沈海燕

作品数：9被引量：40H指数：3
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供职机构：广东省农业科学院动物卫生研究所更多>>
发文主题：PCR检测方法荧光定量RNA干扰载体RNA干扰P53基因表达更多>>
发文领域：农业科学生物学更多>>
发文期刊：《中国预防兽医学报》《动物医学进展》《中国兽医科学》《中国兽医学报》更多>>
所获基金：广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目广东省农科院院长基金更多>>
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鸭坦布苏病毒、产蛋下降综合征病毒和H9亚型禽流感病毒三重荧光定量PCR检测方法的建立被引量：4
《广东畜牧兽医科技》2017年第4期37-42,共6页孙敏华 李林林 董嘉文 刘志成 孙俊颖 沈海燕 张建峰 张春红 
广东省科技计划项目(2013B020307001,2013B020315005,2014A040401048,2015B020203003,2015B050501007,2015B070701015);广东省农业科学院院长基金项目(201412)
参考Gen Bank上已发表的产蛋下降综合征病毒(EDSV)五邻体(penton)基因序列、H9亚型禽流感病毒的HA基因和鸭坦布苏病毒(DTMUV)E基因序列,分别设计了检测EDSV、H9 AIV和DTMUV的特异性引物,扩增目的片段大小分别为110bp、281bp和266bp。通...
关键词：鸭坦布苏病毒 产蛋下降综合征病毒 H9亚型禽流感病毒 三重荧光PCR 
H7N9亚型禽流感病毒HRM检测方法的建立被引量：3
《中国兽医科学》2016年第11期1388-1393,共6页刘志成 贾伟新 孙敏华 沈海燕 孙俊颖 殷三鸿 钟亮宁 张建峰 张春红 
国家科技部科研计划项目(YS2016YFNC020088;2014DFA31730);广东省科技计划项目(2013B020224004;2015B0-50501007;2015B070701015;2014A040401048);广东省农业厅专项项目(粤农函[2014]1046号);广州市科技计划项目(201508020055);东莞市科技计划项目(2014108101041)
根据H 7N 9亚型禽流感病毒(AIV)的HA和NA基因保守区域,分别设计了2对特异性引物,通过优化反应条件,建立了基于高分辨率熔解曲线(HRM)分析的H7N9亚型AIV检测方法。结果显示,该方法特异性强,其他常见禽源病毒及非H7亚型和非N9亚型的AIV不...
关键词：禽流感 H7N9 高分辨率熔解曲线 
RNA干扰抑制ST细胞Ⅰ型干扰素受体-2表达的研究
《动物医学进展》2016年第9期48-52,共5页沈海燕 张春红 刘志成 孙俊颖 卢宇 张建峰 
国家自然科学青年基金项目(31302101);国家国际科技合作专项(2014DFA31730);广东省科技计划项目(2015B070701015;2016B020212007;2016A040403085;2014B070706011;2014A010107022;2015A020209081;2013B010102012);公益性行业(农业)科研专项(201303046)
应用RNA干扰技术建立猪睾丸(ST)细胞Ⅰ型干扰素受体-2(IFNAR-2)基因knock down模型。采用FuGENE HD转染剂将pSiCMVE1、pSiCMVE2和pSiCMVE3干扰载体分别转染ST细胞,经荧光定量PCR和Western blot分别检测IFNAR2mRNA和蛋白水平表达变化。...
关键词：RNA干扰 ST细胞 Ⅰ型干扰素受体-2 
p53基因RNA干扰载体的构建及其在ST细胞系中的稳定表达
《中国兽医科学》2016年第8期979-985,共7页沈海燕 张春红 刘志成 孙俊颖 卢宇 张建峰 
国家自然科学基金青年基金项目(31302101);国家国际科技合作专项(2014DFA31730);广东省科技计划项目(2014B070706011;2014A010107022;2015A020209081;2013B010102012);公益性行业(农业)科研专项(201303046)
利用质粒介导的RNA干扰技术,建立稳定沉默p53基因的ST细胞系。通过改造p EGFP-C1载体,构建了猪源U6启动子启动编码p53 sh RNA序列的载体,将其转染ST细胞,用G418筛选细胞,并分析获得细胞的生长特性。RT-PCR和Western-blot结果显示,质粒...
