易错PCR

作品数：113被引量：249H指数：8
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易错PCR技术提高枯草芽孢杆菌α-淀粉酶活性研究被引量：1
《饲料研究》2014年第19期78-81,86,共5页马全磊 沈思军 代蓉 闫云峰 潘晓亮 
863计划(2011AA100307-06);国家支撑计划(2011BAD28B05-1);国家自然科学基金(310001002;31360540);石河子大学重大科技攻关计划项目(gxjs2012-zdgg05-02)
探索易错PCR的反应体系最佳条件,利用易错PCR技术对枯草芽孢杆菌jy1的淀粉酶基因amy 1进行定向进化研究。突变基因重组于表达载体pET32a中,并导入大肠杆菌BL21构建突变体文库,经选择性培养基筛选获得2株有益突变菌株pET32a-amya和pET32a...
关键词：易错PCR 枯草芽孢杆菌 Α-淀粉酶活性 
易错PCR提高华根霉脂肪酶的热稳定性被引量：1
《生物工程学报》2013年第12期1753-1764,共12页王睿 喻晓蔚 徐岩 
国家高科技研究发展计划(973计划)(No.2011CB710800);国家高技术研究发展计划(863计划)(Nos.2012AA022207;2011AA02A209;2011AA02A210);中央高校基本科研业务费专项资金(No.JUSRP11014);国家自然科学基金(No.20802027)资助~~
为了提高华根霉Rhizopus chinensis CCTCC M201021脂肪酶的热稳定性,运用定向进化-易错PCR的方法,经两轮易错PCR引入突变,利用fast-blue RR顶层琼脂法对突变文库进行筛选,第一轮易错PCR后筛选到2株突变菌株,第二轮筛选到4株突变株。第...
关键词：定向进化 易错PCR 华根霉脂肪酶 热稳定性 毕赤酵母 
酶的定向进化研究及其在工业生物催化中的应用被引量：8
《生物加工过程》2011年第4期69-75,共7页苏龙 庄宇 何冰芳 
国家重点基础研究发展计划(973计划)资助项目(2009CB724700);国家高技术研究发展计划(863计划)资助项目(2007AA021306)
综合概括了各种蛋白质改造与微生物代谢途径改造的非理性定向进化技术的原理、特点,介绍了这些技术在高性能工业生物催化剂改造中的应用。
关键词：定向进化 DNA改组 易错PCR 工业生物催化 
基于易错PCR的黄曲霉毒素解毒酶体外分子定向进化被引量：11
《生物工程学报》2011年第7期1100-1108,共9页张赛 邢克克 胡亚冬 谢春芳 刘大岭 姚冬生 
国家高技术研究发展计划(863计划)(No.2007AA100605);广东省科技攻关计划(No.2009B020301001);暨南大学"211工程"经费资助~~
运用定向进化-易错PCR方法,提高黄曲霉毒素解毒酶的活力及稳定性,并结合辣根过氧化物酶(HRP)-隐性亮绿(RBG)快速高通量筛选系统,构建了库容约为104的突变体库。经过两轮易错PCR,最终分别获得了耐高温70℃突变酶A1773、pH 4.0稳定性的突...
关键词：黄曲霉毒素解毒酶 稳定性 定向进化 易错PCR 
通过体外分子进化技术提高淀粉液化芽胞杆菌BS5582 β-1,3-1,4-葡聚糖酶热稳定性被引量：5
《生物工程学报》2010年第9期1293-1301,共9页秦久福 高威威 李崎 李永仙 郑飞云 刘春风 顾国贤 
"十一五"国家科技支撑计划(Nos.2008BAI63B06;2007BAK36B01);国家高技术研究发展计划(863计划)(No.2006AA);长江学者和创新团队发展计划项目(No.IRT0532)资助~~
应用基于易错PCR随机突变的体外分子进化技术,来提高淀粉液化芽胞杆菌β-1,3-1,4-葡聚糖酶的热稳定性。利用建立的基于96微孔板高通量筛选模型,经过两轮定向进化与高通量筛选,共筛选得到3株热稳定性明显提高的突变体2-JF-01、2-JF-02和2...
