何彰华

作品数：7被引量：27H指数：3
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供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
发文主题：大肠杆菌红霉素共表达串联组合分子伴侣更多>>
发文领域：生物学医药卫生更多>>
发文期刊：《生物技术通讯》《中国生物工程杂志》《生物工程学报》《军事医学》更多>>
所获基金：国家科技重大专项国家重点实验室开放基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
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基于荧光强度快速判断蛋白可溶性方法的建立
《生物技术通讯》2012年第3期415-418,共4页肖丽霞 叶丙雨 王洋 师明磊 何彰华 张乐之 赵玉军 赵志虎 
目的:建立一种通过观察荧光强度,快速、直观地判断蛋白可溶性的方法。方法:选择抗辐射蛋白CBL502-AA及其突变体CBL502-ΔAA′作为目的蛋白,增强型绿色荧光蛋白作为报告分子,分别构建融合蛋白表达载体;通过SDS-PAGE和荧光观察两种手段检...
关键词：荧光 蛋白可溶性 绿色荧光蛋白 
红霉素大环内酯合成通路在大肠杆菌中的重建被引量：1
《生物工程学报》2012年第2期222-232,共11页何彰华 王洋 叶丙雨 师明磊 王东 范秋声 黄芬 赵志虎 
国家重大新药创制关键技术平台(No.2008ZXJ09007-01)资助~~
研究在大肠杆菌中重建了红霉素大环内酯(6-脱氧-红霉内酯B,6dEB)合成通路。先将参与6dEB合成所必需的基因分别克隆于多基因串联共表达载体中,获得单基因重组质粒;再利用载体中XbaⅠ/SpeⅠ互为同尾酶的特性实现相关基因的串联组合,获得...
关键词：6dEB 共表达 SDS-PAGE 质谱 
热激蛋白70的研究进展被引量：11
《生物技术通讯》2011年第6期883-886,共4页黄芬 何彰华 李存 米自强 李力 童贻刚 
国家自然科学基金(30872223);国家高技术研究发展计划(2009AA02Z111);病原微生物生物安全国家重点实验室开放课题(PBS2009A-04)
热激蛋白(HSP70)作为分子伴侣参与细胞内许多重要反应,从而对生物体起着重要的作用。随着研究的深入,其生物学功能不断被发现和利用的同时,HSP70的应用前景也变得越来越广泛。已有研究者对HSP70的生物学功能做了详细介绍,我们主要对近年...
关键词：热激蛋白70 分子伴侣 应用 
应用Red重组技术构建四环素抗性多基因串联表达载体被引量：1
《军事医学》2011年第10期754-757,799,共5页何彰华 师明磊 王洋 叶丙雨 黄芬 张彦 范秋声 王东 肖丽霞 张乐之 李德彬 闫兴 赵志虎 
国家重大新药创制关键技术平台(2008ZXJ09007-01)
目的构建一种四环素抗性的多基因串联表达载体。方法设计同源臂引物,通过重叠延伸PCR获取含四环素抗性基因的打靶序列,应用pKD46介导的Red重组系统,在DH5α内替换多基因串联表达载体pET-m28a(+)中的抗性基因序列;再利用同尾酶(isocaudar...
关键词：四环素抗药性 多基因串联表达载体 RED重组 质粒 红霉素 
过表达热休克蛋白70提高CHO细胞表达抗体的能力被引量：3
《中国生物工程杂志》2011年第9期8-13,共6页黄芬 安小平 李存 何彰华 张宝中 米志强 王娟 童贻刚 
国家自然科学基金(30872223);国家"863"计划(2009AA02Z111);病原微生物生物安全国家重点实验室开放课题(PBS2009A-04)资助项目
通过在中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中过表达热休克蛋白70以提高其表达抗体的能力。首先从中国仓鼠基因组DNA中扩取HSP70基因,构建真核表达质粒pcDNA3.1-HSP70,再将重组质粒稳定转染到CHO/dhfr-细胞中,筛选获得稳定的细胞系,运用RT-qPCR检测和...
关键词：CHO细胞 HSP70 抗体 
一种多基因串联共表达载体的构建被引量：11
《中国生物工程杂志》2011年第1期40-45,共6页何彰华 王洋 赵珺 刘晓杰 张丽华 王东 师明磊 黄芬 尤平 赵志虎 
国家重大新药创制关键技术平台资助项目(2008ZXJ09007-01)
为了构建一种可用于串联共表达多个基因的原核表达载体,通过PCR引入点突变,对商业载体pET-22b的酶切位点进行定向改造,设计独特的XbaⅠ/SpeⅠ模块。获得改造成功的载体pET-m22b,测序结果显示启动子、核糖体结合位点、多克隆位点及终止...
关键词：表达载体 共表达 串联组合 代谢通路组装 
红霉素链霉菌聚酮合成酶基因eryAIII的克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量：1
《生物技术通讯》2010年第6期794-797,共4页张丽华 王洋 何彰华 刘晓洁 师明磊 何建勇 赵志虎 
国家重大新药创制项目(2008ZXJ09007-001)
目的:在大肠杆菌中异源表达红霉素链霉菌聚酮合成酶eryAIII基因。方法:构建表达载体pET-m28a,PCR扩增高GC含量长片段基因eryAIII及分子伴侣GroELS的基因,并插入该载体,每个基因都能够独立启动和终止表达;将重组质粒转化至大肠杆菌BL21(D...
关键词：eryAIII基因 聚酮合成酶 红霉素链霉菌 分子伴侣GroELS 异源表达 长片段PCR 
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