国家自然科学基金(39970362)

作品数：21被引量：50H指数：4
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相关机构：河南师范大学新乡医学院河南省肿瘤病理重点实验室郑州大学更多>>
相关期刊：《胃肠病学和肝病学杂志》《河南师范大学学报（自然科学版）》《解剖学报》《遗传》更多>>
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常氏肝癌细胞cDNA文库的构建及ADAMs相关基因的免疫筛选与序列分析被引量：3
《遗传》2004年第6期793-796,共4页林俊堂 李玉昌 张会勇 徐存拴 
国家自然科学基金 (No .3 9970 3 62 );河南省重大科技攻关项目 (No .0 12 2 0 3 190 0 )资助~~
抽提常氏肝癌细胞的总RNA ,以oligo(dT)为引物 ,通过两次转换模板 ,采用LD PCR合成全长cDNA ,在cDNA两端引入SfiⅠ的酶切位点。以λTriplEX2为载体经过包装后构建了常氏肝癌细胞cDNA表达文库。以ADAMs通用抗体 ,用免疫筛选技术从常氏肝...
关键词：常氏肝癌细胞 CDNA文库 ADAMs抗体 免疫筛选 基因克隆 同源检索 
麻醉对小鼠热休克反应的影响
《解剖学报》2003年第2期159-161,共3页徐存拴 周爽 李三强 
国家自然科学基金资助项目 ( 3 9970 3 62 ) ;河南省生物工程重点实验室资助项目 (PKL0 10 0 3 )
目的　通过分析麻醉状态和清醒状态小鼠在相同热休克条件下的热休克反应异同 ,了解整体调控在生物热休克反应中的意义和作用。　方法　经 4 0、4 2、4 4和 4 6℃ ,分别处理清醒状态和麻醉状态小鼠 30min ,于正常饲养条件下恢复 2 4h后 ...
关键词：麻醉 热休克反应 热休克蛋白 蛋白水解酶 
全长cDNA克隆的三种方法的比较研究被引量：1
《生物技术》2003年第2期18-19,共2页李玉昌 林俊堂 张会勇 李文强 魏明旭 沈萍 韩鸿鹏 徐存拴 
国家自然科学基金项目 (39970 362 );河南省重大科技攻关项目 (0 1 2 2 0 31 90 0 )
为了得到一段EST所在基因的全长 ,采用了快速扩增cDNA末端 (RACE)、cDNA文库构建、λphage测序引物与特异性引物结合、非放射性探针进行噬菌体原位杂交等方法分别对该基因进行了克隆 ,结果得到了一致的全长cDNA ,三种不同实验方法的应...
关键词：全长CDNA克隆 RACE CDNA文库 噬菌体原位杂交 反向PCR扩增 EST 比较研究 
大鼠短间隔连续部分肝切除上调表达基因的克隆与分析
《动物学杂志》2003年第1期22-27,共6页李玉昌 徐存拴 林俊堂 张会勇 李文强 魏明旭 张云汉 
国家自然科学基金资助项目 (No.39970 36 2 ) ;河南省重大科技攻关项目 (No.0 12 2 0 31990 )
以短间隔连续部分肝切除 1 1 2h为试验方 ,以 0h对照为驱动方 ,应用抑制性消减杂交技术构建了高效率的正向消减cDNA文库 ,从中随机挑取的 5 0个克隆中有 45个包含了 1 0 0～ 3 5 0bp插入片段 ,对这些片段进行测序后经GenBankblast同源...
关键词：短间隔连续部分肝切除 抑制性消减杂交 肝再生 大鼠 上调表达基因 基因克隆 
结合PCR扩增快速筛选鉴定重组质粒被引量：2
《河南师范大学学报（自然科学版）》2002年第3期68-70,共3页林俊堂 李玉昌 张会勇 邢智峰 徐存拴 
国家自然科学基金资助项目 (编号 :39970 36 2 );河南省生物工程重点实验室资助项目
针对如何方便快捷筛选鉴定阳性克隆 (重组质粒 ) ,本文在实验室研究的基础上 ,创建了一种结合聚合酶链式反应简便快筛选鉴定阳性克隆的方法 .用 Triton裂解液裂解菌落 ,离心后上清作为模板 ,再用特异引物进行PCR扩增 ,2 h就可以得出结...
