扩展青霉碱性脂肪酶

作品数：10被引量：58H指数：4
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重组毕赤酵母发酵生产扩展青霉碱性脂肪酶的优化
《食品科技》2012年第11期14-17,22,共5页孙肖明 吴涵 卜秀娟 韩颖 张浩东 孟宪梅 
吉林省教育厅"十一五"科学技术研究项目(吉教科合字[2010]第223号)
通过毕赤酵母工程菌表达碱性脂肪酶,对表达条件进行了优化。先进行单因素实验,筛选出对碱性脂肪酶表达影响较大的4个因素:诱导时间、初始pH、甲醇添加量和接种量;在单因素实验的基础上设计四元线性回归实验,利用SPSS18数据处理软件进行...
关键词：毕赤酵母 扩展青霉 碱性脂肪酶 优化 
扩展青霉碱性脂肪酶结构基因的克隆与原核表达被引量：4
《中国生物制品学杂志》2010年第5期485-488,共4页卜秀娟 孟宪梅 柳增善 代平 
吉林省教育厅"十一五"科学技术研究项目(吉教科合字[2008]第273号)
目的克隆并原核表达扩展青霉碱性脂肪酶(PEL)结构基因。方法提取扩展青霉总RNA,经RT-PCR扩增PEL结构基因,克隆至原核表达载体pET-28a(+),构建重组表达质粒pET-28a-PEL,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析目的蛋白的表...
关键词：扩展青霉 碱性脂肪酶 结构基因 原核表达 
扩展青霉碱性脂肪酶的克隆、表达及表达产物的活性分析被引量：4
《河北师范大学学报（自然科学版）》2008年第2期234-238,共5页陈丹 卢士英 柳增善 
国家自然科学基金(30371059)
以扩展青霉为出发菌株,用Biospin RNA Simply P试剂盒提取其总RNA,反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增出扩展青霉碱性脂肪酶结构基因.构建真核重组表达质粒pEL-pIC9,电转化His4缺陷型巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,利用MD-MM平...
关键词：扩展青霉 碱性脂肪酶 毕赤酵母 基因表达 
基因组改组技术快速提高扩展青霉碱性脂肪酶产量被引量：24
《生物工程学报》2007年第4期672-676,共5页林峻 施碧红 施巧琴 何云霞 王明兹 
福建省自然科学基金资助(No2006J0073);福建省青年人才创新基金(No2004J013);福建省教育厅A类项目(NoJA050200)~~
应用基因组改组技术快速提高扩展青霉碱性脂肪酶的产量。采用经过多代诱变的碱性脂肪酶产生菌扩展青霉(Penicillium expansum)FS8486以及分离自新疆火焰山口土样的溜曲霉(Aspergillus tamarii)FS-132作为出发菌株,经过两轮基因组改组,...
关键词：基因组改组 扩展青霉 碱性脂肪酶 溜曲霉 
扩展青霉碱性脂肪酶基因5’端侧翼区域的克隆与鉴定被引量：3
《工业微生物》2007年第1期14-19,共6页杨月梅 江贤章 张娟梅 谢必峰 杨欣伟 林琳 黄建忠 
国家自然科学基金(30270033);福建省自然科学基金(B0120001)资助
应用衔接头PCR技术,扩增得到约2000 bp的扩展青霉碱性脂肪酶基因5’端侧翼区域的单一产物。对该产物测序并提交GenBank数据库(GenBank accession DQ677520),经序列比对分析,发现该序列具有真核启动子序列的基本结构特征,含有TATA盒、CAA...
