国家高技术研究发展计划(2011AA100905)

作品数：74被引量：352H指数：8
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相关作者：堵国成陈坚石贵阳张梁丁重阳更多>>
相关机构：江南大学中国农业大学无锡江大百泰科技有限公司滁州学院更多>>
相关期刊：《中国生物工程杂志》《生物工程学报》《生物技术通报》《食品科学》更多>>
相关主题：枯草芽孢杆菌发酵优化酶学性质大肠杆菌分泌表达更多>>
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嗜热脂肪芽孢杆菌（Geobacillus stearothermophilus）来源耐热β-半乳糖苷酶BgaB转糖苷催化活性改造被引量：2
《食品与发酵工业》2020年第2期1-6,共6页董艺凝 陈卫 陈海琴 赵建新 陈永泉 张灏 
国家自然科学基金项目(31301523;31171636);安徽省自然科学基金面上项目(1708085MC72);“十二五”国家“863”计划(2011AA100905);校级科技创新团队支持计划(00001702);滁州市第六批“221”产业创新团队项目(特色农产品开发与利用)
该研究以GH42家族嗜热脂肪芽孢杆菌(Geobacillus stearothermophilus)来源耐热β-半乳糖苷酶BgaB为研究对象,针对其转糖苷活性弱的问题,采用定点突变与化学修饰相结合的方法,对其预测亲核催化位点Glu303进行了功能研究与分子改造。所得...
关键词：Β-半乳糖苷酶 低聚半乳糖 转糖苷活性 嗜热脂肪芽孢杆菌 定点突变 化学修饰 
rDNA介导的乳酸克鲁维酵母整合型表达载体的构建及初步验证
《食品与生物技术学报》2019年第10期87-97,共11页孙海烨 张梁 李由然 顾正华 丁重阳 石贵阳 
国家863计划项目(2011AA100905);江苏省杰出青年科学基金项目(BK20140002);国家星火计划重点项目(2015GA690004)
构建一个适用于乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)稳定的整合型表达载体,并通过鼠灰链霉菌(Streptomyces murinus)来源的腺苷酸脱氨酶基因(AMPD)的表达对该载体进行初步验证。以质粒pMD 19T-simple为空骨架,K.lactis GG799来源的18S...
关键词：乳酸克鲁维酵母 18S rDNA 整合表达 AMP脱氨酶 RT-QPCR 拷贝数 
葡萄糖氧化酶基因在解脂耶氏酵母中的表达及发酵优化被引量：2
《食品与生物技术学报》2018年第12期1233-1241,共9页刘晓筱 张娟 陈坚 堵国成 
国家自然科学基金项目(31470160);国家高技术研究发展计划项目(2011AA100905);中国博士后科学基金特别资助项目(114957)
葡萄糖氧化酶(β-D-glucose:oxygen 1-oxidoreductase;EC 1.1.3.4,简称GOD)是生物领域中至关重要的工具酶之一,被广泛应用于食品工业、饲料工业、纺织、医药等行业中。作者构建了一株重组解脂耶氏酵母Yarrowia lipolytica 1-28,分泌GOD...
关键词：解脂耶氏酵母 葡萄糖氧化酶 发酵优化 
脯氨酸氨肽酶枯草芽孢杆菌分泌表达及特性表征被引量：2
《食品与生物技术学报》2018年第11期1135-1140,共6页汪克红 王开道 田亚平 
国家863计划项目(2011AA100905)
构建重组枯草芽孢杆菌大量分泌米曲霉脯氨酸氨肽酶,纯化后对其基本酶学性质进行表征。将脯氨酸氨肽酶cDNA序列从载体pMD19-pap上克隆后连接到载体pMA5上得到重组质粒,转化枯草芽孢杆菌WB600后进行分泌表达。通过在培养基中加入5%D-山梨...
关键词：脯氨酸氨肽酶 枯草芽孢杆菌 分泌表达 特性表征 
代谢工程改造毕赤酵母生产葡萄糖二酸被引量：2
《食品与生物技术学报》2018年第9期955-961,共7页刘叶 巩旭 康振 堵国成 陈坚 华兆哲 
国家973计划项目(2013CB733602);国家863计划项目(2011AA100905);江苏省博士后基金项目(1301010B);教育部长江学者和创新团队发展计划项目(IRT1135)
葡萄糖二酸是一种具有重要生物功能的有机酸,为了实现微生物合成葡萄糖二酸的高效生产,异源表达来源于小鼠基因组的MIOX基因及Pseudomonas putida KT2440的udh基因,在毕赤酵母中构建葡萄糖二酸合成途径,实现了葡萄糖二酸的生成。通过在...