关键词：PCR扩增 筛选鉴定 阳性克隆 重组质粒 聚分酶链式反应 TRITONX-100 分子生物学 基因重组 
ADAMs的结构和功能简介
《生物学杂志》2002年第2期1-3,共3页张卫民 徐存拴 
国家自然科学基金(批准号 :39970 362 );中法先进研究计划 (国科生字 [1 996] 34号)资助项目
ADAMs(adisintegrinandmetallopoteinase)是近几年在细胞中发现的一类含有多个功能区的膜蛋白。本文简要介绍了ADAMs的结构和功能 ,为国内进行有关方面的研究提供了初步资料。
关键词：ADAMS 结构 功能 细胞膜蛋白 蛋白水解 细胞识别 信号传导 
应用抑制性消减杂交技术克隆大鼠肝再生过程中特异表达基因
《遗传》2002年第2期152-154,共3页李玉昌 徐存拴 张云汉 
国家自然科学基金 ( 39970 36 2 )资助项目
应用抑制性消减杂交技术成功地构建了高消减效率的正向消减cDNA文库 ,从随机挑取的 5 0个克隆中有31个均检出了 6 0～ 40 0bp插入片段 ,对这些插入cDNA片段进行测序后经Genbank同源性检索 ,表明其中 7个片段为未知新序列。大鼠肝切除后...
关键词：抑制性消减杂交 消减文库 部分肝切除 肝再生 同源性检索 大鼠 细胞增殖 再分化 
大鼠肝ADAMs种类鉴定及肝再生过程中ADAMsmRNA差异分析被引量：2
《河南科学》2002年第1期38-41,共4页林俊堂 李玉昌 梁卫红 张会勇 徐存拴 
国家自然科学基金项目 (39970 36 2 );河南省生物工程重点实验室资助项目
以 2 / 3肝切除 (patialhepatectomy ,PH)大鼠为材料 ,利用PT -PCR技术 ,通过ADAMs通用引物初步分析了肝脏中ADAMs种类及PH后恢复 4h和 36h时ADAMsmRNA差异。结果表明 :PH后不同恢复时间ADAMsmRNA的扩增谱带没有差异 ,但扩增谱带的强弱...
关键词：肝再生 ADAMS 通用引物 RT-PCR 基因克隆 cDNA mRNA 糖蛋白 大鼠肝脏 MDCS 
短间隔连续部分肝切除对大鼠生存和肝组织结构的影响被引量：20
《动物学报》2001年第6期659-665,T001,共8页徐存拴 李永辉 段瑞峰 卢爱灵 夏民 吉爱玲 
国家自然科学基金资助项目 ( 39970 362 );河南省生物工程重点实验室资助项目~~
在部分肝切除 ( partialhepatectomy ,PH)后的细胞激活 (G0～G1)期 ( 4h)、有丝分裂高峰期 ( 3 6h)及以两者交叉方式进行连续部分肝切除 (successivepartialhepatectomy ,SPH) ,观察其对大鼠生存和肝组织结构的影响。结果表明 ,大鼠对...
关键词：大鼠模型 短间隔连续部分肝切除 肝再生 肝组织结构 
ADAMs的结构和功能被引量：4
《自然科学进展（国家重点实验室通讯）》2001年第9期902-908,共7页徐存拴 张为民 林俊堂 胡轶红 梁卫红 李玉昌 
国家自然科学基金(批准号:39970362);中法先进研究计划(国科生字[1996]134号)资助项目
ADAMs是近几年发现的一类锚定于细胞膜的跨膜糖蛋白,含多个结构域并具有多种功能,它们的结构域包括信号肽区、前调控区、金属蛋白水解酶区、解联蛋白区、富半胱氨酸区、上皮生长因子区、跨膜区和胞内区等;它们的功能包括蛋白水解、分子...
关键词：ADAMS 金属蛋白水解酶 信号肽 解联蛋白 整联蛋白 跨膜糖蛋白 结构域 一级结构 
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