关键词：扩展青霉 脂肪酶 5’端侧翼区 衔接头PCR 启动子 GFP 
D92P点突变对扩展青霉碱性脂肪酶最适作用温度的改善被引量：3
《生物技术通讯》2005年第1期31-33,共3页陈木妹 林琳 
国家自然科学基金项目(30270033);福建省自然科学基金重点项目(B0120001)
利用重叠延伸PCR法对扩展青霉碱性脂肪酶(PEL)基因进行体外定点突变,并构建了含突变基因的重组质粒pPIC3.5K-lip-D92P。将该质粒在毕赤酵母GS115菌株中表达。与野生型表达产物PEL-GS相比较,突变体表达产物PEL-D92P-GS最适作用温度为45℃...
关键词：扩展青霉 碱性脂肪酶 最适作用温度 定点突变 重叠延伸PCR法 蛋白质工程 
E83V对扩展青霉脂肪酶最适作用温度的影响被引量：4
《微生物学通报》2005年第1期85-89,共5页陈国仁 林琳 
国家自然科学基金资助项目(No.30270033);福建省自然科学基金重点项目资助(No.B0120001)~~
利用重叠延伸PCR法对扩展青霉碱性脂肪酶(PEL)基因作了体外定点突变,获得了最适作用温度有所提高的突变体。含突变基因的重组质粒pPIC3.5K-lip-E83V在PichiapastorisGS115中表达。对突变体表达产物PEL-E83V-GS与野生型表达产物PELGS作...
关键词：扩展青霉碱性脂肪酶 定点突变 最适作用温度 
扩展青霉碱性脂肪酶基因在毕赤酵母中的高效表达被引量：24
《生物工程学报》2003年第2期231-235,共5页袁彩 林琳 施巧琴 吴松刚 
国家自然基金项目 (No.30 2 70 0 33);福建省自然科学基金重点项目 (No .B0 12 0 0 0 1)资助。~~
将编码扩展青霉碱性脂肪酶 (PEL)的cDNA克隆到酵母整合型质粒pPIC3.5K ,电转化His4缺陷型巴斯德毕赤酵母 (Pichiapastoris)GS115 ,通过橄榄油 MM平板及PCR方法筛选和鉴定重组子。重组子发酵液经SDS PAGE分析、橄榄油检验板鉴定 ,表明扩...
关键词：扩展青霉碱性脂肪酶 巴斯德毕赤酵母 基因表达 质粒 
扩展青霉碱性脂肪酶的纯化及N-端氨基酸序列分析被引量：2
《厦门大学学报（自然科学版）》2002年第5期600-604,共5页林琳 施巧琴 郭小玲 吴松刚 吴祥甫 谢联辉 
国家"九五"重大科技攻关项目 (96c 0 3 0 2 0 1);福建省自然科学基金重点项目 (B0 12 0 0 0 1)资助
扩展青霉PF898的发酵液经硫酸铵沉淀、DE5 2纤维素离子交换柱、SephadexG 10 0凝胶过滤等步骤 ,其碱性脂肪酶的活性被纯化了 79.3倍 ,回收率约 15 % ,比活为 76 .9U/mg .纯化蛋白经SDS PAGE和HPLCTSK GELG30 0 0SW凝胶过滤分析显示其分...
关键词：N-端氨基酸 序列分析 扩展青霉 碱性脂肪酶 蛋白质纯化 水解酶 酶活性 
扩展青霉碱性脂肪酶cDNA的克隆和表达被引量：3
《复旦学报（自然科学版）》2001年第5期509-515,共7页邬敏辰 李江华 黄伟达 孙崇荣 
国家"九五"科技攻关资助项目(96-C03-02-01)
采用 ＴＲＩｚｏｌ试剂一步法所抽提的总 ＲＮＡ的 Ｄ（２６０）／Ｄ（２８０）值为 １.８２，甲醛变性电泳呈现真核微生物所特有的 ２８Ｓ ｒＲＮＡ和 １８Ｓ ｒＲＮＡ 条带．根据扩展青霉所产碱性脂肪酶（Ｌｉｐ ＰＥ）Ｎ末端 ２０个...
关键词：扩展青霉WMC20718 碱性脂肪酶 基因克隆 表达 氨基酸残基序列 真核生物 CDNA 
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