国家高技术研究发展计划(2007AA100605)

作品数：12被引量：77H指数：5
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相关作者：伍宁丰初晓宇田健谢春芳姚冬生更多>>
相关机构：中国农业科学院生物技术研究所暨南大学广东省生物工程药物重点实验室国家工程研究中心更多>>
相关期刊：《动物营养学报》《农药学学报》《中国农业科技导报（中英文）》《暨南大学学报（自然科学与医学版）》更多>>
相关主题：黄曲霉毒素解毒酶易错PCR定向进化PCR-DGGE甲基对硫磷水解酶更多>>
相关领域：生物学农业科学环境科学与工程更多>>
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黄曲霉毒素氧化酶的酶动力学研究被引量：4
《暨南大学学报（自然科学与医学版）》2012年第5期496-500,共5页胡丽莎 谢春芳 刘大岭 
国家"863计划"(2007AA100605)
黄曲霉毒素氧化酶(AFO)是来自Armillariella tabescens的具有降解黄曲霉毒素作用的蛋白质酶.本实验室成功克隆和以原核系统表达了黄曲霉毒素氧化酶,前期的工作中用传统测量表观酶促反应速度的方法对AFO进行了酶动力学的研究,采用了在酶...
关键词：黄曲霉毒素氧化酶 等温滴定微量热技术 酶动力学 
基于易错PCR的黄曲霉毒素解毒酶体外分子定向进化被引量：11
《生物工程学报》2011年第7期1100-1108,共9页张赛 邢克克 胡亚冬 谢春芳 刘大岭 姚冬生 
国家高技术研究发展计划(863计划)(No.2007AA100605);广东省科技攻关计划(No.2009B020301001);暨南大学"211工程"经费资助~~
运用定向进化-易错PCR方法,提高黄曲霉毒素解毒酶的活力及稳定性,并结合辣根过氧化物酶(HRP)-隐性亮绿(RBG)快速高通量筛选系统,构建了库容约为104的突变体库。经过两轮易错PCR,最终分别获得了耐高温70℃突变酶A1773、pH 4.0稳定性的突...
关键词：黄曲霉毒素解毒酶 稳定性 定向进化 易错PCR 
Pseudomonas sp.1-7中甲基对硫磷水解酶基因的克隆及酶学性质研究
《农药学学报》2011年第2期162-168,共7页许丽 初晓宇 田健 伍宁丰 
国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2007AA100605)资助
为了研究和分离有机磷降解酶及其编码基因,从农药厂污水处理池的活性污泥中分离出一株可以高效降解甲基对硫磷的细菌1-7,经16S rDNA鉴定为假单胞菌Pseudomonas sp.。通过构建基因组文库的方法克隆了1-7的甲基对硫磷水解酶基因ophc3,该...
关键词：甲基对硫磷水解酶 文库构建 基因克隆 酶学性质 
通过正交实验设计突变体组合提高甲基对硫磷水解酶OPHC2对乙基对硫磷的降解能力
《中国农业科技导报》2010年第4期78-83,共6页吕红 田健 初晓宇 伍宁丰 
国家863计划项目(2007AA100605)资助
分别自假产碱假单胞菌(Pseudomonas pseudoalcaligenesC2-1)和假单胞菌(Pseudomonassp.1-7)中克隆得到甲基对硫磷水解酶基因ophc2和ophc3,其编码甲基对硫磷水解酶OPHC2和OPHC3的氨基酸序列相似性达98.5%,仅5个氨基酸残基不同,但酶学性...
关键词：甲基对硫磷水解酶 正交实验 定点突变 
黄曲霉毒素解毒酶对岭南黄肉仔鸡日粮中黄曲霉毒素B_1解毒效果的研究被引量：23
《动物营养学报》2010年第2期424-430,共7页曹红 尹逊慧 陈善林 胡亚冬 胡熔 李世川 谢春芳 苏全 姚冬生 
十一五863重点项目(2007AA100605);广东省高校科技成果转化重大项目(cgzhzd0604);广东省产业技术研究与开发资金计划项目(0712220800003)
本文通过测定岭南黄肉仔鸡生长性能和血清指标及对肝脏组织切片的观察,旨在探讨黄曲霉毒素解毒酶对黄曲霉毒素B1(AFB1)的解毒作用。选用1日龄健康岭南黄肉仔鸡420羽,随机分为7个处理,每个处理4个重复,每个重复15羽,雄鸡10羽,雌鸡5羽。7...
