王聃

作品数：12被引量：29H指数：3
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供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
发文主题：胸膜肺炎放线杆菌牛分枝杆菌VNTRSPOLIGOTYPING基因分型更多>>
发文领域：农业科学生物学更多>>
发文期刊：《东北农业大学学报》《畜牧兽医科技信息》《黑龙江畜牧兽医》《中国兽医科学》更多>>
所获基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家重点基础研究发展计划黑龙江省科技厅青年科学基金黑龙江省博士后基金更多>>
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利用Red重组系统敲除大肠杆菌菌株ClpP基因方法的研究被引量：1
《黑龙江畜牧兽医》2011年第8期28-30,共3页司微 刘慧芳 王春来 彭玮 赫明雷 杜艳芬 赵海玲 王聃 杨金国 林靖凯 倪洪波 刘思国 
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2008-14)
为了研究ClpP基因的功能,试验利用Red系统的重组功能,通过PCR扩增出两端与大肠杆菌菌株ClpP基因上、下游序列同源,中间为氯霉素抗性基因cat的DNA片段,电击转化含质粒pKD46的大肠杆菌菌株DH091,筛选替换ClpP基因的阳性转化子,再导入质粒p...
关键词：RED重组系统 ClpP基因 基因敲除 
放线杆菌外膜蛋白酵母双杂交诱饵质粒的构建及自激活与毒性检测被引量：1
《中国兽医科学》2010年第6期561-564,共4页倪宏波 刘思国 杜艳芬 林靖凯 刘慧芳 王春来 司薇 常月红 彭玮 王聃 赫明雷 
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2008-14)
为了筛选胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白在肺泡上皮细胞上的作用受体,应用酵母双杂交技术构建诱饵质粒载体pGBKT7-omp(胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白),从胸膜肺炎放线杆菌提取基因组DNA,用PCR方法获得omp,克隆于pGBKT7载体上,进行酶切鉴定及序列...
关键词：胸膜肺炎放线杆菌 外膜蛋白 诱饵质粒 自激活作用 毒性作用 
抗牛γ-干扰素特异性单克隆抗体的制备被引量：2
《黑龙江畜牧兽医》2010年第1期101-102,共2页林靖凯 赵海玲 杜艳芬 王春来 刘慧芳 司微 王聃 刘思国 李广兴 
"973"国家重点基础研究计划项目(2006CB504400)
关键词：牛γ-干扰素 蛋白免疫 单克隆抗体 
哈尔滨市鲜肉中单核细胞增生性李斯特菌的分离鉴定及耐药性分析被引量：4
《中国预防兽医学报》2009年第12期929-932,共4页尹录 杜艳芬 赫明雷 司微 刘慧芳 王春来 彭玮 王聃 李继昌 邵美丽 刘思国 
黑龙江省科技厅青年基金(QC08C100);东北农业大学博士启动基金;农业部公益行业科研专项(200803054);黑龙江省博士后基金(LBH-Z07015)
为了解哈尔滨市单核细胞增生性李斯特菌(Lm)的污染状况及耐药状况。在哈尔滨市市场随机采集158份鲜肉样品,采用显色培养基分离,API试剂条和PCR鉴定等方法对样品中的Lm进行分离鉴定,并通过Kirby-Barer法测定分离菌株对24种抗生素的耐药...
关键词：哈尔滨 鲜肉 单核细胞增生性李斯特菌 分离鉴定 耐药性 
大肠杆菌“菌影”的制备被引量：3
《东北农业大学学报》2009年第6期85-88,共4页彭玮 王聃 刘思国 常月红 王春来 刘慧芳 司薇 赫明雷 杜艳芬 
国家高技术研究发展计划(2006AA10A206)
通过PCR扩增噬菌体PhiX174的裂解基因E,将该基因连接到含有PR/cI启动阻遏系统的pBV220载体中,从而使裂解基因E和启动阻遏系统λPL/PR-cI857串联成为温度敏感的裂解盒,构建溶菌质粒pBV-E。采用CaCl2法将其转入大肠杆菌BL21(DE3),含有裂...
