易错PCR

作品数：113被引量：249H指数：8
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易错PCR技术改造β-环糊精葡萄糖基转移酶的催化特性被引量：4
《现代食品科技》2023年第5期25-31,共7页郑婉 刘振杨 郑金珠 武国干 吴华伟 
国家自然科学基金项目(21576110);江苏省益生制剂重点建设实验室开放课题(JSYSZJ2017001)。
β-环糊精是一种环状多糖,可用于改变某些大分子化合物的理化性质,在食品、生物及医药等领域都具有很高的工业应用前景。通过利用β-环糊精葡萄糖基转移酶(β-CGTase),使其作用于淀粉等含有葡萄糖基的多糖化合物,可转化生成β-环糊精。...
关键词：Paenibacillus campinasensis β-CGTase 定向进化 易错PCR 酶学性质 
基于易错PCR的β-甘露聚糖酶体外分子定向进化研究被引量：3
《轻工学报》2020年第4期8-15,共8页胡海艳 甘祥武 黄秀敏 叶俊豪 谢万勇 
广州市科技计划项目(201710010154)。
采用易错PCR方法,对β-甘露聚糖酶进行体外分子定向进化,通过调整dNTP比例和加入不同浓度的Mn2+,向β-甘露聚糖酶中随机引入突变,构建突变文库,并对筛选得到的突变菌株的突变酶酶学性质进行研究.结果表明:在突变文库的构建过程中,当Mn2...
关键词：Β-甘露聚糖酶 易错PCR 定向进化 
微小毛霉凝乳酶蛋白质工程改造研究被引量：2
《江苏调味副食品》2019年第1期31-33,共3页王兴吉 贾仁洁 张志来 刘文龙 
山东省科技创新项目(201510515007)
微小毛霉凝乳酶(MPC)是微生物凝乳酶的主要来源之一。本研究将微小毛霉凝乳酶基因克隆到表达载体pET30a中并转化宿主BL21(DE3),使微小毛霉凝乳酶蛋白在大肠杆菌中表达。通过易错PCR技术对MPC进行随机突变建库,从中筛选出两株具有优良蛋...
关键词：微小毛霉 凝乳酶 克隆 易错PCR 蛋白质 
基于定向进化的烷基间苯二酚合酶改造被引量：1
《发酵科技通讯》2018年第4期204-208,共5页包莹玲 赵威棣 吕旭浩 周靖阳 祝衢鑫 李忠 陈小龙 
浙江省自然科学基金资助项目(LQ14C010001)
烷基间苯二酚合酶(ARS)属于研究蛋白结构与功能关系的模式分子——Ⅲ型聚酮合酶家族,其产物烷基间苯二酚是一种具有极其重要生物学功能活性的物质。为进一步提高ARS的酶活性,研究在成功实现ARS在大肠杆菌中进行温控自裂解异源表达的基础...
关键词：烷基间苯二酚合酶 分子改造 易错PCR 定点随机突变 酶学性质 
利用易错PCR构建酱油酿造用T酵母spt15突变库被引量：2
《食品科学》2018年第14期106-111,共6页赵秀丽 张毓秀 孙月芹 侯丽华 
国家自然科学基金面上项目(31371819);天津市科技支撑重点项目(17YFZCNC00460);天津科技大学新农村发展研究院开放基金资助项目(xnc201604);天津市高等学校创新团队培养计划资助项目(TD13-5013)
为得到酱油酿造优良性状的微生物,对酱油酿造用T酵母进行研究。首先利用易错聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术构建spt15(可编码TATA结合蛋白)的突变基因库,然后重组于表达载体YEplac195中,并导入尿嘧啶营养缺陷型菌株...
