龙剑明

作品数：12被引量：53H指数：5
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供职机构：广西大学动物科学技术学院更多>>
发文主题：水牛猪链球菌2型原核表达Γ-干扰素单克隆抗体更多>>
发文领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
发文期刊：《上海畜牧兽医通讯》《动物医学进展》《中国兽医科学》《农业生物技术学报》更多>>
所获基金：广西壮族自治区科技攻关计划广西科技创新能力与条件建设项目公益性行业(农业)科研专项更多>>
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双抗体夹心ELISA检测水牛γ-干扰素方法的建立及初步应用被引量：1
《畜牧与兽医》2012年第6期10-16,共7页徐贤坤 熊毅 刘棋 曾宪垠 龙剑明 
广西科技厅科技攻关项目(桂科攻0719004-3F)
纯化2株针对水牛γ-干扰素的单克隆抗体,其中1株进行HRP标记作为检测抗体,另1株单抗作为捕获抗体,建立检测水牛γ-干扰素的双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA)。通过对封闭液、抗体稀释液等条件进行优化,经过方阵滴定试验确定捕获抗体的最佳浓...
关键词：结核病 IFNγ- ELISA ESAT-6/CFP-10 单克隆抗体 
水牛γ-干扰素单克隆抗体的制备及其特性分析被引量：2
《农业生物技术学报》2010年第3期610-615,共6页徐贤坤 熊毅 刘棋 曾宪垠 龙剑明 
广西科技厅科技攻关项目(桂科攻0719004-3F)资助
将原核表达的重组水牛(Bubalus bubalis)γ-干扰素成熟蛋白(rGST-WBIFN-γ)以100μg/只剂量免疫8周龄Balb/c小鼠(Mus musculus),经5次免疫后,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,以rHIS-WB-IFN-γ和rGST-WBIFN-γ蛋白共同作为检测抗原...
关键词：Γ-干扰素 水牛 单克隆抗体 
牛结核分枝杆菌CFP10-ESAT6融合蛋白的原核表达及其在牛结核病检测中的应用被引量：8
《中国兽医科学》2009年第9期796-802,共7页徐贤坤 熊毅 龙剑明 刘棋 曾宪垠 
广西科技厅科技攻关项目(桂科攻0719004-3F);国家农业公益性行业科研专项(200803026);广西科技创新能力建设项目(08D5-01D)
采用重组PCR技术从牛结核分枝杆菌AN5基因组DNA中扩增CFP10-ESAT6融合基因,并将其定向克隆至原核表达载体pET-32a,构建了原核表达质粒pET-CFP10/ESAT6。重组子经酶切及测序鉴定后转化至大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导后经SDS-PAGE电泳鉴定...
关键词：牛结核病 融合蛋白 CFP-10 ESAT-6 
鹅副粘病毒病免疫程序探讨被引量：3
《现代农业科技》2009年第4期219-219,221,共2页许瑞胜 潘杰 龙剑明 徐贤坤 胡晓静 冯淑萍 何丹 熊毅 
广西科技攻关项目(桂科攻0719004-3G)
研究先使用商品新城疫Ⅳ系弱毒苗对ND抗体检测为阴性的实验鹅进行首免和二免,再用鹅副粘病毒油乳剂灭活苗进行加强免疫。定期抽取血清用HI试验检测抗体滴度,并抽取部分有抗体滴度的鹅进行攻毒试验。结果表明:在一免后抗体滴度没有变化,...
关键词：鹅副粘病毒病 免疫效果 免疫程序 
猪繁殖与呼吸综合征病毒美洲株与NSP2变异株二重PCR诊断方法的建立及应用被引量：5
《广西农业科学》2009年第1期84-87,共4页何丹 龙剑明 傅薇 冯淑萍 胡晓静 付建 刘棋 
广西科技攻关项目(桂科攻0815009-3-7)
根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲型标准株VR2332保守序列与近年PRRSV自然变异株序列分析研究,设计合成了2对特异引物,分别扩增出225、427bp两条特异型基因片段,通过优化RT-PCR条件,建立了可同时检测PRRSV标准株和NSP2变异株的二...
关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 变异株 二重PCR 
广西猪伪狂犬病毒感染状况调查报告被引量：8
《广东畜牧兽医科技》2008年第6期12-13,37,共3页付薇 胡晓静 朱伟 潘杰 龙剑明 王常伟 刘棋 
广西科技攻关项目(桂科攻0815009-3-7)
为了解广西猪伪狂犬病毒的感染状况,应用PCR技术对来自广西46个种猪场的1940份公猪精液进行了猪伪狂犬病毒(PRV)的检测,阳性率为0;同时对广西25个已使用猪伪狂犬病病毒gE基因缺失疫苗猪场的1455份送检血清,采用了猪伪狂犬病基因缺失鉴别...
关键词：猪伪狂犬病毒(PRV) PCR 基因缺失鉴别ELISA gE抗体 
小鹅瘟病毒荧光定量PCR检测方法的建立被引量：4
《上海畜牧兽医通讯》2008年第6期30-31,共2页付薇 潘杰 龙剑明 朱伟 胡晓静 冯淑萍 何丹 熊毅 
广西科技攻关0719004-3G
关键词：小鹅瘟病毒 PCR检测方法 荧光定量 败血性传染病 鹅细小病毒 亚急性 雏番鸭 渗出性 
水牛IFN-γ成熟蛋白基因的原核表达及其产物多克隆抗体的制备被引量：2
《中国兽医科学》2008年第11期1003-1008,共6页徐贤坤 熊毅 龙剑明 刘棋 曾宪垠 
广西科技厅科技攻关项目(桂科攻0719004-3F)
将水牛γ-干扰素成熟蛋白(IFN-γ)基因亚克隆至pGEX-6P-1中,成功构建了pGEX-BoIFN-γ表达载体,转化至大肠杆菌BL21(DE3)重组菌进行IPTG诱导表达。应用SDS-PAGE方法对表达产物rGST-BoIFN-γ进行分析,用GST琼脂糖凝胶柱对可溶性蛋白进行...
关键词：γ-干扰素成熟蛋白基因 大肠杆菌表达系统 水牛 多克隆抗体 BALB/C小鼠 
猪链球菌2型多重PCR检测方法的建立及应用被引量：8
《畜牧与兽医》2007年第9期4-6,共3页覃芳芸 熊毅 盛宇明 白昀 覃伦 朱伟 李华明 潘杰 龙剑明 陈磊 刘棋 
广西科技厅科技攻关与新产品试制项目(0632002-1)
设计3对引物,分别扩增链球菌属特异性gdh、猪链球菌种特异性16S rRNA和猪链球菌2型特异性cps2J等基因,目的片段大小分别为725bp、523bp和387bp。利用合成的3对引物并通过对反应条件与反应体系的优化建立了多重PCR。应用该多重PCR检测了...
关键词：猪链球菌2型 三重PCR 检测 
广西水牛γ干扰素基因的克隆与序列分析被引量：2
《动物医学进展》2007年第9期19-23,共5页熊毅 朱伟 徐贤坤 龙剑明 刘棋 
广西科技厅科技攻关项目(0719004-3F)
提取经刀豆素(ConA)诱导培养的水牛外周血淋巴细胞的总RNA,采用RT-PCR技术扩增水牛IFN-γ基因,将其克隆到pMD18-T载体上,并进行测序。序列分析结果表明,获得的IFN-γ基因全长为544个碱基,其开放阅读框(ORF)为501个碱基,编码166个氨基酸...
关键词：Γ干扰素 克隆 序列分析 水牛 
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