关键词：大肠杆菌 菌影 裂解基因E 
胎儿弯杆菌表面蛋白SapA抗原单克隆抗体的制备
《中国预防兽医学报》2009年第5期409-411,共3页赵海玲 林靖凯 杜艳芬 刘慧芳 司微 王春来 王聃 赫明雷 彭玮 杨金国 刘思国 
国家“十一五”科技支撑计划项目(2007BAD40B01)
用原核表达的重组胎儿弯杆菌毒力因子表面蛋白(rSapA-N)免疫小鼠,采用细胞融合技术,共获得2株抗rSapA-N的单克隆抗体(MAb),经Ig亚类鉴定,均为IgG1,轻链为κ链;Western blot证实这2株MAb均能与rSapA-N发生特异性反应,而与其它蛋白则不发...
关键词：胎儿弯杆菌表面蛋白SapA 免疫 单克隆抗体 
禽分枝杆菌副结核亚种重组蛋白r22-ag85B的表达及纯化被引量：2
《中国动物传染病学报》2009年第2期59-62,共4页杨金国 王聃 刘慧芳 杜艳芬 司微 赵海玲 林靖凯 王春来 倪红波 赫明雷 彭玮 赵福广 刘思国 
为表达并纯化禽分枝杆菌副结核亚种主要抗原基因的串联重组蛋白r22-ag85B,期望研制出一种新型副结核病疫苗,以禽分枝杆菌副结核亚种参考株P18的基因组DNA为模板,扩增了22KD基因和ag85B基因。采用重叠延伸剪接PCR技术(SOE-PCR)获得了融...
关键词：禽分枝杆菌副结核亚种 22KD基因 ag85B基因 重叠延伸剪接技术 重组表达 
牛分枝杆菌分枝菌酸环丙烷合酶PCAA的表达与鉴定
《畜牧兽医科技信息》2009年第4期39-40,共2页王聃 刘建东 刘思国 王春来 刘慧芳 宫强 王勇 
以牛分枝杆菌Vallee株基因组为模板,利用PCR方法扩增该菌株的环丙烷-分枝菌酸合酶pcaA基因,并克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,通过大肠杆菌BL21(DE3)表达重组融合蛋白,并利用Ni-亲和层析的方法纯化出重组蛋白。通过鉴定其免疫活性。试...
关键词：牛分枝杆菌 持续感染 pcaA基因 
牛分枝杆菌Spoligotyping和VNTR-MIRU的基因分型研究被引量：1
《中国预防兽医学报》2009年第2期114-116,126,共4页杜艳芬 林靖凯 刘思国 王春来 刘慧芳 司微 王聃 赵海玲 
973项目(2006CB504400)
为了探讨间隔区寡核苷酸分型(Spoligotyping)和数目可变串联重复序列-结核分枝杆菌散在分布重复单元(VNTR-MIRU)基因分型法用于国内牛分枝杆菌的基因分型研究,初步了解我国牛分枝杆菌基因型种类、分布以及2种方法在我国应用的可行性。...
关键词：牛分枝杆菌 SPOLIGOTYPING VNTR MIRU 基因分型 
猪胸膜肺炎放线杆菌血清1型信号标签诱导突变体库的构建
《中国动物传染病学报》2009年第1期38-44,共7页赫明雷 刘慧芳 刘思国 司薇 王春来 杨金国 杜艳芬 王聃 
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所中央级公益性科研院所基本科研业务专项资金项目(2008-14)资助
本研究以自杀性质粒pUT携带含有信号标签的Mini-Tn5转座子对猪胸膜肺炎放线杆菌血清1型菌进行转座诱变,构建了带有12对特异性信号标签的Mini-Tn5转座子的pUT自杀质粒,转化到供体菌E.coliβ2155后,利用双亲本滤膜杂交法与受体猪胸膜肺炎...
关键词：胸膜肺炎放线杆菌 转座子 信号标签 
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