刘慧芳

作品数：29被引量：98H指数：6
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供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
发文主题：胸膜肺炎放线杆菌牛分枝杆菌原核表达基因纯化更多>>
发文领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
发文期刊：《东北农业大学学报》《畜牧兽医科技信息》《畜牧兽医学报》《黑龙江畜牧兽医》更多>>
所获基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家重点基础研究发展计划国家科技支撑计划公益性行业(农业)科研专项更多>>
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鸡肠炎沙门氏菌转座突变体库的构建及减毒菌株的筛选
《中国预防兽医学报》2013年第3期210-213,共4页吕爽 朱婷 王秀梅 刘慧芳 司微 于申业 陈利苹 刘思国 
国家高技术研究发展计划(863)项目(2011AA10A210)
为筛选减毒肠炎沙门氏菌(S.enteritidis)菌株,本研究以含有Mini-Tn5转座子的重组自杀质粒pUT对S.enteritidis SM6株进行转座诱变,利用双亲本滤膜杂交方法与供体菌E.coliβ2155进行接合转移,构建并优化接合转移体系,利用卡那抗性和DAP营...
关键词：肠炎沙门氏菌 转座子 突变体库 减毒菌株 
牛分枝杆菌与鸟型分枝杆菌2型重组蛋白Ag85b的血清学交叉反应研究
《中国预防兽医学报》2012年第3期223-226,共4页朱婷 王华南 刘慧芳 于申业 王秀梅 陈莉苹 司微 赵海玲 刘思国 
国家重点基础研究发展计划(973)项目(2012CB518801);国家科技基础性工作专项(2008FY210200)
牛分枝杆菌(M.bovis)是引起牛结核病的常见病原,而鸟分枝杆菌(M.avium)2型则通常交叉感染牛,但不会导致严重的病变。为鉴定M.bovis和M.avium的免疫交叉反应情况,本研究分别以M.bovis和M.avium2型的基因组为模板,扩增ag85b基因,分别构建...
关键词：牛结核分枝杆菌 鸟型分枝杆菌 ag85b基因 交叉反应 
结核分枝杆菌pdhA基因的原核表达及其免疫原性分析被引量：6
《中国兽医科学》2011年第7期697-700,共4页王华南 亓英芳 朱婷 于申业 刘慧芳 司微 杨盛 王加明 冯拥军 李素兰 于秀婷 王春来 刘思国 
国家重点基础研究发展计划(973)项目(2006CB504400);国家科技基础性工作专项(2008FY210200);中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(ZGKJ201015)
以结核分枝杆菌H37Rv菌株的基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增出1 100bp的pdhA(pyruvate dehydrogenase E1component alpha subunit)基因,经限制性酶切后,与pET-28a载体连接,转化到大肠杆菌BL21中,重组菌经1mmol/L IPTG诱导表达了pdhA蛋...
关键词：结核分枝杆菌 pdhA基因 原核表达 
利用Red重组系统敲除大肠杆菌菌株ClpP基因方法的研究被引量：1
《黑龙江畜牧兽医》2011年第8期28-30,共3页司微 刘慧芳 王春来 彭玮 赫明雷 杜艳芬 赵海玲 王聃 杨金国 林靖凯 倪洪波 刘思国 
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2008-14)
为了研究ClpP基因的功能,试验利用Red系统的重组功能,通过PCR扩增出两端与大肠杆菌菌株ClpP基因上、下游序列同源,中间为氯霉素抗性基因cat的DNA片段,电击转化含质粒pKD46的大肠杆菌菌株DH091,筛选替换ClpP基因的阳性转化子,再导入质粒p...
关键词：RED重组系统 ClpP基因 基因敲除 
副猪嗜血杆菌菌影的制备被引量：9
《中国预防兽医学报》2011年第1期11-14,共4页胡明明 常月红 张艳禾 司薇 谢芳 于申业 刘慧芳 刘思国 沈楠 王春来 
国家重点实验室基本科研业务费(NKLVBP200822)
为研制副猪嗜血杆菌(H.parasuis)菌影疫苗,本实验通过PCR扩增噬菌体PhiX174的裂解基因E,将其连接到含有λPL/PR-cI857启动阻遏系统的pBV220载体中,使裂解基因E与λPL/PR-cI857串联成为温度敏感的裂解盒,构建重组质粒pBV-E。并将含有E基...
