哺乳动物细胞

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表皮生长因子受体胞外区在哺乳动物细胞HEK293T中的分泌表达和鉴定被引量：3
《生物技术通讯》2012年第5期635-639,共5页张畅 唐珮 何阳阳 杜鹏 孙志伟 王双 庞晓斌 
目的:融合表达表皮生长因子受体(EGFR)胞外功能区,为制备针对该分子的特异性抗体提供可用的靶标抗原。方法:通过PCR扩增EGFR胞外区基因,将其克隆入真核表达载体pABhFc中,重组质粒瞬时转染HEK293T细胞,进行EGFR的瞬时分泌表达,纯化获得...
关键词：表皮生长因子受体 胞外区 真核表达 分泌表达 结合活性 
一种简单的哺乳动物细胞附着体质粒CaCl_2转化方法
《生物技术通讯》2012年第4期584-588,620,共6页林艳 李照熙 王芳 王天云 
国家自然科学基金(30970055)
目的:建立一种简单经济的哺乳动物细胞附着体质粒还原实验方法。方法:构建附着体载体,转染中国卵巢仓鼠(CHO)细胞和小鼠脑神经瘤细胞Neuro-2a,利用改良的赫特裂解法提取附着体质粒,CaCl2法转化附着质粒至宿主菌大肠杆菌DH5α,再次从DH5...
关键词：真核细胞 质粒还原实验 CaCl2转化法 附着质粒 
哺乳动物细胞高效表达载体的优化被引量：2
《生物技术通讯》2006年第5期692-695,共4页张国强 刘志刚 刘珊 俞炜源 
国家高技术研究发展计划项目(2001AA215351)
目的:优化哺乳动物细胞表达系统,提高目的基因的表达效率。方法:以组织型纤溶酶原激活剂(tPA)为报告基因,利用本实验室建立的CHOfrt/dhfr-细胞定点整合表达系统,对多种表达调控元件(包括hCMV和hEF-1α启动子、hCMV增强子、hEF-1α1st内...
关键词：CHO-dhfr^-细胞 表达调控元件 优化 表达载体 
登革2型病毒衣壳蛋白在哺乳动物细胞中的表达与鉴定
《生物技术通讯》2005年第6期595-597,共3页秦成峰 秦鄂德 
国家自然科学基金项目(30100006;30570084)
从构建的重组质粒pLEX-C中高保真PCR获得编码登革2型病毒43株C基因(D2C)的DNA片段,通过基因重组的方法将其克隆入真核表达载体pcDNA6/V5-His获得了重组真核表达载体pc/D2C。经电穿孔的方法转染BHK21细胞后,分别通过RT-PCR、免疫荧光和We...
关键词：登革病毒 衣壳蛋白 真核表达 
tPA突变体在哺乳动物细胞中的表达
《生物技术通讯》2005年第3期278-279,286,共3页于芳 李朝 周晓巍 黄培堂 
利用携带有二氢叶酸还原酶(dhfr)基因的pCI载体,实现tPA突变体(FrGGI)在CHO-dhfr-细胞中的高效表达,获得高表达细胞株。采用分子克隆常规技术,将去除3'端非蛋白编码区的tPA突变体cDNA与pCI载体连接,构建真核表达载体pCI-tPA;采用阳离子...
关键词：TPA 突变体 哺乳动物细胞 二氢叶酸还原酶 真核表达载体 脂质体转染法 4000U 工程细胞株 pCI 高效表达 常规技术 分子克隆 cDNA 高表达 编码区 阳离子 CHO 构建 筛选 基因 蛋白 测序 质粒 
哺乳动物细胞高效表达系统研究进展被引量：6
《生物技术通讯》2005年第1期56-59,共4页张国强 刘志刚 俞炜源 
哺乳动物细胞高效表达系统是基因工程制药研究中的一个重要内容,而表达载体和宿主细胞是哺乳动物细胞表达系统的2个基本组成部分。近年来通过降低目的基因的位置效应、提高目的基因的转录和翻译水平以及目的基因的拷贝数等方面构建哺乳...
关键词：哺乳动物细胞高效表达载体系统 生物工程制药 基因工程制药 表达载体 宿主细胞 
H1启动子siRNA载体的构建及应用被引量：4
《生物技术通讯》2004年第5期444-446,共3页刘萱 李楚芳 李平 曹诚军 
利用双链RNA(dsRNA)调控基因表达已经成为研究基因功能的有力工具。用人H1启动子构建了pBS/H1PS小干扰RNA(siRNA)表达载体,用于在哺乳动物细胞中产生特异性dsRNA转录产物。通过对293细胞中的PSMA7分子进行表达抑制,证明该siRNA载体能够...
关键词：小干扰RNA 启动子 293细胞 PSMA 靶基因 载体 表达 双链RNA 哺乳动物细胞 RNA干扰 
外源DNA在动物体内的吸收代谢被引量：2
《生物技术通讯》2004年第2期179-181,共3页刘建文 乐国伟 施用晖 
国家自然科学基金资助项目(30270970)
综述了外源DNA在动物体内组织和细胞的代谢命运。外源DNA经核酸酶不完全降解后可以通过胃肠道被哺乳动物吸收,外源DNA片段能够被哺乳动物细胞吸收并整合到宿主细胞基因组中。
关键词：外源DNA 哺乳动物细胞 吸收 代谢 核酸酶 胃肠道 
哺乳动物细胞表达系统及其研究进展被引量：6
《生物技术通讯》2003年第4期308-311,共4页刘定燮 周晓巍 黄培堂 
中国博士后科研基金资助
从表达载体、宿主细胞、表达系统的类型及选择等四个方面对哺乳动物细胞系统进行了综述。对相关的研究进展,如高效启动子的发现和改构、新型细胞株的建立及诱导表达调控系统亦作了简要介绍。通过这些阐述,期望能建立一个简洁而清晰的有...
关键词：哺乳动物细胞 表达系统 宿主细胞 表达载体 
磷酸钙法转染哺乳动物细胞SP2/0及其表达产物检测被引量：2
《生物技术通讯》2000年第2期115-117,共3页秦山 黄春妍 何芳 刘丽 赵连三 
国家自然科学基金 (项目号 39670 670 );四川省科委"九五"攻关重大项目;四川省计委科研基金资助
将真核细胞表达质粒以磷酸钙介导法导入小鼠骨髓瘤细胞SP2 0 ,转染细胞经超声破碎后 ,分别以显色法及化学发光法检测其目的蛋白 (HBsAg) ,证实化学发光法的检测灵敏度高于目前常用的显色法 ,且其结果易于保存。对化学发光法的实验条件...
关键词：转染 哺乳动物细胞 表达产物 磷酸钙法 
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