福建省自然科学基金(C0410009)

作品数：8被引量：24H指数：3
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易错PCR对扩展青霉脂肪酶基因PEL的定向进化被引量：1
《安徽农学通报》2011年第5期22-24,共3页陈彦 司圣乾 刘燕雅 冯蔚宗 林琳 
国家自然科学基金资助项目(No.30270033);福建自然科学基金重点资助项目(No.BOI20001);福建自然科学基金资助项目(No.C0410009);福建省科技平台建设计划项目(No.2006H0085)
以带有野生型扩展青霉碱性脂肪酶cDNA全长的载体psk-lip07为模板,利用易错PCR技术以及高通量筛选,最终获得了一株最佳突变体GS-pPIC3.5K-lip07-ER04,其最适作用温度比野生型提高10℃,酶活提高了约22%,热稳定性Tm值也提高了3.28℃。基因...
关键词：扩展青霉脂肪酶 易错PCR 最适作用温度 酶活 热稳定性 
Pseudomonas sp. RT-1低温脂肪酶的纯化及酶学特性被引量：1
《生物加工过程》2010年第6期52-56,共5页司圣乾 陈彦 刘燕雅 冯蔚宗 林琳 
国家自然科学基金资助项目(30270033);福建省自然科学基金重点资助项目(BOI20001);福建省自然科学基金资助项目(C0410009);福建省科技平台建设计划项目(2006H0085)
Pseudomonas sp. RT-1是从低温环境下分离的低温脂肪酶产生菌,对该菌产生的胞外脂肪酶（PL-1）进行纯化,并对其酶学特性进行初步研究。Pseudomonas sp. RT-1的发酵上清液经60%（NH4）2SO4沉淀、12~14000截留相对分子质量（MWCO）透析袋...
关键词：PSEUDOMONAS sp. 低温脂肪酶 纯化 酶学特性 
P197E与ep8叠加突变对扩展青霉脂肪酶热稳定性的影响被引量：4
《微生物学通报》2010年第2期161-165,共5页刘燕雅 黄平 司圣乾 陈彦 林琳 
国家自然科学基金资助项目(No.30270033);福建省自然科学基金重点资助项目(No.BOI20001);福建省自然科学基金资助项目(No.C0410009);福建省科技平台建设计划项目(No.2006H0085)
为提高脂肪酶的热稳定性,作者利用重叠延伸PCR对扩展青霉脂肪酶(PEL)基因进行了体外定点突变,构建了P197E(即将第197位的脯氨酸突变为谷氨酸)与随机突变体ep8叠加突变的重组质粒pPIC3.5K-ep8-P197E。将该质粒电转化至毕赤酵母Pichiapast...
关键词：扩展青霉脂肪酶 叠加突变 热稳定性 
脂肪酶的固定化及其在生物柴油制备中的应用被引量：2
《福建畜牧兽医》2009年第5期30-32,共3页刘燕雅 黄平 胡长浩 林琳 
国家自然科学基金项目(No30270033);福建省自然科学基金重点项目(NoBOI20001);福建省自然科学基金项目(C0410009);福建省科技平台建设计划项目(2006H0085)资助
脂肪酶（1ipase EC3．1．1．3）又称三酰基甘油酰基水解酶，属于特殊的水解酶，它的天然底物是油脂．除了具有高催化效率、专一性、无污染性等生物酶的一般特性外，一个突出的特点是在异相体系中具有催化活性．即在油水界面能够催化酯...
关键词：脂肪酶 酶的固定化 生物柴油 应用 制备 催化效率 酯合成 无污染性 
脂肪酶菌种的筛选、鉴定及酶学性质研究被引量：8
《生物技术》2009年第2期53-57,共5页胡长浩 施文芳 沈麟 林琳 
国家自然科学基金项目(No.30270033);福建省自然科学基金项目(C0410009);福建省科技创新平台建设计划项目(2006H0085)资助
目的:筛选耐热脂肪酶产生菌并研究其酶学特性。方法:以固体平板法筛选产酶菌株,单因素和分子进化树分析确定产酶条件、酶学性质及分类地位。结果:产酶条件初步确定为2%糊精、3%酵母膏、MgSO4·7ddH2O 0.1%、K2HPO40.1%、CaCl20.1%、三...
关键词：葡萄球菌脂肪酶 热稳定性 筛选 酶学性质 16SrDNA 
随机突变对扩展青霉脂肪酶最适作用温度的改善被引量：2
《饲料工业》2009年第6期30-32,共3页胡长浩 邹有土 刘燕雅 冯蔚宗 林琳 
国家自然科学基金资助项目(No.30270033);福建省自然科学基金资助项目(C0410009);福建省科技创新平台建设计划项目(2006H0085)
利用error-prone PCR和staggered extension process(StEP)相结合的方法对扩展青霉脂肪酶(PEL)进行定向进化,构建含有随机突变基因的重组质粒pPIC3.5K-lip-mutantx,电转化引入毕赤酵母GS115中,进行异源表达。高通量筛选获得一株最适作...
关键词：扩展青霉脂肪酶 随机突变 最适作用温度 
K55R与ep8叠加突变对扩展青霉脂肪酶热稳定性的改善被引量：8
《生物工程学报》2007年第4期677-680,共4页蔡少丽 林俊涵 王彩梅 林琳 
国家自然科学基金(No30270033);福建省自然科学基金(NoB0120001和C0410009);福建省工业微生物研发平台建设项目(No2006H0085)资助~~
利用重叠延伸PCR对扩展青霉脂肪酶(PEL)基因进行体外定点突变,构建了K55R与随机突变体ep8叠加突变的重组质粒pAO815-ep8-K55R。将该质粒电转化引入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,进行异源表达。实验结果表明:该叠加突变体在毕赤酵母...
关键词：扩展青霉脂肪酶 叠加突变 热稳定性 
扩展青霉脂肪酶ep8与R182K叠加突变体的构建被引量：3
《生物技术通报》2007年第4期165-168,共4页王彩梅 蔡少丽 吴义真 林琳 
国家自然科学基金资助项目(No.30270033);福建省自然科学基金资助项目(No.B0120001和C0410009);福建省工业微生物研发平台建设(2006H0085)项目资助
利用重叠延伸PCR法对扩展青霉碱性脂肪酶(PEL)基因进行体外定点突变,并将含突变基因的重组质粒pAO815-ep8-R182K在毕赤酵母(Pichiapastoris)GS115中进行表达。叠加突变体PEL-ep8-R182K表达产物与野生型PEL、PEL-ep8比较实验表明:叠加突...
关键词：扩展青霉脂肪酶 叠加突变 最适温度 热稳定性 
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