李丰生

作品数：21被引量：48H指数：4
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供职机构：军事医学科学院更多>>
发文主题：大肠杆菌基因克隆腹泻免疫原性K99更多>>
发文领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
发文期刊：《中国现代医学杂志》《生物技术通讯》《中国兽医学报》《传染病信息》更多>>
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人型结核杆菌克隆DNA探针的制备及其应用的研究被引量：1
《中国现代医学杂志》1999年第4期3-5,8,共4页吴雪琼 庄玉辉 黄蓉蓉 黄培堂 李丰生 
用限制性内切酶ＰｓｔⅠ消化人型结核杆菌Ｈ３７ＲｖＤＮＡ，与质粒ｐＵＣ１９ＤＮＡ连接后转化大肠杆菌，经同位素３２Ｐ标记的人型结核杆菌Ｈ３７Ｒｖ全染色体ＤＮＡ探针筛选出６个阳性克隆（ＭＴ１～６），其中克隆ＤＮＡ片段ＭＴ２...
关键词：结核杆菌 克降 DNA探针 制备 应用 
K_99和ST_1双价保护性抗原基因重组菌株的表达及其免疫原性研究被引量：5
《中国畜禽传染病》1996年第3期5-9,共5页冯书章 许崇波 刘子 黄培堂 刘晓明 孟锐奇 姚湘燕 李丰生 王玉炯 
"八.五"科学基金
大肠杆菌耐热性肠毒素(ST_1)是引起幼畜腹泻的重要毒力因子之一,其结构基因编码19个氨基酸,无免疫原性。作者以pSLM_(004)工程菌株为始发菌株,亚克隆ST_1基因,并将ST_1基因分别重组到能有效表达K_(99)菌毛抗原的pGK_(99)之K_(99)基因(pS...
关键词：K99 ST1 抗原 基因重组菌株 免疫原性 
组织型纤溶酶原激活剂cDNA表达质粒的构建及其在CHO细胞中的表达
《生物技术通讯》1996年第2期60-65,共6页张瑜虹 黄培堂 徐秀英 李丰生 
人组织型纤溶酶原激活剂（t-PA）cDNA克隆片段。采用两种方式构建成真核表达质粒。第一:切除t-PA3＇端非编码区序列后插入SR启动子和SV40晚期Poly（A）终止信号之间,形成pMGZ6001质粒;第二:将3＇端部分切除并带有Poly（A）...
关键词：组织型纤溶酶原激活剂cDNA SR启动子 MT启动子 大T抗原 中国仓鼠卵巢细胞 
志贺氏毒素B亚单位基因的克隆与表达及其免疫保护作用的研究
《传染病信息》1995年第2期89-90,共2页苏国富 徐永强 李丰生 芮贤良 黄培堂 黄翠芬 
本研究首次从野生的志贺氏Ⅰ型痢疾杆菌(简称志Ⅰ)克隆了志贺氏毒素基因,其表达量为野生株的16倍。经次级克隆获得无毒性而有保护作用的志贺氏毒素 B 亚单位在大肠杆菌的高效表达,B 亚单位被纯化至电泳纯,分别制备了 B 亚单位特异的多...
关键词：志贺氏毒素 亚单位基因 启动子 克隆载体 单克隆抗体 多克隆 免疫保护作用 痢疾杆菌 大肠杆菌 表达量 
组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)全长cDNA序列的克隆及表达被引量：1
《生物技术通讯》1994年第2期53-57,共5页黄培堂 徐秀英 郭建辉 程军 李丰生 方继明 石成华 黄翠芬 
在先前获得t—PA部分编码序列的基础上,用化学合成法合成了缺少的5′端部分序列,并经多次重组获得了含有t—PA全长cDNA的重组表达质粒pMG-601。经序列分析表明该cDNA序列是正确的,将其导入暂时表达系统COS-7细胞中,能产生有特异性的t—P...
关键词：重组t-PA 基因克隆 CHO细胞表达 
大肠杆菌耐热性肠毒素ST_(1b)基因的亚克隆、重组及其核苷酸序列分析
《传染病信息》1994年第2期66-66,共1页冯书章 许崇波 李丰生 张喻红 黄培堂 刘晓明 刘子 
军队"八五"基金
产肠毒素性大肠杆菌（ETEC）是幼畜、婴幼儿及旅游者腹泻的重要病原菌之一。作者以大肠杆菌pSLM004菌株为始发菌株,利用合成的一对与ST1基因特定序列相匹配的引物,通过PCR扩增出了ST1b基因。该基因片段扩增物（15...
关键词：产肠毒素性大肠杆菌 基因片段 大肠杆菌耐热性肠毒素 旅游者腹泻 婴幼儿 病原菌 核苷酸序列分析 克隆载体 重组质粒 插入失活 
大肠杆菌肠毒素ST_(1b)基因的亚克隆及其核苷酸序列分析被引量：3
《中国兽医学报》1994年第3期232-235,共4页冯书章 刘晓明 刘子 李丰生 张瑜红 黄培堂 
军队医药卫生科研基金资助项目
以大肠杆菌pSLM004菌株为始发菌株,利用合成的一对与ST_1基因特定序列相匹配的引物,通过PCR扩增出了ST_(1b)基因。该基因片段扩增物经适当纯化,与克隆载体pUC18的HincⅡ切点平端连接,转化到受体菌JM101中。利用Ap抗性作为压力选择标志以...
关键词：ST1b基因 基因克隆 大肠杆菌 
羔羊大肠杆菌腹泻双价基因工程菌毛苗应用的研究
《中国兽医科技》1994年第3期3-5,共3页郭海 尹德萱 郭湘林 阎治川 张治平 牛风兰 常晓琴 马岚兰 牛冬梅 黄培堂 王叙甫 王焕金 陈明 李丰生 
对２９１只怀孕母羊皮下注射菌毛苗０．５ｍｇ／只，其局部和全身均无任何不良反应，不会造成母羊流产、早产及羔羊畸形，进一步证明该菌毛苗安全性好。应用菌毛苗主动免疫的怀羔母羊所产羔羊通过吃初孔获得被动免疫，攻毒结果，保护率...
关键词：大肠杆菌 基因工程 绵羊 疫苗 
表达K_(99)和F_(41)双价保护性抗原工程菌株的构建及免疫效果研究被引量：7
《中国科学（B辑）》1993年第9期960-965,共6页黄培堂 李丰生 王叙甫 钟声 徐秀英 张群伟 王焕金 陈明 黄翠芬 
本文应用基因重组技术,将引起犊牛、羔羊大肠菌腹泻的主要致病因子的保护性抗原基因K_(99)和F_(41)从野生株先分别克隆,然后组构成同时表达两种抗原的工程菌疫苗候选株。研究了该工程菌表达的两种抗原的性质,影响表达的条件。同时经过...
关键词：基因克隆 ETEC 疫苗 抗原 大肠杆菌 
志贺氏福氏5型菌外膜蛋白ipa BC基因的高效表达及其免疫保护作用的研究
《生物工程学报》1993年第3期247-251,共5页芮贤良 徐永强 苏国富 黄培堂 李丰生 罗素英 黄翠芬 
关键词：志贺氏福氏菌 外膜蛋白 免疫保护 基因表达 
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