关键词：黄曲霉毒素解毒酶 黄曲霉毒素 岭南黄肉仔鸡 生长性能 血清指标 
一种酿酒酵母附加型分泌表达载体pYES2/CT/α-factor的构建及鉴定被引量：2
《中国生物工程杂志》2009年第12期49-53,共5页胡亚冬 姚冬生 
国家十一五"863"计划重点项目(2007AA100605)资助项目
以pPIC9为模板,通过PCR扩增获得酿酒酵母的α-交配因子(α-factor),并克隆至酿酒酵母胞内表达载体pYES2/CT中,构建了一种新型酿酒酵母附加型分泌表达载体pYES2/CT/α-factor(pYCα)。再将甘露聚糖酶基因(mannase,man)通过酶切、连接克隆...
关键词：酿酒酵母 信号肽 分泌表达 
蛋白质定向进化技术的研究进展被引量：4
《生物技术通报》2009年第11期43-47,共5页苏怡丹 伍宁丰 刘国安 
国家"863"计划项目(2007AA100605)
蛋白质定向进化技术是蛋白质分子改造的一个重要策略。重点介绍了易错PCR、DNA改组等对编码蛋白质的基因进行随机突变和重组的技术,以及构建突变体库和高通量筛选的方法,并探讨了定向进化技术在蛋白质工程中的应用及前景。
关键词：定向进化 易错PCR DNA改组 高通量筛选 
有机磷污染土壤和活性泥中有机磷降解酶基因和微生物多样性研究被引量：3
《中国农业科技导报》2009年第6期63-68,共6页赵宇 许丽 田健 初晓宇 伍宁丰 
国家863计划项目(2007AA100605)资助
采用珠磨法直接从受有机磷污染的土壤和活性泥样品中提取和纯化宏基因组DNA。根据有机磷降解酶基因保守区设计引物,从宏基因组中扩增有机磷降解酶基因片段。回收扩增产物后,构建了以pEASY-T3为载体的有机磷降解酶基因片段文库。从文库...
关键词：有机磷污染 土壤 活性泥 基因片段文库 PCR-DGGE 
来源于假单胞菌4-硝基酚降解基因簇中的偏苯三酚1,2-双加氧酶基因克隆和功能鉴定被引量：2
《中国农业科技导报》2009年第4期71-76,共6页孙雯 许丽 张双宇 田健 初晓宇 伍宁丰 
国家863计划项目(2007AA100605)资助
通过富集培养的方法从农药厂废水曝气池的活性污泥中筛选到了一株既具有甲基对硫磷降解活性又可以有效降解4-硝基酚的高效菌株1-7,经16S rDNA鉴定为假单胞菌(Pseudom onassp.)。根据4-硝基酚降解相关基因保守区设计简并引物扩增小片段,...
关键词：甲基对硫磷 4-硝基酚 假单胞菌 TAIL-PCR 偏苯三酚1 2-双加氧酶 
DNA甲基化作用的生物学功能被引量：16
《中国农业科技导报》2009年第1期33-39,共7页郑小梅 伍宁丰 
国家863计划项目(2007AA100605)资助
DNA甲基化作为DNA序列的修饰方式,是一种重要的表观遗传机制,能够在不改变DNA分子一级结构的情况下调节基因组的功能,在生命活动中起着重要的作用。其功能主要可归结为以下4个方面:维持基因组遗传物质的稳定性,调控基因的表达,建立表观...
关键词：DNA甲基化 DNA甲基转移酶 表观遗传 印迹基因 X-染色体失活 
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