周坚

作品数：20被引量：194H指数：8
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供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
发文主题：海藻糖大肠杆菌突变体海藻糖合成酶毕赤氏酵母更多>>
发文领域：生物学轻工技术与工程医药卫生农业科学更多>>
发文期刊：《云南大学学报（自然科学版）》《微生物学通报》《Journal of Genetics and Genomics》《微生物学报》更多>>
所获基金：国家自然科学基金“九五”国家科技攻关计划国家高技术研究发展计划国家杰出青年科学基金更多>>
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基于PHA颗粒-PhaP标签和内含肽元件的极端嗜盐古菌蛋白的表达纯化系统
《微生物学报》2014年第9期998-1009,共12页伍锦花 蔡双凤 刘海龙 侯靖 韩静 周坚 向华 
国家自然科学基金重点项目(31330001)~~
【目的】建立一个基于PHA颗粒-PhaP标签的简便实用的极端嗜盐古菌蛋白表达纯化系统,并探讨嗜盐古菌内含肽在该系统优化中的应用。【方法】以嗜盐古菌-大肠杆菌穿梭载体pWL502为基本骨架,构建带有嗜盐古菌强启动子和PhaP融合标签的表达载...
关键词：极端嗜盐古菌 表达载体 聚羟基脂肪酸酯颗粒 PhaP标签 内含肽 
地中海富盐菌中phaB基因的鉴定及PHBV前体供应途径的分析被引量：2
《微生物学报》2010年第10期1305-1312,共8页冯博 蔡双凤 韩静 刘海龙 周坚 向华 
国家自然科学基金(30830004);国家“863计划”(2006AA09Z401)~~
【目的】进一步揭示地中海富盐菌(Haloferax mediterranei)中聚羟基丁酸羟基戊酸酯[poly(3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxyvalerate),PHBV]前体供应的途径并鉴定其中的关键基因。【方法】将细菌及其他古菌中已鉴定的与聚羟基脂肪酸酯前体...
关键词：地中海富盐菌 聚羟基脂肪酸酯 乙酰乙酰-CoA还原酶 前体供应途径 
腾冲嗜热杆菌热稳定海藻糖磷酸化酶的基因表达与酶的分子生物学性质研究被引量：2
《中国科学（C辑）》2004年第5期409-415,共7页任媛媛 戴秀玉 周坚 刘景芳 裴华东 向华 
国家自然科学基金项目(批准号30170015)中国科学院重要方向项目(批准号KSCX2-SW-112)资助
分离克隆了腾冲嗜热杆菌(Thermoanaerobacter tengcongensis)海藻糖磷酸化酶(TreP)的编码基因(treP),该酶可催化以葡萄糖和α-1-磷酸葡萄糖为底物的海藻糖合成反应及其逆向的分解反应.反向mRNA点杂交实验表明,腾冲嗜热杆菌中treP基因在...
关键词：葡萄糖氧化酶法 杆菌 基因表达 体内 体外 分子生物学 磷酸化酶 海藻糖 最适PH值 最适温度 
大肠杆菌海藻糖合成酶基因对提高烟草抗逆性能的研究被引量：30
《微生物学报》2001年第4期427-431,共5页戴秀玉 王忆琴 杨波 周坚 
国家自然科学基金资助项目! (3 9980 0 2 3 )&&
编码大肠杆菌海藻糖合成酶的otsA基因由农杆菌介导引入野生型烟草植株并在花椰菜花叶病毒启动子序列 (CaMV35S)控制下获得表达。蒸发光散射高效液相层析法测定海藻糖实验表明 ,转基因烟草能够合成海藻糖 ,合成量达 1 4μg g叶片湿重 ;...
关键词：otsA基因 海藻糖 转基因烟草 抗逆性能 
酿酒酵母海藻糖合成酶基因的克隆和在大肠杆菌中的表达被引量：3
《Acta Genetica Sinica》2001年第4期372-378,共7页杨波 戴秀玉 周坚 
国家自然科学基金资助项目!(批准号:39980023)
用ＰＣＲ方法克隆了１．５ｋｂ的酿酒酵母Ｓａｃｃｈｒｏｍｙｃｅｓ　ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ海藻糖合成酶基因ＴＰＳ１，将该片段连接到ｐＵＣ１９载体，通过转化分别引入海藻糖合成酶基因缺失和缺陷的大肠杆菌Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　...
关键词：TPS1基因 海藻糖 PCR克隆 表达 酿酒酵母 海藻糖合成酶 
转基因烟草中的海藻糖测定被引量：11
《微生物学报》2001年第3期378-380,共3页周坚 杨波 戴秀玉 
国家自然科学基金资助项目 ( 3 9980 0 2 3 )&&
The \%E.coli\% trehase synthalose gene(\%otsA\%) was transferred into \%Nicotiana tabacum\% mediated by \%Agrobacterium\%, but the method for detecting low concentration of trehalose in transgenic plant was not availa...
关键词：高效液相层析 蒸发光散射检测器 转基因烟草 海藻糖 检测 
海藻糖对乳酸菌的抗逆保护研究被引量：23
《微生物学通报》2001年第2期46-50,共5页戴秀玉 沈义国 周坚 
研究了在冷冻干燥、高温及冻融等胁迫条件下，海藻糖对嗜热链球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｔｈｅｒ－ ｍｏｐｈｉｌｌｕｓ）和植物乳杆菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｌａｎｔａｒｕｍ）菌体细胞的保护作用。结果表明在冷冻...
关键词：海藻糖 乳酸菌 抗逆保护 
大肠杆菌海藻糖的代谢调控被引量：6
《生物工程进展》2000年第6期26-29,共4页戴秀玉 王忆琴 周坚 杨波 王连琴 
海藻糖是一种重要的抗逆物质。大肠杆菌中otsBA操纵子编码的两种酶负责海藻糖合成。otsBA基因的表达受渗透压诱导和σs 因子的调节。细胞的周质海藻糖酶 (treA)将外源海藻糖分解成两个葡萄糖分子。尽管大肠杆菌中渗透压诱导合成的海藻...
关键词：海藻糖代谢 大肠杆菌 抗逆 转基因植物 
毕赤氏酵母醇氧化酶-2基因启动子突变体的分离和鉴定被引量：2
《Acta Genetica Sinica》2000年第7期641-646,共6页戴秀玉 王韫恂 周坚 王忆琴 
中国科学院微生物研究所所长基金
巴斯德毕赤氏酵母表达系统已被广泛用于生产外源蛋白的奇主菌。利用该系统将外源基因整合交换到染色体上时，AOX1基因被破坏，使表达菌的甲醇利用缓慢，给发酵生产造成一定影响。在不改变现有表达系统前提下，从AOX1功能缺陷菌株分离出M...
关键词：毕赤氏酵母 AOX2基因启动子 自发突变 外源蛋白 
大肠杆菌otsA基因的克隆和表达被引量：5
《微生物学报》2000年第5期470-474,共5页王忆琴 戴秀玉 王韫恂 周坚 
国家自然科学基金资助项目!( 3 9980 0 2 3 )&&
用PCR方法扩增了 1 5kb的otsA基因片段 ,将该片段连接到多拷贝克隆载体后转化otsBA缺失和otsA缺陷的大肠杆菌菌株 ,使转化株重新获得otsA基因功能。生长曲线表明转化株在高渗培养基中生长良好 ,薄层层析法 (TLC)检测海藻糖实验说明转...
关键词：otsA基因 海藻糖 PCR扩增 表达 大肠杆菌 
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