关键词：P53基因 sh RNA载体 RNA干扰 细胞系 
鸡毒支原体SYBR Green I荧光定量PCR检测方法的建立被引量：6
《中国预防兽医学报》2015年第12期938-942,共5页孙俊颖 刘志成 孙敏华 李冰玲 沈海燕 张春红 董嘉文 李林林 张建峰 
国际科技合作项目(2014DFA31730;2012B050500013;2013J4500031);国家自然科学基金(31302101);广东省科技计划项目(2014A040401048)
为建立鸡毒支原体(MG)的快速定量检测方法,本研究根据GenBank中登录的MG 16S rDNA基因序列设计了一对引物,以MG基因组DNA为模板扩增其16S rDNA基因片段,并克隆于pMD18-T载体中,以纯化的重组质粒作为标准品建立了MG SYBR GreenⅠ荧光定量...
关键词：鸡毒支原体 SYBR Green I 荧光定量PCR 
鸡贫血病毒广州株VP3和VP1基因的克隆与序列分析
《广东畜牧兽医科技》2015年第2期25-28,共4页沈海燕 张建峰 刘志成 周恒 郭翠丽 郭鹏举 张春红 
国家科技计划项目(2014DFA31730);广东省科技计划项目(2011B050700007;2012B050500013);广东省农业科学院院长基金(201114)
采用PCR方法成功克隆了3株鸡贫血病病毒（CAr）广州株VP3和VPl的部分基因，并进行了核苷酸序列测定。序列分析表明，3株CAV广州株与国内外其他21株CAV毒株的核苷酸序列相似性在89．5％-100．0％之间；推导氨基酸序列的相似性在84．8％-9...
关键词：鸡贫血病病毒 核苷酸序列 分子进化树 
重组猪IFN-λ3原核表达及其活性分析被引量：2
《中国兽医学报》2015年第1期86-90,共5页周恒 沈海燕 郭鹏举 张春红 张建峰 刘志成 孙俊颖 李玉谷 
国家自然科学基金资助项目(31302101);广东省农业科学院院长基金资助项目(201213);广东省农业科学院兽医研究所所长基金资助项目(2011SZJJ007);广东省科技计划资助项目(2011B050700007;2012A020602094)
应用RT-PCR技术从多聚肌苷酸多聚胞苷酸(poly(I∶C))刺激的ST细胞中扩增猪干扰素-λ3(PoIFN-λ3)基因。基因序列分析表明,PoIFN-λ3基因全长为588bp,与绵羊IFN-λ3基因(XM_004015683)的同源性最高(87.6%);分子遗传进化树分析表明猪IFN-...
关键词：猪IFN-λ3 原核表达 抗病毒活性 
上海市零售禽肉制品和活禽中沙门氏菌血清型与耐药性研究被引量：22
《中国畜牧兽医》2014年第11期263-266,共4页沈海燕 郭慧霞 许学斌 周恒 刘志成 张春红 
国家自然科学基金青年基金(31302101);广东省科技计划项目-星火计划(2012A020602094);广东省科技计划项目-国际合作项目(2011B050700007)
为掌握上海市沙门氏菌在农贸市场和超市禽肉制品和活禽中的污染状况、流行血清型和耐药情况,本试验从320份2012年采集的禽肉样本(240份)和活禽泄殖腔棉试子(80份)中共分离鉴定出沙门氏菌70株,阳性率为21.9%。血清型鉴定结果表明,共鉴定...
关键词：沙门氏菌 血清型 耐药性 
猪圆环病毒2型广东分离株ORF2基因的克隆和序列分析被引量：3
《中国畜牧兽医》2014年第10期12-16,共5页沈海燕 刘志成 郭慧霞 周恒 朱余军 张春红 
广东省科技计划项目(2012A020602-094;2011B0507-00007);国家自然科学基金(青年科学基金)(3130-2101)
为了解广东部分地区猪圆环病毒2型（porcine circovirus type 2,PCV2）流行毒株的基因型和遗传变异情况,本研究根据GenBank中PCV2的核苷酸序列设计针对ORF2基因的1对特异性引物,从分离于广东省的8株PCV2分离株BL、HD、Li、GD01、GD02、H...
关键词：猪圆环病毒2型 ORF2基因 序列分析 
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