关键词：易错PCR spt15 基因突变库 筛菌 酱油发酵 
一株耐高乙醇和低pH己酸产生菌Lysinibacillus fusiformis-pBE_3-ep-SigB的构建被引量：3
《中国酿造》2018年第5期162-168,共7页薛正楷 杨根庆 张宿义 倪斌 
四川省科技支撑计划项目(NO.2014FZ0018);四川省教育厅理工重点项目(18ZA0250);泸州市科学技术和知识产权局社会发展重点项目(2017-S-45(3/3))
以Lysinibacillus fusiformis为出发菌,分别转染Sig A和Sig B突变基因,获得耐高乙醇和低p H胁迫的优良己酸产生菌。以p ET32a(+)-Sig A/Sig B为模板,采用均匀试验优化Sig A/Sig B易错聚合酶链式反应(ep PCR)扩增体系中的Mn^(2+)和Mg^(2+...
关键词：SigA基因 SigB基因 易错PCR 高抗性 产己酸菌 
氨糖合酶的定向改造及其在氨糖生物合成中的应用被引量：1
《基因组学与应用生物学》2018年第4期1511-1518,共8页杨彪 龚劲松 丁振中 李恒 窦文芳 许正宏 史劲松 
江苏省产学研合作前瞻性联合研究项目(BY2016022-19);江苏省科技成果转化专项(BA2015006)共同资助
本研究采用基因工程手段克隆表达和定向改造氨糖合酶GLS,并通过共表达氨糖乙酰化酶GNAL进一步增强宿主菌氨糖产生能力。首先通过不同表达质粒和宿主的优化筛选出最优GLS表达体系,成功构建获得E.coli Rosetta-gami（DE3）-p ET-24a-GLS...
关键词：氨糖 乙酰氨糖 氨糖合酶 易错PCR 重组表达 
大肠杆菌中顺式-3-羟脯氨酸羟化酶的定向改造被引量：1
《食品与发酵工业》2017年第1期7-11,共5页黄建华 王晓姣 魏照辉 张震宇 孙付保 
国家自然科学基金(30970058);国家自然科学基金(21176106);江苏省自然科学基金(BK2012554)
对以L-脯氨酸为底物,产顺式-3-羟脯氨酸(cis-3-hydroxyproline,H3P)的羟化酶基因进行定向改造。从重组菌E.coli BL21(DE3)/p ET21a-ptrp2-H3P出发,通过易错PCR随机突变和定点突变处理,利用多孔板和创建的简易显色法相结合的高通量方法...
关键词：重组大肠杆菌 易错PCR 顺式-3-羟脯氨酸(cis-3-hydroxyproline H3P) 脯氨酸-3-羟化酶 定向改造 
枯草芽孢杆菌脂肪酶基因lipaseA突变文库构建及其生物柴油转酯研究被引量：2
《浙江农业学报》2016年第5期864-869,共6页李璟 童晋 罗明银 黎宸位 鲜洁 
四川省教育厅科研项目(SZS013)
采用易错PCR方法对枯草芽孢杆菌脂肪酶基因lipase A进行定向进化,并首次采用对硝基苯棕榈酸酯(p NPP)法进行96孔板高通量筛选。结果表明:第一轮易错PCR没有产生随机突变,第二轮易错PCR反应在Mn^(2+)浓度为0.2 mmol·L^(-1)时,产生了突...
关键词：枯草芽孢杆菌 脂肪酶 易错PCR 对硝基苯棕榈酸酯 转酯效率 
基于易错PCR技术的红酵母D-氨基酸氧化酶的定向进化被引量：1
《工业微生物》2014年第4期52-58,共7页孙晨 肖慈英 郭美锦 储炬 张嗣良 
采用易错PCR技术对来源于红酵母Rhodotorula gracilis的D-氨基酸氧化酶基因(RgDAAO)进行突变,构建并优化了突变株文库;结合48深孔板的高通量筛选方法,获得突变株M3217,其V_(max)相对于野生型提高了16.8%。对测序结果进行分析,发现突变...
关键词：易错PCR 定向进化 高通量筛选 红酵母D-氨基酸氧化酶 
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