱 张怀江 刘秀敏 陈明 陆伟 李国勋 林敏 
运用易错PCR介导的随机突变技术使高抗草甘膦的菌株的5-烯醇式丙酮酸-3-磷酸莽草酸合酶(5-Enolpyruvylshikimate-3-phosphate，EPSPs)基因发生随机突变，转入EPSPs基因缺陷型的大肠杆菌ER2799中，通过互补试验获得对草甘膦抗性明显降低...
关键词：随机突变 鸟嘌呤 PCR 缺陷型 甘氨酸 ER 突变位点 草甘膦 抗性机理 发生 
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