易错PCR

作品数：113被引量：249H指数：8
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草生欧文氏菌中酪氨酸酚裂解酶的体外定向进化及结构模拟
《化学与生物工程》2023年第7期34-39,44,共7页郭小雷 
福建省中科院STS院省合作重大项目(2022T3004)。
以来源于草生欧文氏菌(Erwinia herbicola)的酪氨酸酚裂解酶(Eh-TPL)为目的基因,通过易错PCR定向进化技术构建突变体文库,利用高通量筛选方法获得了比酶活提高的突变体S20C和E202R,再通过定点突变得到突变体S20C/E202R/N161S。经摇瓶发...
关键词：易错PCR 定向进化 草生欧文氏菌 酪氨酸酚裂解酶 L-酪氨酸 
易错PCR技术改造β-环糊精葡萄糖基转移酶的催化特性被引量：4
《现代食品科技》2023年第5期25-31,共7页郑婉 刘振杨 郑金珠 武国干 吴华伟 
国家自然科学基金项目(21576110);江苏省益生制剂重点建设实验室开放课题(JSYSZJ2017001)。
β-环糊精是一种环状多糖,可用于改变某些大分子化合物的理化性质,在食品、生物及医药等领域都具有很高的工业应用前景。通过利用β-环糊精葡萄糖基转移酶(β-CGTase),使其作用于淀粉等含有葡萄糖基的多糖化合物,可转化生成β-环糊精。...
关键词：Paenibacillus campinasensis β-CGTase 定向进化 易错PCR 酶学性质 
定向进化肌醇加氧酶MIOX4提高葡萄糖二酸的产量
《食品与发酵工业》2022年第22期1-8,共8页苏蕊芳 李诗韵 毛银 赵运英 邓禹 
国家重点研发计划项目(2019YFA0905502);国家自然科学基金(21877053)。
葡萄糖二酸是一种在医药、食品、服装纺织和化工均有重要作用的有机二元酸。葡萄糖二酸的生物合成途径已经在大肠杆菌、毕赤酵母和酿酒酵母细胞中成功构建。为了提高葡萄糖二酸合成关键酶-肌醇加氧酶MIOX4的活性,该研究以酿酒酵母(Sacch...
关键词：酿酒酵母 肌醇加氧酶MIOX4 葡萄糖二酸 易错PCR 生物传感器 
易错PCR技术提高嗜热酸性Ⅲ型普鲁兰水解酶TK-PUL催化活性的研究被引量：1
《食品工业科技》2022年第18期130-136,共7页曾静 郭建军 袁林 
国家自然科学基金地区科学基金项目(32160579);江西省杰出青年科学基金项目(20202ACBL215001);江西省主要学科学术和技术带头人培养计划(20212BCJ23033)。
嗜热酸性Ⅲ型普鲁兰水解酶TK-PUL在液化条件下可完全水解淀粉为淀粉糖,在“液化糖化一步法”的淀粉制糖工艺中具有巨大的应用潜力。本研究拟采用易错聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术提高TK-PUL的催化活性。经过两轮...
关键词：Ⅲ型普鲁兰多糖水解酶 定向进化 易错聚合酶链式反应(易错PCR) 高通量筛选技术 催化活性本 
易错PCR定向进化技术提高蒙古黄芪病程相关蛋白AmPR-10核酸酶活性的研究被引量：1
《化学与生物工程》2022年第2期23-27,51,共6页王珏 吴娜 张育敏 闫海洋 胡丽丽 
山西省自然科学基金面上项目(201901D111339);山西省高等学校科技创新项目(2020L0407,2020L0420);山西中医药大学科技创新能力培育计划(2020PY-JC-06,2021PY-JC-06)。
以分子伴侣skp修饰的蒙古黄芪病程相关蛋白AmPR-10(Astragalus membranaceus pathogenesis-related protein-10)全基因为模板,通过易错PCR定向进化技术构建突变体文库,以酵母tRNA为底物建立高通量筛选方法,获得了核酸酶活性提高的AmPR-1...
关键词：易错PCR 定向进化 AmPR-10 核酸酶活性 
易错PCR技术在脂肪酶的定向进化中的应用
《中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生》2021年第11期262-263,293,共3页戴丽 赵莎 邹远军 
脂肪酶是生物体内重要的代谢酶,广泛存在于动物、植物和微生物中,控制着消化、吸收、脂肪重构和脂蛋白代谢等过程。微生物产生的脂肪酶具有作用多、易于培养、产量丰富等特点而被广泛用于工业生产,其中热稳定脂肪酶的研究和开发更是具...
关键词：易错PCR 脂肪酶 定向进化 分子改造 
β-1,4-葡聚糖内切酶的定向进化被引量：1
《化学与生物工程》2021年第2期53-56,共4页郭成栓 杨桂玲 刘晓珊 
广东省中医药局科研项目(20182101);广东食品药品职业学院自然科学基金项目(2016YZ018)。
根据阳性转化子在IPTG诱导下可以在LB-CMC平板上产生水解圈的原理,在初筛和摇瓶复筛的基础上,采用易错PCR法对β-1,4-葡聚糖内切酶基因进行定向进化,从阳性转化子中筛选酶活提高的突变菌株。突变酶活性是野生酶的1.32倍,催化效率约为野...
关键词：β-1 4-葡聚糖内切酶 定向进化 易错PCR 
基于易错PCR的β-甘露聚糖酶体外分子定向进化研究被引量：3
《轻工学报》2020年第4期8-15,共8页胡海艳 甘祥武 黄秀敏 叶俊豪 谢万勇 
广州市科技计划项目(201710010154)。
采用易错PCR方法,对β-甘露聚糖酶进行体外分子定向进化,通过调整dNTP比例和加入不同浓度的Mn2+,向β-甘露聚糖酶中随机引入突变,构建突变文库,并对筛选得到的突变菌株的突变酶酶学性质进行研究.结果表明:在突变文库的构建过程中,当Mn2...
关键词：Β-甘露聚糖酶 易错PCR 定向进化 
转座酶Tn3体外定向进化和酶活力提高方法的建立
《中国畜牧兽医》2020年第4期984-991,共8页宋尚桥 马围围 李晓剑 曾素先 李鑫 严瑾 孙翠翠 黎宗强 
广西壮族自治区科技计划项目-重点研发计划(桂科AB16380072)。
试验旨在对转座酶Tn3的酶活力提高和进化进行初步探索。采用PCR扩增、限制性酶切、DNA连接、重组质粒的转化、易错PCR的优化及构建、D值的测定、酶切鉴定方法对转座酶Tn3进行体外定向进化研究。结果表明,用SacⅠ和XbaⅠ对重组质粒进行酶...
关键词：Tn3 易错PCR DNA重排 定向进化 酶切产物 基因序列 
甲壳素酶Chisb的定向进化及生物转化合成几丁寡糖被引量：4
《生物工程学报》2019年第9期1787-1796,共10页潘梦妍 徐显皓 刘延峰 李江华 吕雪芹 堵国成 刘龙 
国家自然科学基金(Nos.31622001,21808084)资助~~
甲壳素酶具有广泛的工业应用前景,如可将虾壳、蟹壳和其他甲壳废物降解成以几丁寡糖为主的高附加值产品,但野生型甲壳素酶催化效率低,大大限制了几丁寡糖的生产。笔者在前期研究中表达了一个具有较高效催化效率的甲壳素酶Chisb,并对其...
关键词：甲壳素酶Chisb 几丁寡糖 催化效率 易错PCR 定向进化 
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