关键词：Β-1 3-1 4-葡聚糖酶 体外分子进化 易错PCR 热稳定性 
短小芽孢杆菌碱性蛋白酶基因的随机突变被引量：2
《应用与环境生物学报》2010年第1期96-99,共4页杨锦 冯红 万民远 焦惠科 张晓露 张义正 
国家高技术研究发展计划(No.2006AA02Z221)资助~~
碱性蛋白酶(DHAP)属于丝氨酸蛋白酶家族(S8A),是由275个氨基酸残基组成的单链多肽,没有二硫键,以Asp32、His64、Ser221作为活性中心.采用易错PCR方法,对短小芽孢杆菌碱性蛋白酶基因(GenBank登录号:AY458140)进行随机突变.在大肠杆菌中...
关键词：碱性蛋白酶 短小芽孢杆菌 定向进化 易错PCR 序列分析 基因表达 
利用SPT3的定向进化提高工业酿酒酵母乙醇耐受性被引量：15
《生物工程学报》2010年第2期159-164,共6页赵心清 姜如娇 李宁 杨晴 白凤武 
国家自然科学基金项目(No.30500011);国家高科技研究发展计划(863计划)(No.2007AA10Z358)资助~~
利用对转录因子的定向进化可对多基因控制的性状进行有效的代谢工程改造。本研究对酿酒酵母负责胁迫相关基因转录的SAGA复合体成分SPT3编码基因进行易错PCR随机突变,并研究了SPT3的定向进化对酿酒酵母乙醇耐性的影响。将SPT3的易错PCR...
关键词：定向进化 乙醇耐性 SPT3 酿酒酵母 易错PCR 
定向进化-易错PCR方法提高华根霉Rhizopus chinensis CCTCC M201021脂肪酶的活力被引量：15
《生物工程学报》2009年第12期1892-1899,共8页王睿 喻晓蔚 沙冲 徐岩 
国家自然科学基金(No.20802027);国家高科技研究发展计划(863计划)(Nos.2009AA101500;2008AA10Z304;2007AA100401;2006AA020202);"十一五"国家科技支撑计划重大项目(No.2008BAI63B07);长江学者和创新团队发展计划(No.IRT0532)资助~~
运用定向进化-易错PCR的方法,提高了华根霉Rhizopus chinensis CCTCC M201021脂肪酶的活力。经过两轮易错PCR和pNPP顶层琼脂法筛选,从第一轮和第二轮突变库中分别筛选获得最佳突变株1-11和2-28,脂肪酶酶活与野生菌株相比分别提高2倍和4...
关键词：定向进化 易错PCR 华根霉脂肪酶 脂肪酶活力 
蛋白质定向进化技术的研究进展被引量：4
《生物技术通报》2009年第11期43-47,共5页苏怡丹 伍宁丰 刘国安 
国家"863"计划项目(2007AA100605)
蛋白质定向进化技术是蛋白质分子改造的一个重要策略。重点介绍了易错PCR、DNA改组等对编码蛋白质的基因进行随机突变和重组的技术,以及构建突变体库和高通量筛选的方法,并探讨了定向进化技术在蛋白质工程中的应用及前景。
关键词：定向进化 易错PCR DNA改组 高通量筛选 
酶定向进化技术及其在化学品生物转化中的应用被引量：1
《化学工程与装备》2009年第6期89-92,共4页庄园 余劲聪 方柏山 
国家自然科学基金资助项目(20676048);国家"863"计划项目(2006AA020103)
定向进化可有目的地按照需要改造蛋白质分子中的氨基酸残基或结构域,从而定向改造蛋白质的性质,使其成为具有人们预期功能的新型蛋白质,应用于不同化学品生物转化反应中。本文简要的介绍了酶定向进化技术及其在化学品生物转化中的应用。
关键词：定向进化 生物转化 易错PCR DNA改组 高通量筛选 
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