刘定燮

作品数：27被引量：44H指数：4
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供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
发文主题：乙型肝炎病毒三链DNA细胞凋亡DNA基因重组更多>>
发文领域：医药卫生生物学更多>>
发文期刊：《中华器官移植杂志》《生命的化学》《中国生物化学与分子生物学报》《生理科学进展》更多>>
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SV40载体在COS7细胞中的复制及外源基因的表达
《中国生物化学与分子生物学报》2004年第1期79-83,共5页刘定燮 周晓巍 黄培堂 
中国博士后科研基金资助项目~~
为评价SV4 0载体 COS7稳定表达系统的可能应用价值 ,将含人组织型纤溶酶原激活剂 (t PA)编码区的SV4 0载体pctPA转染COS7细胞 ,并以G4 18选择培养 2 8d ,得到稳定的抗性细胞库 .Southern印迹和溶圈法分别分析该细胞库在随后的细胞传代...
关键词：SV40载体 COS7细胞 复制 外源基因 表达 
哺乳动物细胞表达系统及其研究进展被引量：6
《生物技术通讯》2003年第4期308-311,共4页刘定燮 周晓巍 黄培堂 
中国博士后科研基金资助
从表达载体、宿主细胞、表达系统的类型及选择等四个方面对哺乳动物细胞系统进行了综述。对相关的研究进展,如高效启动子的发现和改构、新型细胞株的建立及诱导表达调控系统亦作了简要介绍。通过这些阐述,期望能建立一个简洁而清晰的有...
关键词：哺乳动物细胞 表达系统 宿主细胞 表达载体 
单质粒模式诱导表达载体系统的建立被引量：2
《生物化学与生物物理进展》2003年第5期824-825,共2页刘定燮 周晓巍 黄培堂 
中国博士后科研基金资助项目~~
在Invitrogen公司T Rex诱导表达系统的基础上,将目的基因与调控蛋白基因克隆于同一载体上,并在CV1细胞中观察了四环素对该单质粒模式载体报告基因表达的诱导效应.载体在瞬时转染CV1细胞并以四环素诱导 2 4h后目的基因的表达水平提高了 ...
关键词：单质粒模式 诱导表达 载体系统 四环素 
乙型肝炎病毒S区蛋白对环孢素A诱导HepG2细胞凋亡的影响被引量：3
《中华器官移植杂志》2002年第6期350-352,共3页刘定燮 姜荣龙 吴道宏 骆抗先 
目的　研究乙型肝炎病毒 (HBV)S区蛋白与环孢素A(CsA)之间的肝细胞毒性关系 ,以探讨HBsAg阳性的肾移植患者使用CsA后 ,肝炎活动发生率显著增高的可能机制。方法　建立了稳定表达HBVS区蛋白的肝癌细胞株 (HepG2 )细胞克隆 ,并以此为模型 ...
关键词：乙型肝炎病毒 S区蛋白 环孢素A HEPG2 细胞凋亡 肾移植 
乙型肝炎病毒C区蛋白在肝癌细胞株中的表达被引量：1
《第一军医大学学报》2002年第2期174-176,共3页刘定燮 戴琳 骆抗先 
用PCR法获得编码乙型肝炎病毒C区不同蛋白的基因,利用基因重组技术构建表达这些蛋白的真核表达载体,并在高分化肝癌细胞株HepG2中进行了稳定表达。
关键词：乙型肝炎病毒 病毒壳体 基因表达 肝肿瘤 
乙型肝炎病毒S区蛋白肝癌细胞株的稳定表达
《第一军医大学学报》2001年第10期753-754,共2页刘定燮 戴琳 骆抗先 
构建了乙肝病毒S区不同蛋白的重组真核表达质粒pcLS2、pcLS4,并转染肝癌细胞株HepG2。转染细胞经新霉素筛选后,获得稳定表达S区不同蛋白的细胞株。Westernblotting可分别检测到相对分子质量为39000的大蛋白及24000的主蛋白在pcLS2、pcLS...
关键词：乙型肝炎病毒 病毒壳体 基因表达 肝肿瘤 
Klenow大片段的聚合酶及核酸酶活性在重组质粒构建中的巧用被引量：1
《第一军医大学学报》2001年第8期630-630,632,共2页刘定燮 戴琳 骆抗先 
目的 探讨应用大肠杆菌Klenow大片段同时补平及切平DNA 3'凹端或3'凸端的可行性。方法 以构建乙型肝水（乙肝）病毒S基因的真核表达载体为例，用Kpn I及Xhol I消解含乙肝病毒前S/S基因的质粒，切除质粒中的前S区基因序列。通过Klenow大...
关键词：DNA 互补 重组质粒 大肠杆菌 核酸酶 聚合酶 Klenow大片段 
乙型肝炎病毒全基因重组真核表达质粒的构建被引量：7
《第一军医大学学报》2001年第3期185-186,共2页倪宏 骆抗先 刘定燮 朱幼芙 马佩球 朱科伦 
广州市科委科技项目!(99-K007-03)
目的 构建乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）全基因重组真核表达质粒，旨在转染肝细胞，建立 ＨＢＶ复制状态模型。方法体 外连接 ＨＢＶ（ａｙｗ亚型） ＤＮＡ获得 ６．４ ｋｂ的双拷贝 ＤＮＡ片段，然后将其插入 ｐｃＤＮＡ３载体的 ＥｃｏＲＶ...
关键词：乙型肝炎病毒 基因重组 质粒 HBV 基因转染 
用部分补平法克隆乙型肝炎病毒preS/S基因被引量：2
《第一军医大学学报》2001年第1期60-61,共2页刘定燮 李德祥 骆抗先 
目的探讨利用Ｋｌｅｎｏｗ大片段对ＤＮＡ末端作部分补平而使非匹配粘端形成匹配粘端的可行性。方法用 ＢａｍＨＩ、ＸｂａｌＩ消解载体 ｐｃＤＮＡ３，用 ＢｇｌＨ、Ｈｉｎｄ Ⅲ从含乙型肝炎病毒全基因组质粒中切取 ＨＢＶｐｒｅＳ／...
关键词：基因重组 Klenow大片段 乙型肝炎病毒 部分补平法 克隆 preS/S基因 
应用T/A策略克隆乙肝病毒pC/C及C基因
《生物化学与生物物理进展》2000年第6期662-663,共2页刘定燮 骆抗先 
以克隆乙型肝炎病毒 pC/C及C基因为例 ,报道了在DNA重组中 ,当目的基因与载体末端不匹配时可采取的一新方法 .用内切酶切取的基因片段为平端时 ,可在含dATP的反应体系中 ,用Taq酶的末端转移酶活性在其 3′末端加上单个碱基 (dA)的突出...
关键词：DNA重组 T载体 TAQ DNA聚合 乙型肝炎病毒 
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