体外复性

作品数:20被引量:155H指数:5
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人源溶菌酶在大肠杆菌中的表达与复性研究被引量:2
《生物技术通报》2020年第3期153-161,共9页张春晨 胡双艳 阮海华 
国家自然科学基金面上项目(31870122);天津市企业科技特派员项目(18JCTPJC65000)
人源溶菌酶(Human lysozyme,HLZ)是一种糖苷水解酶,具有抗菌消炎的作用,其作为抗生素的替代品,已经被广泛应用于食品业、畜牧业和医疗等领域。如何获得高产量、高活性、高纯度的人源溶菌酶一直是亟待解决的技术问题。优化人源溶菌酶编...
关键词:人源溶菌酶 大肠杆菌表达系统 包涵体 包涵体体外复性 溶壁微球菌 
脲对Flt3配体包涵体蛋白质体外复性与同时纯化的作用研究
《河北北方学院学报(自然科学版)》2017年第12期8-10,12,共4页余秀娟 张如月 卢金铭 
张家口市科学技术和地震局项目(No.1521001A);河北北方学院青年课题项目(No.Q2014022)
目的研究小分子脲对包涵体蛋白质体外复性与同时纯化的作用。方法考察在高效疏水相互作用色谱(HPHIC)流动相中添加脲时,不同浓度的小分子脲对包涵体蛋白重组人酪氨酸激酶配体(recombined human Flt3ligand,rhFL)复性效率的影响,并采用...
关键词:高效疏水相互作用色谱法  FLT3配体 包涵体蛋白质 体外复性 
脂立方相技术体系在膜蛋白结构与功能研究中的应用进展被引量:1
《中国细胞生物学学报》2015年第7期925-935,共11页姚贺帮 蔡洪敏 李典范 
脂立方相是包含连续脂双层和水通道的材料。其作为跨膜蛋白质结晶的有效介质,是一些重要和高难度膜蛋白结构解析的关键。因此,脂立方相技术体系越来越受到结构生物学家的重视。该文就脂立方相的特性及其结晶相关技术的最新进展作一简要...
关键词:膜蛋白 脂立方相 结晶 酶学分析 体外复性 
重组瑞替普酶包涵体制备及其体外复性被引量:5
《化工学报》2015年第2期709-716,共8页王俊雄 关怡新 姚善泾 
国家自然科学基金项目(21036005)~~
将携带重组瑞替普酶(reteplase,rt-PA)的质粒成功转化到大肠杆菌BL21(DE3)后,诱导表达获得包涵体,考察了诱导剂浓度、培养温度和培养时间等条件对目标蛋白表达量的影响。在此基础上,对高效表达的rt-PA包涵体体外复性过程进行了详细研究...
关键词:生物分离 蛋白质复性 二硫键 正交实验设计 瑞替普酶 
巯基微球协助重组γ-猪肝酯酶包涵体体外复性被引量:2
《化工学报》2014年第1期305-312,共8页黄寿锟 关怡新 于洪巍 姚善泾 
国家自然科学基金项目(20876138)~~
猪肝酯酶(PLE)是一种广泛应用于光学活性醇或羧酸合成的水解酶。大肠杆菌异体表达为大规模生产猪肝酯酶γ同工酶提供了可能,但表达过程中会形成包涵体,需经体外重折叠恢复其生物活性。针对γ-PLE含二硫键的特点,制备了三种不同巯基负载...
关键词:生物分离 蛋白质复性 聚集(作用) 二硫键 巯基微球 重组γ-猪肝酯酶 
来源于青霉XMZ-9两个低温脂肪酶的基因克隆、原核表达与性质测定被引量:1
《生物工程学报》2012年第4期488-497,共10页郑小梅 伍宁丰 范云六 
国家自然科学基金(No.30900839)资助~~
低温脂肪酶在低温条件下仍具有较高活性,在食品添加剂、洗涤添加剂及有机合成等产业具有非常独特的应用前景。从低温菌株中分离低温脂肪酶基因是开发新的低温脂肪酶的有效手段。首先利用油脂同化平板与三丁酸甘油酯-维多利亚蓝平板从冰...
关键词:青霉菌 脂肪酶 基因克隆 包涵体 体外复性 
层析辅助体外复性含有多对二硫键的融合蛋白质
《生物工程学报》2010年第8期1157-1164,共8页谢伟全 张贵锋 高玲 刘永东 余蓉 苏志国 
生化工程国家重点实验室开放基金(No.KF2008-7);国家自然科学基金项目(No.20976178)资助~~
为建立一种基于阴离子交换介质辅助的含多对二硫键的抗凝溶栓双功能水蛭素12肽.瑞替普酶融合蛋白质(HV12p—rPA)的复性方法,采用Q Sepharose XL作为层析复性介质,通过正交实验考察蛋白质上样量、流速、脲梯度、洗脱液中精氨酸浓度...
关键词:融合蛋白质 阴离子交换层析 复性 二硫键 
大肠杆菌表达包涵体蛋白体外复性研究进展被引量:13
《食品工业科技》2010年第6期379-383,共5页赵喜红 何小维 李文美 杨连生 王继华 彭运平 刘晓云 
广东省部产学研结合项目(2006D90504011);广东省科技攻关项目(2006B40101013);国家科技部火炬计划项目(2007GH020171)
包涵体形成是大肠杆菌表达重组蛋白常见的问题。因此,为获得大量的活性蛋白而对其包涵体进行复性的研究引起了人们极大兴趣。本文综述了近年来发展起来的低分子量添加物、反胶团、分子伴侣、层析复性等新的复性方法、复性检测方法和体...
关键词:包涵体 蛋白复性 重组蛋白 
透析法体外复性抗凝溶栓双功能HV12p-rPA融合蛋白被引量:6
《药物生物技术》2009年第2期140-143,共4页梁兰 余蓉 邓璇 李磊 吴梧桐 
生化工程国家重点实验室开放基金资助项目(2005KT2-23);教育部博士点基金资助项目(20040316005)
探索表达于大肠杆菌中的抗凝溶栓双功能水蛭素12肽和瑞替普酶融合蛋白(The fusion protein of 12 peptide of hirudin and reteplase,HV12p-rPA)的体外复性方法。采用直接透析复性和氧化复性结合透析复性两种方式,并分析复性时间、温度...
关键词:HV12p-rPA 包涵体 透析 氧化 复性 
蝎毒活性肽BmK AS的基因克隆与表达被引量:3
《沈阳药科大学学报》2007年第9期577-581,共5页邵建华 孙巍 张希 田俊楠 张景海 
辽宁省教育厅教育技术研究项目资助项目(2004D222)
目的克隆东亚钳蝎活性肽BmKAS的基因,在大肠杆菌中进行表达。方法利用PCR技术从蝎尾cDNA pool中扩增BmKAS基因,通过基因工程方法构建表达载体pET28a-BmKAS,在E.coli中进行表达,表达产物为包含体。采用分步稀释复性法对表达产物进行体外...
关键词:东亚钳蝎 蝎毒活性肽 表达 包含体 体外变性 体外复性 
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