核苷磷酸化酶

作品数：64被引量：135H指数：7
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嘌呤核苷磷酸化酶/嘧啶核苷磷酸化酶共表达及固定化催化合成阿糖核苷
《生物加工过程》2024年第2期139-146,共8页刘玉雪 张震 胡晓静 王振宇 刘国生 
河南省高等学校重点科研计划(20A180033);河南省自然科学基金(222300420201)。
将嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)和尿苷磷酸化酶(UP)进行共表达和双酶固定化,提高生物法合成阿糖核苷过程中底物转化率和催化剂稳定性。首先,构建大肠杆菌内源(PNP)和(UP)过表达工程菌,考察工程菌催化不同阿糖核苷之间转化的效率。将PNP和UP双...
关键词：嘌呤核苷磷酸化酶 嘧啶核苷磷酸化酶 阿糖核苷 固定化酶 生物催化 
重组枯草芽孢杆菌全细胞催化高效合成2′-脱氧腺苷
《精细化工》2023年第11期2436-2444,共9页陈伟 陈令伟 李文超 郑玲辉 
天津市教委科研计划项目(2019KJ237)。
以枯草芽孢杆菌168(简写为BS)为宿主,以脱氧胸苷和腺嘌呤为底物,异源表达组合来源于大肠杆菌(E.coli)的嘧啶核苷磷酸化酶(PyNP)与嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)作为催化酶源,全细胞催化合成2′-脱氧腺苷(dA)。首先,以BS敲除内源性的PNP(由基因d...
关键词：2′-脱氧腺苷 嘧啶核苷磷酸化酶 嘌呤核苷磷酸化酶 互作短肽 枯草芽孢杆菌 全细胞催化 生物工程 
核苷磷酸化酶的工程菌构建
《郑州铁路职业技术学院学报》2022年第4期60-62,67,共4页段佩玲 王振宇 刘国生 
河南省2020年度高等学校重点科研项目(20A180033);郑州铁路职业技术学院2020年度校级课题(2020KY007)
使用PCR扩增技术对来源于AEM0812菌株的核苷磷酸化酶基因进行扩增。利用克隆载体pD18-T进行连接,构建重组质粒pMD18-T-deoD,再将其导入Escherichia coli DH5α菌体内,克隆目的基因。利用表达载体pET-28a与目的基因构建重组质粒pET-28a-d...
关键词：嘌呤核苷磷酸化酶(PNPase)表达 工程菌 基因克隆与表达 
核苷磷酸化酶酶活力检测方法的建立被引量：1
《中国调味品》2021年第5期147-150,160,共5页唐艳 吴涛 王成 孟月 
河北省氨基酸工程技术研究中心创新平台建设资助项目(131000021)。
建立了一种核苷磷酸化酶酶活的检测方法,解决了工业化磷酸化酶质量无法判定的难题。建立核苷磷酸化酶的反应体系,以10 g/L肌苷、10 g/L三聚磷酸钠为底物,最适反应温度40℃,pH 4.5,反应10 min,使肌苷在磷酸化酶的作用下生成肌苷酸二钠(I...
关键词：磷酸化酶 酶活力 肌苷 肌苷酸二钠(IMP) 高效液相色谱法(HPLC) 
嘌呤核苷磷酸化酶与嘧啶核苷磷酸化酶的融合表达及酶法合成嘌呤核苷类产物被引量：3
《生物加工过程》2021年第1期8-16,共9页徐玲玲 康丽峰 刘高飞 何冰芳 储建林 
江苏省自然科学基金(BK20181379);江苏省大学生创新创业训练计划(2018DC754)。
将嘌呤核苷磷酸化酶与嘧啶核苷磷酸化酶进行融合,提高生物酶法催化合成克拉屈滨等嘌呤核苷类产物的产率。设计不同的刚性、柔性连接短肽(Linker),将嘧啶核苷磷酸化酶EcUP与嘌呤核苷磷酸化酶AmPNP连接融合,考察酶融合蛋白的可溶性表达与...
关键词：嘌呤核苷磷酸化酶 嘧啶核苷磷酸化酶 融合蛋白 嘌呤核苷类产物 生物催化 
2016—24一种嘧啶核苷磷酸化酶基因及其应用
《药物生物技术》2016年第2期137-137,共1页
本方法涉及生物技术及生物医药领域，具体涉及一种嘧啶核苷磷酸化酶基因及其应用。一种嘧啶核苷磷酸化酶基因，核苷酸序列如SEQIDNO．1所示，该基因编码的嘧啶核苷磷酸化酶氨基酸序列如SEQIDNO．2所示。将该基因导入大肠杆菌获得含有该...
关键词：嘧啶核苷磷酸化酶 酶基因 应用 生物技术 核苷酸序列 氨基酸序列 基因工程菌 医药领域 
固定化核苷磷酸化酶的制备及其性质研究
《中国药业》2015年第20期32-34,共3页黄炯威 刘宁 劳伟明 周华润 刘桂祯 
目的优化核苷磷酸化酶的固定化工艺,并对固定化酶的性质进行研究。方法通过正交试验优化核苷磷酸化酶(包括嘌呤和嘧啶核苷磷酸化酶)固定化条件,并进一步对固定化核苷磷酸化酶的最适p H、温度及其稳定性进行研究。结果固定化酶条件为p H=...
关键词：核苷磷酸化酶 固定化 制备 
酶法合成2'-脱氧-5-氟尿苷的研究
《药物生物技术》2015年第1期9-13,共5页易喻 江林林 梅建凤 陈建澍 王鸿 应国清 
浙江省科技计划项目(No.2009C13033-1)
以化学合成的2-脱氧核糖-1-磷酸二环己胺盐和5-氟尿嘧啶为底物,在芽孢杆菌核苷磷酸化酶的作用下合成产物2'-脱氧-5-氟尿苷。考察了诱导剂种类及浓度对菌体核苷磷酸化酶活力的影响,同时又考察了底物比例、底物浓度、菌体量、反应温度、...
关键词：2’-脱氧-5-氟尿苷 核苷磷酸化酶 酶法合成 2-脱氧-α-D-核糖-1-磷酸二环己胺盐 5-氟尿 
拟南芥核苷磷酸化酶基因的组织表达及其T-DNA插入突变体鉴定
《贵州农业科学》2015年第1期16-19,共4页徐文晶 程玉祥 
国家863计划项目"林木优质;速生性状调控基因的分离及育种技术研究"(2013AA102702)
为探明植物核苷磷酸化酶家族基因信息及生理功能,采用PCR扩增的方法,研究了模式植物拟南芥核苷磷酸化酶家族基因在不同组织中的表达,并对其核苷磷酸化酶基因T-DNA插入突变体进行鉴定。结果表明:At4g24340和At4g28940基因在根组织中大量...
关键词：拟南芥 核苷磷酸化酶 突变体 
参环毛蚓体内核苷磷酸化酶的活性测定及动力学分析被引量：1
《中药新药与临床药理》2014年第6期721-724,共4页李菁 龚玲 李薇 卢瑞珊 陈立红 迟玉广 
国家自然科学基金项目(81374035)
目的建立参环毛蚓体内嘌呤核苷磷酸化酶（PNP）的检测方法,以肌苷为底物,评价该酶的活性。方法采用HPLC法,色谱条件：Ecosil C18-AQ柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为10 mmol·L^-1磷酸二氢铵缓冲液（p H4.5）和甲醇,梯度洗脱,流速为0...
关键词：参环毛蚓 次黄嘌呤 肌苷 嘌呤核苷磷酸化酶 高效液相色谱法 
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