伍志坚

作品数:16被引量:149H指数:6
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供职机构:中国预防医学科学院更多>>
发文主题:基因治疗血友病B重组腺伴随病毒绿色荧光蛋白Β-半乳糖苷酶更多>>
发文领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
发文期刊:《病毒学报》《科学通报》《Acta Biochimica et Biophysica Sinica》《生物化学与生物物理进展》更多>>
所获基金:国家高技术研究发展计划国家攀登计划国家自然科学基金霍英东基金更多>>
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HSV/AAV嵌合病毒法制备rAAV/hFⅨ及其安全性检测被引量:3
《科学通报》2003年第10期1054-1058,共5页陈立 邹蓓艳 陈浩明 伍志坚 吴小兵 卢大儒 薛京伦 
构建了由CMV启动子调控的人凝血因子Ⅸ小基因的重组腺相关病毒载体, 并通过HSV/AAV杂合辅助病毒的方法大量制备成重组腺相关病毒颗粒(rAAV/hFⅨ). 经Southern dot blot及QC-PCR法测定, 滴度达到3.6 × 1012 vg(病毒基因组)/mL. 将rAAV/h...
关键词:重组腺相关病毒载体 凝血因子 IX小基因 杂合病毒 HSV/AAV嵌合病毒法 血友病B QC-PCR 
携带反义凝血酶受体和p21双基因共表达腺病毒伴随病毒载体的构建与包装
《生物化学与生物物理进展》2002年第4期597-603,共7页孟宪敏 吴小兵 米立国 伍志坚 赵秀文 刘冬青 丁金凤 
国家"九五"攻关项目 (96 90 6 0 2 0 7) ;国家自然科学基金资助项目 (3 9970 2 97) ;国家"863"基因治疗重大课题 (863 BH0 3 0 5 0 2 )
为探讨双基因共表达对再狭窄的防治作用 ,分别构建了含反义凝血酶受体 (ATR)或 /和 p2 1单、双基因及报告基因绿色荧光蛋白 (GFP)的腺病毒伴随病毒 (AAV)载体 .上述载体经脂质体介导转染BHK 2 1细胞 ,G4 18筛选获得整合有外源基因的细胞...
关键词:反义凝血酶受体 p21双基因 共表达 腺病毒伴随病毒载体 构建 包装 再狭窄 
重组腺伴随病毒载体表达人白细胞介素12的研究被引量:1
《病毒学报》2002年第1期52-56,共5页郝晓萌 吴小兵 伍志坚 舒斯云 侯云德 
白细胞介素 12 (IL - 12 )具有广谱抗肿瘤、抗感染的作用 ,是由两个亚单位 40kD(p40 )和 35kD(p35 )通过二硫键构成的杂合体 ,有可能通过分别表达亚单位的方式来表达有功能活性的IL - 12。该实验尝试利用重组腺伴随病毒 (rAAV)载体进行...
关键词:人白细胞介素12 重组腺伴随病毒 载体 基因治疗 表达 
重组腺伴随病毒载体介导的hEPO转移及表达被引量:6
《生物化学与生物物理学报》2002年第2期176-180,共5页伍志坚 吴小兵 王宏 卢斌 董小岩 侯云德 
国家"8 6 3"高科技发展计划基因治疗重大关键技术资助项目(No .86 3 Z2 0 0 5 0 2 )~~
为实现人促红细胞生成素 (humanerythropoietin ,hEPO)基因在体内的持续表达 ,构建了携带hEPO的重组腺伴随病毒 (recombinantadeno associatedvirus,rAAV)载体质粒 ,建立了稳定携带hEPO表达盒的rAAV载体细胞株 ,采用“一种辅助病毒感染...
关键词:重组腺伴随病毒载体 表达 hEPO 基因转移 基因治疗 
一组可提供AAV载体复制和包装功能的重组HSV-1被引量:5
《中华实验和临床病毒学杂志》2002年第1期74-76,共3页伍志坚 吴小兵 侯云德 
国家"八六三"高科技发展计划基因治疗重大关键技术资助项目 ( 86 3 BH0 3 0 5 0 2 );国家攀登计划资助项目
目的 构建一组具有AAV载体复制和包装功能的重组HSV 1,从中选出功能较强者用于重组AAV的生产。方法 采用一套含有HSV 1基因组的粘粒系统构建重组HSV 1。首先将 2型腺病毒伴随病毒 (AAV 2 )rep基因的起始密码子ATG人工定点突变成ACG ;...
