易错PCR

作品数：113被引量：249H指数：8
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转座酶Tn3体外定向进化和酶活力提高方法的建立
《中国畜牧兽医》2020年第4期984-991,共8页宋尚桥 马围围 李晓剑 曾素先 李鑫 严瑾 孙翠翠 黎宗强 
广西壮族自治区科技计划项目-重点研发计划(桂科AB16380072)。
试验旨在对转座酶Tn3的酶活力提高和进化进行初步探索。采用PCR扩增、限制性酶切、DNA连接、重组质粒的转化、易错PCR的优化及构建、D值的测定、酶切鉴定方法对转座酶Tn3进行体外定向进化研究。结果表明,用SacⅠ和XbaⅠ对重组质粒进行酶...
关键词：Tn3 易错PCR DNA重排 定向进化 酶切产物 基因序列 
Cry1Ab13杀虫基因的PCR诱变及功能验证被引量：1
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》2018年第5期141-148,共8页闫鸽 宋阳 张宇婷 张卓 代力强 王丕武 
国家转基因生物新品种培育重大专项(2016ZX08004-004)
【目的】通过易错PCR技术克隆一种新的Cry1Ab13基因,以利用Cry类Bt基因提高作物抗虫性,丰富基因资源。【方法】利用易错PCR技术对苏云金芽孢杆菌Cry1Ab13基因进行随机诱变,构建突变体文库,筛选获得突变株Cry1Ab13-1,将该基因构建原核重...
关键词：易错PCR Cry1Ab13基因 原核表达 玉米螟 小菜蛾 
蛋白质定向进化技术概述被引量：1
《中国饲料》2017年第14期15-19,23,共6页王松明 顾招兵 朱雅新 冷静 冯励 李清 杨舒黎 
国家自然科学基金(31360562;31160467;30960256;31260543)
定向进化技术是近二十年发展起来的蛋白质改造技术,其可通过对基因的突变和重组来构建突变库,然后通过高通量的筛选鉴定性能改善的突变体,此技术是改善酶性能最有效的途径之一。本文就定向进化技术的几种常用方法和定向进化后的文库筛...
关键词：定向进化 易错PCR DNA改组 定向筛选 
易错PCR技术提高枯草芽孢杆菌α-淀粉酶活性研究被引量：1
《饲料研究》2014年第19期78-81,86,共5页马全磊 沈思军 代蓉 闫云峰 潘晓亮 
863计划(2011AA100307-06);国家支撑计划(2011BAD28B05-1);国家自然科学基金(310001002;31360540);石河子大学重大科技攻关计划项目(gxjs2012-zdgg05-02)
探索易错PCR的反应体系最佳条件,利用易错PCR技术对枯草芽孢杆菌jy1的淀粉酶基因amy 1进行定向进化研究。突变基因重组于表达载体pET32a中,并导入大肠杆菌BL21构建突变体文库,经选择性培养基筛选获得2株有益突变菌株pET32a-amya和pET32a...
关键词：易错PCR 枯草芽孢杆菌 Α-淀粉酶活性 
重组β-葡萄糖醛酸苷酶转化甘草酸的定向性改造被引量：1
《石河子大学学报（自然科学版）》2013年第5期640-644,共5页矫丽媛 吕波 王金娜 李春 
国家自然科学基金项目(21176028)
为提高重组β-葡萄糖醛酸苷酶的底物特异性,通过易错PCR方法对其进行突变并构建突变体文库,利用薄层层析和高效液相色谱对突变文库进行筛选,获得了突变株PGUS(M51)-E,其底物特异性提高了41%。突变酶的酶学特性研究发现,该突变酶的最适p...
关键词：Β-葡萄糖醛酸苷酶 易错PCR 甘草酸 底物特异性 
分子定向进化研究进展被引量：1
《湖南农业科学》2013年第7期12-15,共4页袁卫生 刘红全 林小园 
国家自然科学基金项目(30960215)
分子定向进化作为近几年发展起来的一种蛋白质改造新策略,由编码基因的随机突变、重组和定向筛选构成。在不了解蛋白的三维结构信息和功能机制的情况下,利用这一技术调整目标蛋白的性质,如专一性、催化活性及亲和力等。近年来在易错PCR...
关键词：定向进化 易错PCR DNA改组 筛选 
甲基对硫磷水解酶的随机突变和分子对接模拟
《华中农业大学学报》2012年第3期325-331,共7页李亚楠 张彦博 胡美英 陈少华 胡振 易欣 林惠花 
国家自然科学基金项目(30871660);广东省博士启动基金项目(9451064201003679)
甲基对硫磷水解酶(MPH)能高效降解甲基对硫磷,并能够降解杀螟松、乙基对硫磷和毒死蜱,但降解效率依次降低。为提高MPH对毒死蜱的降解活性,采用易错PCR的方法对MPH进行随机突变,筛选到2株突变体A291V和K173R,并对其进行原核表达,结果表明...
关键词：甲基对硫磷水解酶 毒死蜱 随机突变 易错PCR 同源建模 分子对接 
大豆过氧化物酶基因随机突变文库的构建被引量：2
《大豆科学》2011年第5期731-737,共7页曾家豫 郑群 廖世奇 王黎 袁红霞 杨海棠 张丽琼 张宁 
甘肃省教育厅资助项目(0601-28,0501B-16);甘肃省自然科学基金资助项目(096RJZA035);甘肃省高分子材料重点实验室开放课题资助项目(KF-06-01)
为提高大豆过氧化物酶(soybean peroxidase,SBP)的活性及研究该酶一级结构与酶活性间的关系,采用连续易错PCR方法对大豆过氧化物酶基因(sbp)进行了2轮随机突变,将第二轮易错PCR产物与质粒载体pPICZα-A分别进行双酶切,经T4DNA连接酶催...
关键词：大豆过氧化物酶 易错PCR 基因文库 随机突变 酶定向进化 
基于易错PCR技术的中性内切葡聚糖酶基因的定向进化被引量：7
《农业生物技术学报》2011年第6期1136-1143,共8页姚友旭 李雨霏 侯晟琦 李春梅 陈惠 廖燕 
四川省科技支撑计划(No.2008GZ0150)资助
纤维素酶的工业应用一直受酶活性低,成本高的限制,为了提高中性内切葡聚糖酶的活性,本研究利用易错PCR技术对来自枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)C-36的内切葡聚糖酶基因进行定向进化研究,在酶分子水平上改造内切葡聚糖酶分子。实验获...
关键词：枯草芽胞杆菌 内切葡聚糖酶 定向进化 产酶条件 
易错PCR技术提高黑曲霉N25植酸酶活力的研究被引量：6
《生物技术通报》2010年第10期226-230,共5页冯慧玲 李春梅 吴振芳 陈惠 
国家自然科学基金(30671530)
利用易错PCR技术对黑曲霉(Aspergillus niger)N25的植酸酶基因phyA进行定向进化研究,突变基因产物重组于表达载体pET32a(+)中,并导入大肠杆菌BL21(DE3)构建突变体文库,经筛选获得了最佳突变菌株pET32a-phyAep,其植酸酶活力比出发酶提高...
关键词：植酸酶 定向进化 易错PCR 酶活力 
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