国家自然科学基金(30470030)

作品数：12被引量：25H指数：4
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构建人csp-B核基质结合区克隆及其介导的反转录载体
《中国组织工程研究与临床康复》2010年第11期1948-1950,共3页昝玉玺 王俐 张俊河 王天云 
国家自然科学基金(30470030);河南省自然科学基金(0511042300);河南省科技攻关项目(0624410041)~~
背景:核基质结合区是染色质被限制酶消化后仍附着在核基质上的DNA序列。大量实验表明,核基质结合区可以作为DNA复制的起始点或调控基因的转录,构建核基质结合区表达载体能提高外源基因表达水平,增强外源基因表达的稳定性及提高转化细胞...
关键词：核基质结合区 csp-B 基因克隆 反转录载体 载体构建 
核基质结合区的位置对转基因表达的影响被引量：3
《中国生物化学与分子生物学报》2009年第9期839-843,共5页张俊河 昝玉玺 王天云 
国家自然科学基金资助项目(No.30470030);河南省科技厅科技攻关项目(No.0624410041);河南省教育厅自然科学基金资助项目(No.2008A310008)~~
为研究核基质结合区(MAR)序列不同插入位置对转基因表达作用的影响,PCR扩增人β-珠蛋白MAR分别插入到含氯霉素乙酰转移酶(chloramphenicol acetyltransferase,CAT)报告基因真核表达载体pCATG表达盒两侧、5′端及3′端.酶切鉴定后,用阳...
关键词：核基质结合区 插入位置 转基因表达 报告基因 
CHO细胞MAR片段的克隆及其逆转录载体的构建被引量：1
《山东医药》2009年第18期18-19,共2页昝玉玺 张俊河 王天云 
国家自然科学基金资助项目(30470030);河南省自然科学基金资助项目(0511042300);河南省科技攻关项目(0624410041)
目的构建重组人促红素(CHO)细胞核基质结合区MAR的逆转录载体。方法以CHO细胞DNA为模板,采用PCR扩增CHO细胞的MAR序列,克隆入逆转录表达载体PLXSN-CAT中,经限制性内切酶酶切及DNA序列分析鉴定目的基因。结果PCR扩增的特异性片段长度为47...
关键词：核基质结合区 基因克隆 逆转录表达载体 
杜氏盐藻核基质结合区结合蛋白的细胞定位被引量：2
《广西植物》2009年第1期55-58,共4页王鹏举 王天云 冯英才 刘红涛 薛乐勋 
科技部国际科技合作项目(2007DFA01240);国家自然科学基金(30470030)~~
为研究核基质结合区结合蛋白的功能及调控机制,PCR扩增杜氏盐藻MBP的cDNA全长序列及N端和C端序列,与绿色荧光蛋白基因融合构建真核表达载体,脂质体转染CHO细胞,Western blotting和荧光显微镜检测基因表达情况和细胞定位。结果显示:MBP及...
关键词：杜氏盐藻 核基质附着区 核基质结合区结合蛋白 真核表达载体 细胞定位 
重组盐藻14-3-3蛋白基因的原核表达及分离纯化
《四川大学学报（自然科学版）》2008年第6期1533-1536,共4页王天云 昝玉玺 张俊河 张煜 王俐 郭丽 
国家自然科学基金(30470030)
根据克隆的杜氏盐藻14-3-3蛋白的基因序列设计引物,采用RT-PCR方法扩增杜氏盐藻14-3-3蛋白的基因.经原核表达、Ni2+亲和层析法纯化,免疫动物制备抗体.抗体蛋白质印迹分析检测结果表明抗体能特异结合盐藻细胞分子量为29 kD的多肽.
关键词：杜氏盐藻 14—3—3蛋白 原核表达 
MAR提高稳定转化的CHO细胞转基因表达被引量：5
《基础医学与临床》2008年第11期1125-1128,共4页王天云 韩忠敏 杨献军 董忠生 王清义 
国家自然科学基金(30470030);河南省科技厅自然科学基金(511042300);河南省科技厅科技攻关(0624410041)
目的研究MAR在CHO细胞中对转基因的表达调控作用,为建立稳定高效表达的CHO表达系统奠定基础。方法将人β-珠蛋白MAR片段顺式克隆到氯霉素乙酰转移酶(CAT)报告基因表达盒两侧,构建MAR介导的哺乳动物细胞表达载体,转染CHO细胞,G418筛选稳...
关键词：核基质结合区 转基因 基因工程 CHO细胞 
人β-干扰素核基质附着区在CHO细胞中对转基因表达的调控被引量：5
《中国组织工程研究与临床康复》2008年第29期5623-5626,共4页昝玉玺 王天云 张俊河 王俐 
国家自然科学基金(30470030);河南省自然科学基金(0511042300);河南省科技攻关项目(0624410041)~~
背景:核基质附着区是染色质被限制酶消化后仍附着在核基质上的DNA序列,不仅可影响邻近内源基因的表达,还能克服转基因沉默,提高外源基因的转录与表达。目的:探讨在CHO细胞中β-干扰素核基质附着区对氯霉素乙酰转移酶转基因表达的影响。...
关键词：核基质结合区 转基因 基因沉默 报告基因 
MAR结合蛋白及其调控功能被引量：4
《中国生物化学与分子生物学报》2008年第4期302-306,共5页王天云 张俊河 张煜 王俐 
国家自然科学基金资助项目(No.30470030)~~
核基质结合区(MAR)是真核生物中能与核基质结合的DNA片段.MAR通过与特异的MAR结合蛋白相互作用,在提高转基因表达水平、降低转基因个体之间表达水平差异以及染色体包装等方面具有重要的调控作用.目前,已在不同物种分离MAR结合蛋白,分别...
关键词：核基质结合区 核基质 MAR结合蛋白 调控功能 
半定量反转录-聚合酶链反应分析大鼠不同组织肌肉生长抑制素基因的表达被引量：5
《中国组织工程研究与临床康复》2008年第11期2164-2166,共3页郭丽 王天云 王俐 昝玉玺 杨保胜 
国家自然科学基金资助项目(30470030);河南省科技厅自然科学基金(511042230);河南省科技厅科技攻关资助项目(624410041)~~
目的：有许多实验已证实，肌肉生长抑制素基因在骨骼肌中有特异性表达，在胚胎成体心脏以及乳腺组织中也检测到表达；但也有报道心脏、肺、脑、肾脏等多种组织中均未检测到肌肉生长抑制素的表达。本实验拟验证肌肉生长抑制素基因在大鼠...
关键词：肌肉生长抑制素 大鼠 半定量RT—PCR 
核基质结合区提高报告基因在稳定转化的杜氏盐藻中的表达被引量：6
《中国生物化学与分子生物学报》2007年第8期692-695,共4页王天云 薛乐勋 姬祥 王亚峰 
国家自然科学基金资助项目(No.30470030)~~
前期的研究从杜氏盐藻(Dunaliella salina)中分离出一核基质结合区(matrix attachment region,MAR)片段---DSM1.实验证实,它在体外能与核基质结合且具有MAR的典型特征.为研究其在转基因盐藻中的作用,构建了RbcS启动子驱动、氯霉素乙酰...
关键词：核基质结合区 基因沉默 CAT报告基因 杜氏盐藻 
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