关键词:遗传重组 腺病毒科 人疱疹病毒 AAV载体复制 包装功能 
重组腺相关病毒(rAAV)介导的人凝血因子Ⅸ高活性突变衍生物在血友病B基因治疗研究中的应用被引量:4
《中国科学(C辑)》2001年第6期523-528,共6页陆华中 陈立 王红卫 卢大儒 邱信芳 薛京伦 伍志坚 吴小兵 王学峰 王鸿利 
国家自然科学基金(批准号:39880019);国家863高技术发展计划(批准号:Z20-02-01);上海市博士后基金;教育部博士点基金(批准号:98024620);教育部优秀博士论文基金(批准号:199925);霍英东基金(批准号:71019);高等学校优秀青年教师奖励计划(批准号:
采用定点诱变技术,将R338A点突变引入人凝血因子Ⅸ基因,并构建于AAV载体上,以rHSV/AAV杂合辅助病毒系统介导制备rAAV-hFIX重组病毒,然后,经肌肉注射对血友病B小鼠进行治疗实验,观察该突变基因在小鼠体内的表达、活性以及机体对该突变衍...
关键词:血友病B 凝血因子IX 突变衍生物 重组腺相关病毒 基因治疗 定点诱变技术 凝血功能 
一种高效的重组腺伴随病毒载体生产系统被引量:36
《中国科学(C辑)》2001年第5期423-430,共8页伍志坚 吴小兵 曹晖 董小岩 王宏 侯云德 
国家"八六三"高科技发展计划基因治疗重大关键技术资助项目(批准号: 863-BH03-05-02)
重组腺伴随病毒(recombinant adeno-associated virus, rAAV)载体是目前较理想的基因治疗载体之一, 但难以大规模制备一直是影响其广泛应用的主要因素. 曾组建了一种表达2型腺伴随病毒 (adeno-associated virus type 2, AAV-2) Rep和Ca...
关键词:重组腺伴随病毒 重组1型单纯疱疹病毒 载体 基因治疗 生产系统 绿色荧光蛋白 转染方式 
含HIV-1 gag、gag V3基因的重组腺病毒伴随病毒的构建及其免疫原性的研究被引量:2
《病毒学报》2001年第4期328-331,共4页刘雁征 吴小兵 周玲 伍志坚 侯云德 曾毅 
将HIV - 1中国株 42 (B亚型 )的 gag 基因及 gag与 gp12 0V3区的嵌合基因 gagV3插入腺病毒伴随病毒(AAV)表达载体pSNAV质粒中 ,构建重组质粒 pSNAV gag及pSNAV gagV3;采用脂质体转染的方法分别将重组质粒转入BHK细胞 ,G418筛选得到转入...
关键词:人免疫缺陷病毒1型 HIV-1 重组腺病毒伴随病毒 细胞毒性T淋巴细胞 CTL活性 
肌注腺伴随病毒基因治疗血友病B的安全性研究被引量:2
《病毒学报》2001年第4期301-306,共6页邹蓓艳 陈立 伍志坚 吴小兵 卢大儒 邱信芳 薛京伦 
国家 8 6 3高技术发展计划资助项目 (批准号 :Z2 0 -0 2-0 1) ;国家自然科学基金 ( 39880 0 19) ;教育部博士点 ( 980 2 46 2 0 ) ;教育部优秀博士论文基金 ( 19992 5 ) ;霍英东基金 ( 710 19) ;高等学校优秀青年教师奖励计划基金(JRAPOYT)
研究了肌注腺伴随病毒 (adeno -associatedvirus,AAV)介导凝血Ⅸ因子基因治疗血友病B的安全性。首先采用PCR、反转录PCR(RT -PCR)分别检测rHSV/AAV包装系统产生的重组腺伴随病毒AAV -mFⅨ ,和病毒感染细胞后所得上清再次感染的BHK细胞中...
关键词:rHSV/AAV包装系统 单纯疱疹病毒 HSV 野生型腺伴随病毒 基因治疗 安全性 肌注 血友病 
表达绿色荧光蛋白的重组腺病毒伴随病毒的产生被引量:9
《中华实验和临床病毒学杂志》2001年第3期300-300,F003,共2页伍志坚 吴小兵 曹晖 牛东滨 王宏 侯云德 
"八六三"高科技发展计划基因治疗重大关键技术资助项目 (86 3 -BH0 3 -0 5 -0 2 )
关键词:绿色荧光蛋白 重组腺病毒伴随病毒 表达 基因治疗 
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