国家重点基础研究发展计划(2003CB716004)

作品数:40被引量:184H指数:8
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表达条件对金属激活酶NAOase离子依赖的活性分析
《生物加工过程》2013年第5期49-54,共6页吴圆丽 李环 张琛 韦萍 
国家重点基础研究发展计划(973计划)(2003CB716004)
N-乙酰鸟氨酸脱酰基酶为一种新型手性拆分酶制剂,酶活性依赖于Mg2+、Mn2+、Zn2+及Co2+中的某种金属离子。以高表达NAOase的重组菌DH10B/argE-pHsh为研究对象,考察不同培养条件下Mg2+、Mn2+、Zn2+及Co2+4种离子对重组菌的生长、酶的表达...
关键词:N-乙酰鸟氨酸脱酰基酶 金属离子 表达条件 
采用pHsh载体克隆与表达N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶基因
《生物加工过程》2012年第5期67-71,共5页张琛 李环 吴圆丽 韦萍 
国家重点基础研究发展计划(973计划)资助项目(2003CB716004)
利用质粒pHsh为表达载体,构建高效表达N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶的基因工程菌E.coli DH10B/argE-pHsh。为提高酶活并降低生产成本,优化了诱导条件。结果表明:NAOase可在pHsh系统中高活性表达,诱导起始OD600为0.6,在空气摇床中42℃热激诱导...
关键词:N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶 大肠杆菌 克隆 
泉古菌Sulfolobus islandicus PCNA1的原核表达及其多克隆抗体的制备被引量:3
《华中农业大学学报》2010年第1期59-62,共4页田斌 张昌毅 佘群新 梁运祥 
科技部"973"计划项目(2003CB716004)资助
泉古菌Sulfolobus islandicus中PCNA有3个同源类似蛋白,本研究选取PCNA1作为研究对象,为获得可溶性表达的PCNA1蛋白,制备多克隆抗体,深入了解PCNA1基因的功能,将PCNA1基因片段克隆到组氨酸标签融合的表达载体pET30a中,利用IPTG诱导,金...
关键词:泉古菌 PCNA1基因 原核表达 金属螯合亲和层析 多克隆抗体 
酶法合成脂肪族聚酯的研究进展被引量:1
《化工新型材料》2009年第7期1-4,共4页黄小玲 何若平 周华 韦萍 
国家973项目(2003CB716004);国家自然科学重点基金项目(20336010)
酶法合成的脂肪族聚酯不仅是具有生物可降解性的高聚物,而且具有良好的生物吸收性,保证了其作为医用材料的安全性。酶法合成脂肪族聚酯的方法是一种新型的环境友好绿色化学技术,合成条件温和,产物易于分离,可以弥补传统合成方法的不足...
关键词:酶催化 脂肪族聚酯 合成 
嗜热木糖异构酶在大肠杆菌中的表达、纯化及性质研究被引量:1
《中国生物工程杂志》2009年第2期65-70,共6页许伟 丁莉 严明 许琳 
国家“973”计划(2003CB716004);国家自然科学重点基金(20336010)资助项目
为获得具有高热稳定性的木糖异构酶,运用基因工程技术,从嗜热栖热菌Thermus thermophilus HB8中克隆到嗜热木糖异构酶基因xylA。测序结果表明,该基因与GenBank数据库中相比271位的碱基A突变为G,导致氨基酸序列中N91D突变。将该基因克隆...
关键词:木糖异构酶 嗜热栖热菌 表达 纯化 酶学性质 
两步法无催化剂高效合成2-取代苯并咪唑被引量:4
《应用化学》2009年第2期130-134,共5页李维思 石倩 李振江 
国家重点基础研究发展计划(2003CB716004)资助项目
芳香醛与NaHSO3加成得到羟基磺酸盐,加入邻苯二胺或取代邻苯二胺在乙醇中回流反应,空气氧化直接得到2-取代苯并咪唑。在合成的15个化合物中,产率均超过80%。其中化合物2-(4-氯苯基)-6-甲氧基-1H-苯并咪唑尚未见报道。所有产物结构经元...
关键词:芳香醛 邻苯二胺 取代苯并咪唑 合成 
Bacillus fordii MH602海因酶序列及同源建模分析被引量:2
《计算机与应用化学》2008年第12期1521-1525,共5页季青春 梅艳珍 何冰芳 
国家863项目(2007AA021306);国家973项目(2003CB716004)
海因酶是5-取代海因生物转化制备手性氨基酸的关键酶。通过同源建模法建立MH602海因酶的三维结构,经分析,91.3%的氨基酸残基在可信区间,无氨基酸残基在不可信区间,而且能量处于较低水平,此模型可进一步研究。将MH602海因酶序列和PDB数...
关键词:海因酶 同源建模 序列 活性位点 
补料分批培养提高转氨酶发酵产酶密度的研究
《化学工程》2008年第6期50-52,67,共4页周华 潘自皓 蔡立明 宁建飞 韦萍 
国家973项目(2003CB716004);国家自然科学重点基金资助项目(20336010)
转氨酶是苯丙酮酸酶法制备L-苯丙氨酸的关键酶源,为提高转氨酶的发酵产酶密度,文章采用补料分批培养方式对大肠杆菌A5发酵产酶进行了研究。优化的补料培养工艺为:初始葡萄糖质量浓度5 g/L,初始氮源体积分数为玉米浆5 mL/L、蛋白胨质量浓...
关键词:补料 分批培养 转氨酶 发酵 
氨基磺酸催化的Mannich反应合成β-氨基酮被引量:7
《化学试剂》2008年第4期277-279,共3页吴璇 李维思 李振江 
国家973计划资助项目(2003CB716004)
采用廉价的氨基磺酸作为催化剂,芳香酮以及环己酮、3-戊酮与芳香醛、芳香胺可直接发生Mannich反应,生成相应的Mannich碱,产率均在60%~95%。氨基磺酸作为催化剂表现出高效的催化活性,优良的稳定性及良好的利用效率。
关键词:MANNICH反应 氨基磺酸 催化 
高产环糊精葡萄糖基转移酶的枯草芽孢杆菌选育、产酶与酶学特性被引量:13
《食品与生物技术学报》2008年第4期97-102,共6页胡静 陈育如 魏霞 刘友芬 
国家973计划项目(2003CB716004)
选育了一株高产环糊精葡萄糖基转移酶(CGTase)的芽孢杆菌Sx菌株,经16SrRNA测序分析,结合菌体及菌落的形态特征,鉴定该茵株为枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)。对其产酶条件与酶学特性进行了研究。结果表明,以1g/dL玉米淀粉和2g...
关键词:环糊精葡萄糖基转移酶 甜菊甙 莱鲍迪甙 16S RRNA 枯草芽孢杆菌 
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