易错PCR

作品数：113被引量：249H指数：8
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基因突变提高毕赤酵母表达内切β-1,3-葡聚糖酶活性
《食品与生物技术学报》2021年第2期57-64,共8页金树霞 王力 朱莉 李菲菲 刘丽萍 詹晓北 郑志永 高敏杰 
国家自然科学基金项目(31301408);江南大学自主科研计划重点项目(JUSRP51632A);江苏省重点研发计划(现代农业)项目(BE2018367)。
为构建一株高效表达内切β-1,3-葡聚糖酶的毕赤酵母菌株,并用于水解热凝胶生产β-1,3-葡寡糖。作者首先对哈茨木霉来源内切β-1,3-葡聚糖酶基因进行随机突变,并构建BGN13.1a突变库;然后采用高通量技术及刚果红平板筛选高表达菌株;最后采...
关键词：内切β-1 3-葡聚糖酶 毕赤酵母 易错PCR 酶学性质 
利用易错PCR构建酱油酿造用T酵母spt15突变库被引量：2
《食品科学》2018年第14期106-111,共6页赵秀丽 张毓秀 孙月芹 侯丽华 
国家自然科学基金面上项目(31371819);天津市科技支撑重点项目(17YFZCNC00460);天津科技大学新农村发展研究院开放基金资助项目(xnc201604);天津市高等学校创新团队培养计划资助项目(TD13-5013)
为得到酱油酿造优良性状的微生物,对酱油酿造用T酵母进行研究。首先利用易错聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术构建spt15(可编码TATA结合蛋白)的突变基因库,然后重组于表达载体YEplac195中,并导入尿嘧啶营养缺陷型菌株...
关键词：易错PCR spt15 基因突变库 筛菌 酱油发酵 
一个新的L-半胱亚磺酸脱羧酶基因的分析和突变
《微生物学报》2017年第8期1283-1292,共10页邓洁 吴巧芬 高华 徐悦 欧倩 武波 蒋承建 
国家自然科学基金(21262003);2017年度广西高等教育创优计划教学相关项目-优势特色专业项目(优质本科专业)~~
【目的】完成一个来源于碱性污染土壤宏基因组文库的新的L-半胱亚磺酸脱羧酶基因undec1A的鉴定,研究其酶学性质并利用非理性设计技术对其进行分子改造。【方法】以p ETBlue-2为表达载体构建包含undec1A基因的重组表达质粒,转化至宿主细...
关键词：牛磺酸 L-半胱亚磺酸脱羧酶 宏基因组文库 连续易错PCR技术 突变酶 
一种降低dATP用量的简单易错PCR方法
《微生物学报》2014年第1期97-103,共7页高义平 赵和 吕孟雨 孙果忠 杨学举 王海波 
国家自然科学基金项目(30270855)~~
易错PCR是基因体外诱变的主要方法之一,是通过在PCR体系中添加Mn2+、提高Mg2+浓度和dCTP/dTTP浓度等措施达到基因诱变的目的。【目的和方法】本研究在不添加Mn2+、不调整其它任何PCR成分的情况下,通过降低dATP浓度的底物不平衡作用,对...
关键词：易错PCR 体外诱变 碱基突变 序列变异 洋葱抗菌蛋白基因 BT基因 
保守的第52位色氨酸突变引起的胰高血糖素样肽1受体N端片段活性丧失被引量：1
《生物工程学报》2013年第1期87-94,共8页高蔚丰 王娟 
宁夏高等学校科学研究项目(2010年度)资助~~
通过易错PCR方法建立了一个鼠肺不同长度的nGLP-1R(从第21个氨基酸开始到第145个氨基酸)的噬菌体随机突变展示肽库,通过噬菌体表面展示技术检测胰高血糖素样肽1受体N端片段(nGLP-1R)在缺失一段或两段基因后是否还具有结合Exendin-4的活...
关键词：胰高血糖素样肽1受体 EXENDIN-4 易错PCR 
深海古菌超嗜热α-淀粉酶易错PCR致突变的条件研究被引量：2
《淮海工学院学报（自然科学版）》2009年第2期86-89,共4页房耀维 王淑军 刘姝 吕明生 李玉静 高爱伟 倪云霞 滕晓栋 
江苏省科技创新与成果转化(重大科技支撑与自主创新)专项引导资金项目(BE2008340);江苏省高校自然科学基础研究项目(08KJB550001);连云港市科技攻关项目(CG0714);淮海工学院博士启动基金资助项目(KQ07103)
采用易错PCR技术在深海古菌菌株Thermococcus siculiHJ21超嗜热α-淀粉酶基因中引入突变,研究了Mg2+浓度、Mn2+浓度、dCTP和dTTP浓度等条件对突变率的影响。结果表明,在Mg2+浓度为5.0 mmol/L,Mn2+浓度为0.4 mmol/L,dTTP和dCTP浓度为1.5 ...
关键词：易错PCR 条件 突变率 
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