MONELLIN

作品数:11被引量:35H指数:3
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甜味蛋白monellin高甜度、强热稳定性突变体的分子构建及性质研究
《中国食品学报》2024年第8期53-61,共9页刘毅 卢尚阳 王语晴 刘波 
国家自然科学基金项目(31970935);山东省自然科学基金项目(ZR2020KC035)。
本文采用PCR技术对单链monellin(MNEI)进行定向突变,将构建好的重组质粒pET15b-MNEI双位点突变体转化到大肠杆菌BL21-codonPlus(DE3)-RIL中进行异源蛋白质的重组表达。通过镍柱亲和层析和分子筛收集纯化后的目的蛋白,使用蒸馏水在截留...
关键词:甜味蛋白 MONELLIN 二级结构 基因突变 甜味阈值 热稳定性 
重组甜味蛋白Monellin在E.coli中的表达条件及其对ICR小鼠血糖的影响
《中国调味品》2021年第7期1-6,共6页杨冬梅 王晨璐 刘嘉健 方越 葛瑛 韩淳致 曹荣月 
2020互联网大创“牌过留痕,生化不再危机”(3312000657);2019年校级创新创业课程;国家级大学生创新创业训练计划项目(J1310032,202010316014G);国家自然科学基金资助项目(81673340);中国药科大学2020年创新创业菁英培育计划立项“35糖尿病患者的甜”。
实验探究了重组Monellin菌株的最佳培养条件,并对其进行了甜味阈值确认和血糖值影响实验。实验所用菌种为实验室构建保存的BL21(DE3)-pET28a Monellin菌种,利用不同浓度的乳糖和IPTG诱导该菌种生成目的蛋白,探究其最佳诱导条件,利用镍...
关键词:甜味蛋白Monellin 诱导条件 镍柱亲和层析 甜味阈值 血糖值 
甜味蛋白Monellin及其基因工程被引量:5
《中国调味品》2018年第7期178-181,共4页赵萌 蔡成固 刘波 
甜味蛋白monellin是一种高甜度、低热量的天然植物甜味蛋白,因其本身不含糖分,未来有望成为肥胖症、糖尿病和龋齿病等与糖的摄入有关的流行病患者的甜味替代品。但由于其生产成本高、热稳定性低等原因限制了其的大规模工业化生产,因此...
关键词:MONELLIN 甜味蛋白 生化特性 基因工程的应用 
通过在低细胞浓度下启动甲醇诱导、优化碳/能量代谢模式促进毕赤酵母表达Monellin被引量:3
《生物工程学报》2018年第2期282-293,共12页槐强强 贾禄强 丁健 陈珊珊 孙佼文 史仲平 
国家自然科学基金(No.21606106);江苏省自然科学基金(Nos.BK20150127;BK20160162)资助~~
重组毕赤酵母生产表达外源蛋白的过程中,一般在细胞达到高密度后开始启动甲醇诱导。也有报道指出,在较低细胞浓度下,启动甲醇诱导可以有效地控制整个发酵过程的溶解氧浓度,缓解毒副产物的积累,促进目标蛋白的表达。但是,该操作策略下,甲...
关键词:碳代谢比 诱导 MONELLIN NADH利用效率 毕赤酵母 
Monellin-EGFP融合蛋白在毕赤酵母中的表达被引量:3
《食品科学》2012年第13期171-175,共5页金筱耘 赵爱春 李军 李镇刚 王茜龄 吴存容 余茂德 
国家现代农业产业技术体系建设专项(CARS-22-ZJ0103);重庆市蚕桑重大科技专项(CSTC;2009AA1024)
根据已报道的Monellin甜蛋白氨基酸序列,结合毕赤酵母与桑树密码子的偏好性,人工设计合成单链monellin基因,并与增强型绿色荧光蛋白EGFP基因连接,构建融合表达载体。采用电击转化法成功将表达载体导入毕赤酵母GS115中,并获得高效表达的...
关键词:Monellin甜蛋白 绿色荧光蛋白 真核表达 桑树 
响应面法优化酿酒酵母工程菌产甜蛋白monellin发酵培养基被引量:5
《中国酿造》2011年第9期50-55,共6页赵沁沁 刘军 徐爱才 欧阳文 闫达中 赵胜军 
湖北省教育厅重点项目(D200718002)
对酿酒酵母工程菌WHF9/monellin在液体培养基中产甜蛋白monellin的条件进行了优化。采用单因子试验筛选出细胞生长培养基的最适碳源为蔗糖,氮源为玉米浆干粉,且应添加微量元素溶液。在此基础上,利用Plackett-Burman试验设计筛选出影响...
关键词:MONELLIN 酿酒酵母 Plackett-Burman试验设计 响应面法 优化 
甜蛋白Monellin在毕赤酵母中的表达及响应面法优化发酵培养基被引量:3
《中国酿造》2011年第2期116-120,共5页徐爱才 刘军 李鑫 赵沁沁 
湖北省教育厅重点项目资助(D200718002)
根据毕赤酵母密码子偏好,人工合成了单链甜蛋白Monellin基因,构建了胞内表达载体pPICZA-Mon,重组载体经Sac I线性化后,电击转入毕赤酵母GSll5,转化子经PCR分析鉴定后通过甲醇诱导实现了甜蛋白Monellin在毕赤酵母中的胞内表达。采用Desig...
关键词:MONELLIN 基础盐培养基 毕赤酵母 响应面分析 
甜蛋白Monellin在毕赤酵母中的分泌表达被引量:2
《现代食品科技》2008年第1期20-22,共3页刘西常 张玉军 于红 
本研究采用毕赤酵母偏爱密码子,人工合成了高甜度Monellin基因,并构建了重组分泌型酵母表达载体pPIC9M,通过电击转化获得了可高效分泌表达有甜味活性高甜度Monellin的重组毕赤酵母GS115/pPIC9M。通过PCR检测证实Monellin基因已经整合进...
关键词:甜蛋白 MONELLIN 毕赤酵母 分泌表达 
植物甜蛋白monellin基因工程菌表达条件的研究被引量:1
《食品与发酵工业》2006年第6期23-26,共4页蔡恒 陈忠军 万红贵 
将带有monellin基因的重组分泌型表达载体pETMO转入大肠杆菌BL21(DE3),得到重组工程菌株BMC33。经IPTG诱导,其所含有的甜蛋白基因可高效表达。研究不同的表达条件对甜蛋白表达水平的影响,得到优化发酵条件:装液量为50 mL/250 mL三角瓶,...
关键词:大肠杆菌 甜蛋白MONELLIN 重组菌株 表达条件 
甜蛋白Monellin在巴斯德毕赤氏酵母中的胞内表达被引量:2
《复旦学报(自然科学版)》2002年第6期650-654,共5页于学红 袁汉英 高卜渝 范长胜 周欣 李育阳 
将PCR扩增得到的Monellin基因片段插入Pichiapastoris胞内表达质粒pPIC3.5K',然后转入Pichiapas torisSMD1168受体菌中.用G418筛选高拷贝菌株,并进一步对其进行PCR鉴定.获得的阳性克隆菌株经甲醇诱导60h,SDS PAGE结果显示菌株破壁液中...
关键词:甜蛋白 MONELLIN 巴斯德毕赤氏酵母 酵母表达 
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