凝乳酶原

作品数：28被引量：47H指数：5
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前导肽区域N-糖基化影响骆驼凝乳酶原在毕赤酵母中的分泌表达和热稳定性研究
《中国农业科技导报》2022年第10期71-78,共8页王楠 杨彩峰 彭华康 郭文芳 王梦琪 李刚强 刘德虎 
国家自然科学基金项目(31901661)。
骆驼凝乳酶原在毕赤酵母中的表达量较低,不能满足产业化需求。为提高骆驼凝乳酶原的表达量,采用定点突变的方法,分别在其前导肽的第11、26、34、35、38、39位氨基酸处引入1个N-糖基化位点,构建成6种骆驼凝乳酶原的N-糖基化突变体:chy11...
关键词：骆驼凝乳酶原 N-糖基化 毕赤酵母 分泌表达 热稳定性 
重组牛凝乳酶原与重组单峰驼凝乳酶原活化速率的初步比较
《食品与发酵工业》2015年第7期63-69,共7页普燕 张富春 
新疆维吾尔自治区自然科学基金,青年科学基金项目,2013211B10
原核表达的重组牛凝乳酶原与重组单峰驼凝乳酶原，包涵体经溶解和复性后，酸化／中和处理获得成熟凝乳酶。酸化／中和处理两种酶原时发现二者的活化速率有明显差别。相同条件下，牛凝乳酶原在2h以内即可完全活化，而单峰驼凝乳酶原需3d...
关键词：重组凝乳酶 酶原活化 活化速率 骆驼 
双峰驼凝乳酶原基因的生物信息学分析
《生物信息学》2014年第1期18-26,共9页杨艺 普燕 张富春 
新疆动物学重点学科-乳品工程资助(2011001)
通过生物信息学的方法对双峰驼凝乳酶原基因及相应的氨基酸序列的同源性、理化性质、保守结构域、亚细胞定位、信号肽、跨膜结构域、亲水性/疏水性、二级结构进行预测分析。结果表明,双峰驼凝乳酶原基因开放阅读框全长1 146 bp,编码381...
关键词：双峰驼 凝乳酶原 克隆 生物信息学 
单峰驼凝乳酶原的原核表达和活性检测被引量：1
《中国乳品工业》2013年第11期12-15,共4页普燕 李轶杰 张富春 
新疆自治区动物学重点学科-乳品工程资助(2011001)
骆驼凝乳酶具有独特的凝乳特性,凝乳酶活性高。通过原核表达系统高效表达获得单峰驼(Camelus dromedarius)凝乳酶原,经酸化/中和处理后,活化的单峰驼凝乳酶能够凝固新鲜牛乳与双峰驼乳。同时单峰驼凝乳酶原的活化条件表明,酸化pH值必须...
关键词：单峰驼 凝乳酶原 原核表达 凝乳 活性检测 
原核表达重组牛凝乳酶原及重组牛凝乳酶酶学特性被引量：4
《食品与发酵工业》2013年第8期13-19,共7页普燕 李轶杰 张富春 
新疆自治区动物学重点学科-乳品工程资助项目(2011001)
摘要凝乳酶能够专一性裂解κ-酪蛋白，是制造干酪的关键酶。运用大肠杆菌表达系统对牛凝乳酶原进行了原核表达和初步纯化，活化重组凝乳酶原及测定凝乳活性，对重组凝乳酶的酶学特性进行分析。结果表明i大肠杆菌表达的重组蛋白约占菌体...
关键词：牛凝乳酶原 凝乳酶 原核表达 凝乳酶活力 酶学特性 
重组凝乳酶原基因的原核表达及其抗血清的制备被引量：3
《细胞与分子免疫学杂志》2012年第7期715-717,721,共4页李新苹 刘欢欢 普燕 张富春 李轶杰 
国家自然科学基金(30860265);新疆生物资源基因工程重点实验室基金(XJDX0201-2010-2)
目的:原核细胞表达密码子优化的凝乳酶原并制备抗血清。方法:以大肠杆菌密码子的偏爱性整合牛、羊和骆驼的凝乳酶原(pCHY)序列后分别克隆至大肠杆菌原核表达载体pET-30a和真核高效抗体制备核酸疫苗载体pcDNA3-AAT-COMP-C3d3(pcD-ACC)上...
关键词：凝乳酶原 密码子优化 DNA prime—protein boost 抗体滴度 
牛凝乳酶原基因在大肠杆菌中的高效表达及活性检测被引量：3
《中国乳品工业》2012年第3期4-6,共3页张俊瑞 马夏吟 张红星 郝彦玲 
以实验室保存的携带凝乳酶原前体基因的重组载体pMD 19-T/bPPC为模板克隆凝乳酶原基因,经双酶切后与载体pET-30a连接得到重组载体pET-30a/bPC,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导后,采用SDS-PAGE检测目的蛋白表达情况。重组蛋白经变性/...
关键词：牛凝乳酶原 高效表达 大肠杆菌BL21(DE3) 凝乳活性 
西农萨能羊凝乳酶原基因的克隆与原核表达
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》2011年第12期39-43,48,共6页杨宝进 卢婷婷 张华 罗军 王学清 
河南省科技攻关计划项目(0624030009)
【目的】克隆西农萨能羊凝乳酶原基因并进行原核表达,对表达产物凝乳酶原复性后进行活性检测,为西农萨能羊凝乳酶制剂的微生物发酵生产奠定基础。【方法】从西北农林科技大学西农萨能羊原种场新生公羔羊的皱胃组织中提取总RNA,通过RT-PC...
关键词：西农萨能羊 凝乳酶 原核表达载体 
重组凝乳酶原在大肠杆菌中的表达及活性研究被引量：4
《中国乳品工业》2011年第9期14-16,27,共4页李新苹 刘欢欢 普燕 张富春 李轶杰 
国家自然科学基金资助(30860265);新疆生物资源基因工程重点实验室基金(XJDX0201-2010-2)
为了提高干酪生产中起重要凝乳作用的凝乳酶的原核表达效率,分析了Genbank中牛、羊和骆驼凝乳酶原(prochymosin,pCHY)的保守序列及大肠杆菌密码子的偏爱性,合成了凝乳酶原序列,并将其克隆至大肠杆菌原核表达载体上。经IPTG的诱导得到高...
关键词：凝乳酶原 密码子优化 凝乳活性 
牛凝乳酶原基因的合成及其在乳酸克鲁维酵母中的表达被引量：8
《生物工程学报》2010年第9期1281-1286,共6页袁伟 柯涛 杜敏华 褚学英 胡凡 惠丰立 
河南省基础与前沿技术研究计划(No.102300410146);河南省教育厅自然科学基金项目(No.2010A180017)资助~~
凝乳酶在奶酪加工中应用广泛,为获得高活性的凝乳酶制剂,采用乳酸克鲁维酵母为宿主,首次对经密码子优化的牛凝乳酶原基因进行表达。利用DNAWorks3.0软件辅助设计,用两步PCR法合成了小牛凝乳酶原基因(GenBank Accession No.AA30448)。将...
关键词：牛凝乳酶原 乳酸克鲁维酵母 基因合成 密码子优化 
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