关键词：副猪嗜血杆菌 菌影 裂解基因 
结核分枝杆菌csdA基因的原核表达及其免疫原性
《中国兽医科学》2010年第12期1232-1235,共4页王华南 亓英芳 杜艳芬 刘慧芳 司微 于申业 王加明 杨盛 李素兰 冯拥军 倪洪波 王春来 刘思国 
国家重点基础研究发展计划(973)项目(2006CB504400);国家科技基础性工作专项项目(2008FY210200)
以结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA为模板,采用PCR方法扩增出1 690 bp的csdA(cold-shock dead-box protein A)基因,经限制性酶切后,与pET28a载体连接,转化到大肠杆菌BL21中后,重组菌经0.2 mmol/L IPTG诱导表达了csdA蛋白及Ni-His-resin纯化...
关键词：结核分枝杆菌 csdA基因 原核表达 
禽致病性大肠杆菌生物被膜的形成及其影响因素被引量：16
《中国预防兽医学报》2010年第9期672-676,共5页欧阳凤菊 李兆利 赫明雷 刘慧芳 司微 刘思国 王春来 倪洪波 王宇 曲娟娟 
兽医生物技术国家重点实验室开放基金项目(SKLVBF2008);农业部公益行业科研专项(200803054)
为确定影响细菌生物被膜(BF)的形成条件,本研究采用BF体外定性观察和定量粘附性检测两种方法对1株野生禽致病性大肠杆菌(E.coli)在不同环境(培养时间、培养基类型、引导载体类型、营养条件)下产生BF的差异进行了研究。结果显示野生禽致...
关键词：禽致病性大肠杆菌 生物被膜 细菌粘附性 
放线杆菌外膜蛋白酵母双杂交诱饵质粒的构建及自激活与毒性检测被引量：1
《中国兽医科学》2010年第6期561-564,共4页倪宏波 刘思国 杜艳芬 林靖凯 刘慧芳 王春来 司薇 常月红 彭玮 王聃 赫明雷 
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2008-14)
为了筛选胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白在肺泡上皮细胞上的作用受体,应用酵母双杂交技术构建诱饵质粒载体pGBKT7-omp(胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白),从胸膜肺炎放线杆菌提取基因组DNA,用PCR方法获得omp,克隆于pGBKT7载体上,进行酶切鉴定及序列...
关键词：胸膜肺炎放线杆菌 外膜蛋白 诱饵质粒 自激活作用 毒性作用 
抗牛γ-干扰素特异性单克隆抗体的制备被引量：2
《黑龙江畜牧兽医》2010年第1期101-102,共2页林靖凯 赵海玲 杜艳芬 王春来 刘慧芳 司微 王聃 刘思国 李广兴 
"973"国家重点基础研究计划项目(2006CB504400)
关键词：牛γ-干扰素 蛋白免疫 单克隆抗体 
哈尔滨市鲜肉中单核细胞增生性李斯特菌的分离鉴定及耐药性分析被引量：4
《中国预防兽医学报》2009年第12期929-932,共4页尹录 杜艳芬 赫明雷 司微 刘慧芳 王春来 彭玮 王聃 李继昌 邵美丽 刘思国 
黑龙江省科技厅青年基金(QC08C100);东北农业大学博士启动基金;农业部公益行业科研专项(200803054);黑龙江省博士后基金(LBH-Z07015)
为了解哈尔滨市单核细胞增生性李斯特菌(Lm)的污染状况及耐药状况。在哈尔滨市市场随机采集158份鲜肉样品,采用显色培养基分离,API试剂条和PCR鉴定等方法对样品中的Lm进行分离鉴定,并通过Kirby-Barer法测定分离菌株对24种抗生素的耐药...
关键词：哈尔滨 鲜肉 单核细胞增生性李斯特菌 分离鉴定 耐药性 
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