关键词：葡萄糖二酸 毕赤酵母 代谢工程 发酵优化 
黑曲霉阿魏酸酯酶在毕赤酵母中的组成型表达被引量：8
《微生物学通报》2017年第1期68-78,共11页黄雪月 张梁 李赢 李由然 顾正华 丁重阳 石贵阳 
国家高技术研究发展计划项目(863计划)(No.2011AA100905)~~
【目的】实现黑曲霉来源的阿魏酸酯酶在毕赤酵母(Pichia pastoris GS115)中的组成型表达。【方法】以黑曲霉(Aspergillus niger)基因组为模板,经重叠延伸PCR扩增得到阿魏酸酯酶基因(AnfaeA),将其与载体pGAP9K相连,构建重组表达载体p GAP...
关键词：黑曲霉 阿魏酸酯酶 GAP启动子 组成型表达 发酵优化 
定点突变提高毕赤酵母产葡萄糖氧化酶的氧化稳定性被引量：5
《食品与生物技术学报》2016年第12期1260-1267,共8页闻一凡 顾磊 张娟 堵国成 
国家863计划项目(2011AA100905);国家自然科学基金项目(31470160)
通过定点突变的方法,将来源于黑曲霉Aspergillus niger的葡萄糖氧化酶的甲硫氨酸替换为亮氨酸,以期提高葡萄糖氧化酶的耐氧化性。野生型的葡萄糖氧化酶和突变酶M305L、M524L、M556L和M582L的基因分别在巴斯德毕赤酵母中分泌表达,对突变...
关键词：葡萄糖氧化酶 重组 定点突变 黑曲霉 巴斯德毕赤酵母 
腺苷酸脱氨酶在乳酸克鲁维酵母中构建表达被引量：2
《微生物学通报》2016年第11期2341-2352,共12页许强 张梁 李由然 李赢 顾正华 丁重阳 石贵阳 
国家高技术研究发展计划项目(863计划)(No.2011AA100905)~~
【目的】实现鼠灰链霉菌来源经密码子优化后的腺苷酸脱氨酶基因在乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis GG799)中组成型表达。【方法】以鼠灰链霉菌(Streptomyces murinus)来源的腺苷酸脱氨酶(AMP)基因经密码子优化后作为模板,设计特异...
关键词：乳酸克鲁维酵母 腺苷酸脱氨酶 重组表达 发酵优化 
复合重组磷脂酶用于大豆油脱胶的工艺优化被引量：5
《食品科学》2016年第18期13-18,共6页程实 王长坤 张梁 李赢 石贵阳 杨盛荣 陈国安 
国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2011AA100905);教育部"新世纪优秀人才支持计划"项目(NCET-11-0665);江南大学食品科学与技术国家重点实验室自由探索课题项目(SKLF-ZZA-201201)
利用实验室前期构建的重组大肠杆菌所产磷脂酶A_1(phospholipase A_1,PLA_1)和磷脂酶C (phospholipase C,PLC)进行大豆油酶法脱胶研究,探讨自主开发重组酶进行酶法脱胶的可行性。以诺维信商品酶Lecitase Ultra^(TM)为对照,研究酶法脱胶...
关键词：重组大肠杆菌 复合磷脂酶 大豆油 酶法脱胶 正交试验 
双歧杆菌胆盐水解酶基因的重组表达、纯化与酶学性质被引量：5
《食品与生物技术学报》2016年第8期792-800,共9页周晓玲 张娟 陈坚 堵国成 
国家863计划项目(2011AA100905);国家自然科学基金项目(31100064);教育部长江学者和创新团队发展计划项目(IRT1135);中央高校基本科研业务费专项(JUDCF10045);江苏省自然科学基金项目(BK2012553)
为了提高胆盐水解酶在大肠杆菌中的表达量,研究重组胆盐水解酶的酶学性质。利用大肠杆菌表达系统,对双歧杆菌来源的胆盐水解酶进行了表达。将PCR获得的胆盐水解酶基因克隆至表达载体p ET-22b(+),得到重组质粒p ET-22b(+)-bsh,并转化大...
关键词：胆盐水解酶 双歧杆菌 大肠杆菌 重组表达 酶学性质 
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