甲醇毕赤酵母

作品数:14被引量:58H指数:5
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黑曲霉中葡萄糖氧化酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达被引量:8
《食品与生物技术学报》2013年第6期615-621,共7页刘虎军 罗玮 范新蕾 余晓斌 
国家自然科学基金项目(21176105);中央高校基本科研业务费专项资金项目(JUSRP111A24)
为了提高葡萄糖氧化酶的生产能力,提取和纯化了黑曲霉Aspergillus niger PCTC的基因组DNA,以此为模板进行PCR扩增获得葡萄糖氧化酶基因,经测序,所得基因全长1 772 bp,编码含有589个氨基酸的蛋白质。将目的基因和表达载体pPIC9K连接经电...
关键词:葡萄糖氧化酶 黑曲霉 异源表达 甲醇毕赤酵母 
漆酶基因的克隆及在甲醇毕赤酵母中的表达被引量:2
《食品研究与开发》2008年第12期30-32,共3页郭梅 路福平 白东清 蒲军 梁鹏 
天津市自然科学基金重点项目(07JCZDJC03100)
以白腐菌杂色云芝RNA为模板,通过RT-PCR获得不带自身信号肽漆酶Lcc1基因的cDNA片段。构建了重组表达载体pMETαA-Lcc1,并将其线性化后用电穿孔法导入Pichia methabolica PMAD16,PCR结果表明Lcc1基因已经整合到甲醇毕赤酵母染色体上。经...
关键词:漆酶 CDNA 甲醇毕赤酵母 异源表达 
培养条件对甲醇毕赤酵母异源表达木质素过氧化物酶的影响被引量:5
《天津科技大学学报》2007年第1期33-36,共4页王海宽 路福平 
对含有黄孢原毛平革菌木质素过氧化物酶基因(LipH8)的甲醇毕赤酵母培养基和发酵方法进行了研究.摇瓶培养条件研究结果表明:用11°Bx麦芽汁培养工程菌,然后用高温浸提液置换诱导产酶较好.5 L发酵罐产酶放大实验结果表明,木质素过氧化...
关键词:异源表达 木质素过氧化物酶 甲醇毕赤酵母 黄孢原毛平革菌 
Reteplase基因的克隆及在甲醇毕赤酵母中的表达被引量:1
《华南理工大学学报(自然科学版)》2006年第12期25-29,50,共6页冮洁 江成英 杜连祥 路福平 郭洪杰 李迪 刘海洋 
黑龙江省自然科学基金资助项目(D0352)
进行了组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)突变体Reteplase(r-PA)基因的克隆,并在甲醇毕赤酵母(Pichia methanolica)中实现了胞外表达。以基因工程菌株里氏木霉(Trichoderma reesei)306染色体DNA为模板,通过PCR技术克隆了r-PA基因,将扩增产物...
关键词:组织型纤溶酶原激活剂 甲醇毕赤酵母 Reteplase(r-PA) 表达 
杂色云芝漆酶基因在甲醇毕赤酵母中表达条件研究被引量:6
《食品研究与开发》2006年第4期82-84,共3页郭梅 路福平 蒲军 白东清 杜连祥 
重组甲醇毕赤酵母(Pichiamethanolica)工程菌PMAD16/pMETA-Lcc1能分泌表达杂色云芝重组漆酶。本文通过对其发酵条件的研究,找出瓶发酵表达漆酶的最适培养条件:在BMMY培养基中添加0.2mmol/L的Cu2+,装液量为25mL/250mL三角瓶,接种量体积...
关键词:漆酶 重组甲醇毕赤酵母 表达条件 
甲醇毕赤酵母表达木质素过氧化物酶的研究被引量:2
《微生物学杂志》2005年第3期17-21,共5页王海宽 路福平 孙亚范 杜连祥 
将含有黄孢原毛平革菌(Phanerochaetechrysosprium)木质素过氧化物酶基因的甲醇毕赤酵母工程菌进行了鉴定和筛选,筛选得到木质素过氧化物酶活力高的菌株PMLIP08。确定了一步法发酵的最优葡萄糖浓度,优化其发酵培养条件,结果表明葡萄糖...
关键词:异源表达 木质素过氧化物酶 甲醇毕赤酵母 表达优化 
黄孢原毛平革菌木质素过氧化物酶基因在甲醇毕赤酵母中的表达被引量:1
《工业微生物》2005年第1期10-15,共6页孙亚范 王海宽 杜连祥 路福平 
将编码黄孢原毛平革菌木质素过氧化物酶(lip)的cDNA克隆到酵母整合型质粒pMETA上,电转化Ade缺陷型甲醇毕赤酵母(Pichiamethanolica)PMAD16,通过MD平板及PCR方法筛选和鉴定重组子。重组子发酵液经SDSPAGE分析和木质素过氧化物酶活力测定...
关键词:甲醇毕赤酵母 重组子 木质素过氧化物酶 黄孢原毛平革菌 电转化 信号肽 酶活测定 表达 酶基因 缺陷型 
甲醇毕赤酵母电转化条件的研究被引量:6
《齐齐哈尔大学学报(自然科学版)》2005年第1期8-11,共4页江成英 冮洁 曹畅 
采用电转化的方法,将携带有tPA355基因的DNA片段转化进甲醇毕赤酵母(Pichia methanolica)。通过调整参数,对影响电转化效率的主要因素进行探索,建立了质粒pMETα-tPA355对甲醇毕赤酵母PMAD16的高效电转化方法。
关键词:甲醇毕赤酵母 电转化 转化率 tPA355 
杂色云芝漆酶基因(Lcc1)的克隆及在甲醇毕赤酵母中的表达被引量:12
《菌物学报》2005年第2期221-226,共6页郭梅 蒲军 杜连祥 路福平 白东清 
以白腐菌杂色云芝Coriolus versicolor RNA为模板,通过RT-PCR获得漆酶Leel基因的cDNA片段。构建了甲醇酵母表达质粒pMETA-Lccl载体,并将其线性化后用电穿孔法导入Pichia methabolica PMAD16,部分阳性克隆的PCR结果表明Lccl基因已经整合...
关键词:甲醇毕赤酵母 杂色云芝 酶基因 cDNA片段 RT-PCR PICHIA E1基因 表达质粒 甲醇酵母 电穿孔法 阳性克隆 工程菌株 摇瓶培养 白腐菌 RNA 线性化 染色体 酶活力 漆酶 载体 
去信号肽的木质素过氧化物酶基因在甲醇毕赤酵母中的表达
《云南大学学报(自然科学版)》2004年第S2期87-90,共4页王海宽 路福平 孙亚范 杜连祥 
研究了LipH8基因在甲醇毕赤酵母中的表达.以黄孢原毛平革菌(Phanerochaetechrysosporium)RNA为模板,克隆LipH8基因片段.构建了甲醇酵母表达质粒pMETαA-LipH8载体,并将其线性化后用电穿孔法导入PichiamethabolicaPMAD16,部分阳性克隆的...
关键词:CDNA 异源表达 木质素过氧化物酶 甲醇毕赤酵母 
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