易错PCR

作品数：113被引量：249H指数：8
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分子改良提高甘露聚糖酶的耐热性被引量：1
《湖北农业科学》2023年第12期151-153,162,共4页王亚伟 薛强 熊海容 
湖北省技术创新重大项目(2018ABA093)。
以来源于嗜热放线菌(Thermobifida fusca)的甘露聚糖酶基因(KJ806638)为研究对象,利用易错PCR方法对其进行改造,获得了耐热性进一步提高的甘露聚糖酶。筛选获得的N16I突变株,其最适反应温度从72.5℃提升到77.5℃。差示扫描荧光定量(DSF...
关键词：甘露聚糖酶 易错PCR 热稳定性 
耐热植酸酶突变体的筛选及性质研究被引量：4
《中国生物工程杂志》2021年第2期30-37,共8页陈中伟 郑璞 陈鹏 程吴丹 
江苏省自然科学基金(BK20171261)资助项目。
目的:对大肠杆菌Escherichia coli植酸酶基因进行定向进化,获得热稳定性提高的植酸酶突变体。方法:利用易错PCR技术和96微孔板高通量筛选方法获得突变体基因,并对突变酶进行异源表达、纯化及性质研究。结果:通过筛选获得3株热稳定性明...
关键词：植酸酶 易错PCR 热稳定性 毕赤酵母 
基于体外分子进化技术提高弯曲芽孢杆菌CCTCC 2015368 β-淀粉酶的热稳定性被引量：2
《生物工程学报》2018年第2期255-263,共9页陈磊 陈晟 吴敬 吴丹 
国家自然科学基金(No.31571776);国家杰出青年基金(No.31425020);江苏高校优秀科技创新团队项目;111计划(No.111-2-06);中央高校基本科研业务费专项资金(No.JUSRP51706A)资助~~
运用体外分子进化技术易错PCR方法,高通量筛选热稳定性提高的弯曲芽孢杆菌Bacillus flexus CCTCC2015368β-淀粉酶突变体。利用LB琼脂淀粉板显色、96-孔板DNS法测酶活和酶标仪检测等,最终筛选到了一株热稳定性显著提高的突变体D476N。...
关键词：分子进化 易错PCR Β-淀粉酶 热稳定性 
易错PCR法提高土芽孢杆菌ZH1羧酸酯酶的热稳定性被引量：3
《微生物学报》2015年第8期1060-1067,共8页刘韩 吴丽云 高贺 倪辉 蔡慧农 朱艳冰 
国家自然科学基金项目(31401632);集美大学科研创新团队基金项目(2010A006)~~
【目的】对土芽孢杆菌(Geobacillus sp.)ZH1的羧酸酯酶基因进行定向进化,筛选得到酶热稳定性提高的突变酶。【方法】利用易错PCR技术向羧酸酯酶基因中随机引入突变,建立酶基因突变文库,筛选获得热稳定性提高的突变体,并对突变酶进行诱...
关键词：定向进化 易错PCR 羧酸酯酶 热稳定性 
易错PCR提高华根霉脂肪酶的热稳定性被引量：1
《生物工程学报》2013年第12期1753-1764,共12页王睿 喻晓蔚 徐岩 
国家高科技研究发展计划(973计划)(No.2011CB710800);国家高技术研究发展计划(863计划)(Nos.2012AA022207;2011AA02A209;2011AA02A210);中央高校基本科研业务费专项资金(No.JUSRP11014);国家自然科学基金(No.20802027)资助~~
为了提高华根霉Rhizopus chinensis CCTCC M201021脂肪酶的热稳定性,运用定向进化-易错PCR的方法,经两轮易错PCR引入突变,利用fast-blue RR顶层琼脂法对突变文库进行筛选,第一轮易错PCR后筛选到2株突变菌株,第二轮筛选到4株突变株。第...
关键词：定向进化 易错PCR 华根霉脂肪酶 热稳定性 毕赤酵母 
通过体外分子进化技术提高淀粉液化芽胞杆菌BS5582 β-1,3-1,4-葡聚糖酶热稳定性被引量：5
《生物工程学报》2010年第9期1293-1301,共9页秦久福 高威威 李崎 李永仙 郑飞云 刘春风 顾国贤 
"十一五"国家科技支撑计划(Nos.2008BAI63B06;2007BAK36B01);国家高技术研究发展计划(863计划)(No.2006AA);长江学者和创新团队发展计划项目(No.IRT0532)资助~~
应用基于易错PCR随机突变的体外分子进化技术,来提高淀粉液化芽胞杆菌β-1,3-1,4-葡聚糖酶的热稳定性。利用建立的基于96微孔板高通量筛选模型,经过两轮定向进化与高通量筛选,共筛选得到3株热稳定性明显提高的突变体2-JF-01、2-JF-02和2...
关键词：Β-1 3-1 4-葡聚糖酶 体外分子进化 易错PCR 热稳定性 
基于易错PCR的假密环菌Armillariella tabescens MAN47 β-甘露聚糖酶耐高温定向进化被引量：7
《生物工程学报》2009年第12期1900-1906,共7页吕晓慧 胡亚冬 胡凤娟 刘大岭 姚冬生 
广东省科技攻关项目(No.2005B20601004)资助~~
本研究利用易错PCR技术突变假密环菌Armillariella tabescens MAN47 β-甘露聚糖酶野生型基因,PCR产物与大肠杆菌-酿酒酵母穿梭表达载体pYCα上连接,在大肠杆菌DH5α中扩增后电转入酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae,构建了库容为104的...
关键词：定向进化 Β-甘露聚糖酶 易错PCR 热稳定性 
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