易错PCR

作品数：113被引量：249H指数：8
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基因突变提高毕赤酵母表达内切β-1,3-葡聚糖酶活性
《食品与生物技术学报》2021年第2期57-64,共8页金树霞 王力 朱莉 李菲菲 刘丽萍 詹晓北 郑志永 高敏杰 
国家自然科学基金项目(31301408);江南大学自主科研计划重点项目(JUSRP51632A);江苏省重点研发计划(现代农业)项目(BE2018367)。
为构建一株高效表达内切β-1,3-葡聚糖酶的毕赤酵母菌株,并用于水解热凝胶生产β-1,3-葡寡糖。作者首先对哈茨木霉来源内切β-1,3-葡聚糖酶基因进行随机突变,并构建BGN13.1a突变库;然后采用高通量技术及刚果红平板筛选高表达菌株;最后采...
关键词：内切β-1 3-葡聚糖酶 毕赤酵母 易错PCR 酶学性质 
四环素与3,4-苯并芘复合污染对抗性基因tetA(C)产生高抗性突变的影响
《微生物学报》2020年第8期1605-1615,共11页俞珊珊 李根 黄萌 程思 武俊 
国家自然科学基金(31470551,41571244)。
【目的】探究环境中同时存在低浓度四环素(tetracycline,TC)和3,4-苯并芘(benzo[a]pyrene,Bap)对抗性基因tetA(C)产生高抗性突变的影响。【方法】以大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)为宿主菌株,pACYC184质粒作为载体,四环素抗性基因te...
关键词：四环素 3 4-苯并芘 抗性基因 基因突变 易错PCR 
利用易错PCR构建酱油酿造用T酵母spt15突变库被引量：2
《食品科学》2018年第14期106-111,共6页赵秀丽 张毓秀 孙月芹 侯丽华 
国家自然科学基金面上项目(31371819);天津市科技支撑重点项目(17YFZCNC00460);天津科技大学新农村发展研究院开放基金资助项目(xnc201604);天津市高等学校创新团队培养计划资助项目(TD13-5013)
为得到酱油酿造优良性状的微生物,对酱油酿造用T酵母进行研究。首先利用易错聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术构建spt15(可编码TATA结合蛋白)的突变基因库,然后重组于表达载体YEplac195中,并导入尿嘧啶营养缺陷型菌株...
关键词：易错PCR spt15 基因突变库 筛菌 酱油发酵 
Cry1Ab13杀虫基因的PCR诱变及功能验证被引量：1
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》2018年第5期141-148,共8页闫鸽 宋阳 张宇婷 张卓 代力强 王丕武 
国家转基因生物新品种培育重大专项(2016ZX08004-004)
【目的】通过易错PCR技术克隆一种新的Cry1Ab13基因,以利用Cry类Bt基因提高作物抗虫性,丰富基因资源。【方法】利用易错PCR技术对苏云金芽孢杆菌Cry1Ab13基因进行随机诱变,构建突变体文库,筛选获得突变株Cry1Ab13-1,将该基因构建原核重...
关键词：易错PCR Cry1Ab13基因 原核表达 玉米螟 小菜蛾 
一个新的L-半胱亚磺酸脱羧酶基因的分析和突变
《微生物学报》2017年第8期1283-1292,共10页邓洁 吴巧芬 高华 徐悦 欧倩 武波 蒋承建 
国家自然科学基金(21262003);2017年度广西高等教育创优计划教学相关项目-优势特色专业项目(优质本科专业)~~
【目的】完成一个来源于碱性污染土壤宏基因组文库的新的L-半胱亚磺酸脱羧酶基因undec1A的鉴定,研究其酶学性质并利用非理性设计技术对其进行分子改造。【方法】以p ETBlue-2为表达载体构建包含undec1A基因的重组表达质粒,转化至宿主细...
关键词：牛磺酸 L-半胱亚磺酸脱羧酶 宏基因组文库 连续易错PCR技术 突变酶 
通过原位易错PCR一步构建基因突变文库被引量：3
《微生物学通报》2014年第4期719-724,共6页王未未 张永昌 刘明杰 邵蔚蓝 
国家自然科学基金项目(No.31170027);江苏高校优势学科建设工程项目(PAPD)
主要介绍一种通过原位易错PCR构建随机突变文库的新技术。本实验室最近发表的一项国际专利中,利用来源于海栖热孢菌的极耐热性DNA连接酶,在传统PCR循环中加入一个连接步骤,即变性—退火—延伸—连接的四步循环法PCR,从而实现环状质粒的...
关键词：定向进化 随机突变文库 原位易错PCR 环状质粒扩增(PPCP) 
一种降低dATP用量的简单易错PCR方法
《微生物学报》2014年第1期97-103,共7页高义平 赵和 吕孟雨 孙果忠 杨学举 王海波 
国家自然科学基金项目(30270855)~~
易错PCR是基因体外诱变的主要方法之一,是通过在PCR体系中添加Mn2+、提高Mg2+浓度和dCTP/dTTP浓度等措施达到基因诱变的目的。【目的和方法】本研究在不添加Mn2+、不调整其它任何PCR成分的情况下,通过降低dATP浓度的底物不平衡作用,对...
关键词：易错PCR 体外诱变 碱基突变 序列变异 洋葱抗菌蛋白基因 BT基因 
大豆过氧化物酶基因随机突变文库的构建被引量：2
《大豆科学》2011年第5期731-737,共7页曾家豫 郑群 廖世奇 王黎 袁红霞 杨海棠 张丽琼 张宁 
甘肃省教育厅资助项目(0601-28,0501B-16);甘肃省自然科学基金资助项目(096RJZA035);甘肃省高分子材料重点实验室开放课题资助项目(KF-06-01)
为提高大豆过氧化物酶(soybean peroxidase,SBP)的活性及研究该酶一级结构与酶活性间的关系,采用连续易错PCR方法对大豆过氧化物酶基因(sbp)进行了2轮随机突变,将第二轮易错PCR产物与质粒载体pPICZα-A分别进行双酶切,经T4DNA连接酶催...
关键词：大豆过氧化物酶 易错PCR 基因文库 随机突变 酶定向进化 
微生物基因工程育种技术的研究进展被引量：1
《国外医药（抗生素分册）》2008年第5期193-196,200,共5页代云见 王明蓉 杜天飞 
微生物基因工程育种是20世纪末发展起来的分子定向育种技术,该文重点概述了基因定点突变、易错PCR、DNA重排及基因组重排这几种微生物基因工程育种的基本原理和操作过程,并对这些方法的研究进展进行了扼要综述。
关键词：基因工程育种 基因定点突变 易错PCR DNA重排 基因组重排 
蛋白质分子进化技术研究进展被引量：1
《四川食品与发酵》2002年第1期21-25,共5页王航 余若黔 
蛋白质分子进化技术是一项新兴的基因工程技术,本文论述了其技术思想及技术手段的研究进展。
关键词：基因工程技术 技术手段 蛋白质 分子进化技术 易错PCR DNA改组 
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